Johdanto
Reaktiivinen hapen lajien (ROS) ovat erittäin unstableand reaktiivisia molekyylejä, jotka sisältävät happea moieties. He includehydrogen vetyperoksidia (H2O2), superoksidia anioni(O2●−) ja hydroksyyli-radikaali (●OH).Vaikka ROS on tunnustettu sytotoksiset aineet, ne voivat palvella assecond sanansaattajat hallita monia cellular tapahtumia geneexpression, erilaistumista, proliferaatiota ja solun kuoleman(1,2)., ROS ovat jatkuvasti syntyy byendogenous aerobista aineenvaihduntaa soluissa muodossa theO2●− ja/tai ovat tarkoituksella tehty oksidaasit,kuten nikotiiniamidiadeniinidinukleotidi fosfaatin (NADPH) oxidaseand ksantiinioksidaasi (3).O2● – muuntuu toH2O2-entsyymiksi superoksididismutaasi (4). H2O2 isfurther jalostetaan O2: ksi ja H2O: ksi katalaseor glutationiperoksidaasilla (5).Verrattuna muiden jäsenten ROS, ei-radicalH2O2 voi vapaasti tunkeutua cellmembranes, ja se on vuorovaikutuksessa rauta rauta (Fenton kemia),joka tuottaa erittäin tuhoisa ja lyhytaikainen●OH., Erilaisten ROS-muotojen tuottaminen eri tasoilla voi olla joko hyödyllistä tai haitallista soluille ja kudoksille.Erityisesti liialliset ROS-määrät voivat olla seurausta niiden ylituotannosta ja/tai antioksidanttien sääntelyn vähentämisestä.Kohonneeseen ROS voi vaurioittaa DNA: ta, proteiineja andlipids soluissa, syyllistämättä niitä etiologia useita humandiseases, mukaan lukien syöpä (6-9).
Apoptoosi on ohjelmoitu solukuolema ja tapahtuu viatwo eri reittejä: mitokondrioiden luontainen reitti ja thereceptor välittämä ulkoinen polku (10)., Avain askel themitochondrial-välitteinen apoptoosi on translokaatiossa cytochromec alkaen mitokondriot sytosolissa ja sen subsequentinteraction kanssa Apaf-1 and caspase-9 muodostaa monimutkaisia(apoptosome). Apoptosomi aktivoi executive caspase-3: n,-6: n ja -7: n (11). Päinvastoin, theextrinsic koulutusjakso alkaa sitoutuminen tiettyihin ligandien, kuten TNF-α -, REITTI-ja Fas kunkin solun kuoleman reseptoreita,jotka stimuloivat toimintaa caspase-8 ja -3 (12)., Caspase-8 pilkkoo TARJOUKSEN, apro-apoptoottisen sytosolisen proteiinin Bcl-2 perheen, tuottaa atruncated tuote, tBID, joka tulee mitokondrioita anddecreases mitokondrion kalvon potentiaali (MMP;ΔΨm), mikä vapauttaa sytokromi-c. Thetranslocation toisen apoptoottisten proteiinien, Bax päässä sytosolissa tothe mitokondriot myös laukaisee samanlainen menetys MMP(ΔΨm). Caspase-3 on avain executive caspase; itsactivation voi järjestelmällisesti purkaa eheyden cellsthrough pilkkomaan useita keskeisiä proteiineja, kuten poly(ADP-riboosi)polymeraasi (PARP) ja RhoGDI.,
Keuhkot ovat alttiita erilaisia ilmassa andbloodborne vammoja, jotka voivat näin ollen aiheuttaa keuhkojen fibroosia andcancer (13). Syöpää aiheuttavan oflung-syövän katsotaan olevan tiukasti yhteydessä H2O2-välitteiseen kudostulehdukseen. Duringinflammation, kudosten pitoisuudet H2O2are lämpötila saavuttaa lähes millimolar tasoa, kun taas alhainen H2O2 valmistettu NADPH oxidasesunder normaali olosuhteissa on arveltu, ei ole higheraffect kuin solukalvon mikroympäristön, kuten lipidrafts (14,15)., Kuitenkin, molemmissa tapauksissa,H2O2 voi moduloida elintärkeitä solujen toimintoja ofcell leviämisen, kuolema ja eriyttäminen muuttamalla signalingcascades ja geenien ilmentyminen ja sen korkeammat tasot voivat johtaa toapoptosis ja/tai nekroosi. Eksogeenista H2O2: ta käytetään usein edustavana ROS-valmisteena oksidativestressin simuloimiseksi soluissa ja kudoksissa. H2O2 ei ole myrkyllistä ihmisen napanuoran veinendoteelisolujen ja ihmisen keuhkovaltimon sileälihassolujen normaaleille soluille (16,17). H2O2-triggeredcell kuolema keuhkosyöpäsoluissa voi olla sytotoksikologinen tutkimusinterest.,
Tässä tutkimuksessa molekyylitason vaikutuksia ofexogenous H2O2 on Calu-6 ja keuhkojen A549 cancercells arvioitiin suhteessa solujen kasvua ja kuolemaa, sekä anti-apoptoottisen vaikutuksia eri caspase-estäjät wereinvestigated H2O2-käsitellyt keuhkojen cancercells.,
Materiaalit ja menetelmät
Cell culture
ihmisen keuhkosyöpä Calu-6-ja A549 solun lineswere ostaa Korean Solu Line Pankki (Seoul, Korea) lopussa, viljelty RPMI-1640 medium täydennetty 10% fetalbovine seerumia (FBS; Sigma-Aldrich; Merck KGaA, Darmstadt, Saksa)ja 1% penisilliini-streptomysiiniä (Gibco-BRL; Thermo FisherScientific, Inc., Waltham, MA, Yhdysvallat). Nämä solut olivat regularlycultured 100 mm muovi kudosten kulttuuri ruokia (Nunc, Roskilde,Tanska) ja korjataan kanssa trypsiini-EDTA-liuosta (Gibco-BRL;Thermo Fisher Scientific, Inc.).,
Reagenssit
Solujen kasvua ja solujen numberassays
Solujen kasvua muutoksia oli arvioinut assessing3-(4,5-dimetyylitiatsol-2-yyli)-2, 5-difenyylitetratsoliumbromidi (MTT;Sigma-Aldrich; Merck KGaA) väriaineen absorbanssi kuten aiemmin on kuvattu(19). Elinkykyiset ja kuolleet solunumerot määritettiin trypanin sinisoluvärjäysmenetelmällä (20). Solut altistettiin designatedamounts H2O2 kanssa tai ilman 15 µM eachcaspase estäjä 24 h.,
solusyklin ja osa-G1 cellanalysis
solusyklin ja osa-G1-solujen analysointi olivat osa propidium jodidi (PI; Sigma-Aldrich; Merck KGaA) värjäys aspreviously kuvattu (20). Cellswere alttiina nimetty määrät ofH2O2 kanssa tai ilman 15 µM kunkin caspaseinhibitor 24 h. Solusyklin jakaumia analysoitiin aFACStar virtauksen cytometer (Becton-Dickinson and Company, FranklinLakes, NJ, USA).,
Anneksiini V-FITC värjäys solujen deathdetection
Apoptoottisen solukuoleman tarkastettiin mittaamalla cellsstained kanssa Anneksiini V-fluoreseiini-isotiosyanaatti (FITC;Invitrogen; Thermo Fisher Scientific, Inc.) kuten aiemmin on kuvattu (20). Solut altistettiin thedesignated määriä H2O2 kanssa tai ilman 15µM kunkin caspase-estäjä 24 h. Anneksiini V-FITC värjäys wasanalyzed kanssa FACStar virtauksen cytometer (Becton-Dickinson andCompany).,
Arvioidaan toiminnan MMP(ΔΨm)
MMP (ΔΨm) arvioitiin rhodamine123 fluoresoiva väriaine (Sigma-Aldrich; Merck KGaA) kuin previouslydescribed (21). Solut olivat exposedto nimetty määriä H2O2 kanssa orwithout 15 µM kunkin caspase-estäjä 24 h. Rodamiini 123staining intensiteetti oli analysoitu, jonka FACStar virtauksen cytometer(Becton-Dickinson and Company). Rhodamiini 123: n puuttuminen soluista osoitti MMP: n (δm) häviämisen keuhkopusseissa., MMP (ΔΨm) tasot soluissa ei myös MMP(ΔΨm)-tappio solut olivat ilmaistuna tarkoittaa fluorescenceintensity, joka oli arvioitu CellQuest-ohjelmistolla (versio 5.1;Becton-Dickinson and Company).
Western blot-analyysi
muutokset Bcl-2, caspase-3 ja PARP inH2O2-käsitellyissä soluissa analysoitiin westernblotting. Lyhyesti, 1×106 solua 60 mm: n kulttuuri-astia(Nunc) olivat inkuboitiin nimetty määrät ofH2O2 24 h. Näytteet sisältävät 20 µg totalprotein oli erotettu 8 tai 12.,5% SDS-PAGE-geeli, siirretään toImmobilon-P PVDF-kalvoja (EMD Milliporen, Billerica, MA, USA) byelectroblotting ja sitten kysyneet anti-Bcl-2, anti-caspase-3,anti-PARP-ja anti-β-aktiini-vasta-aineita (laimennus 1:5 000 kpl; Santa CruzBiotechnology, Santa Cruz, CA, USA). Kalvoja hoidettiin peroksidaasi-konjugoituneilla sekundaarisilla vasta-aineilla (diluutio1:5 000; Cell signaling Technology, Inc.). Bloteista kehitettiin ECL-sarjan (Amersham Life Science, Arlington Heights, IL,USA) bymealaisia.,
Kvantifiointi caspase-3 ja −8activities
toimintaan caspase-3 ja -8 arvioitiin bycaspase-3 ja -8 kolorimetrinen määritys sarjat (R&D Systems, Inc.) kuvattu ennalta (20). Tiivis, 1×106 solua 60 mm: n kulttuuri-astia (Nunc) weretreated 75 µM H2O2 24 h. Samplescontaining 50 µg kokonaisproteiinia käytettiin arvioimaan caspase-3 ja −8activities.
Tilastollinen analyysi
Tiedot, jotka edustavat vähintään kahta independentexperiments (keskiarvo ± SD) analysoitiin kautta instat-ohjelmaan ohjelmisto(GraphPad Prism4; GraphPad Software, Inc.,, San Diego, CA, Yhdysvallat). Thestudentin t-testiä tai yksisuuntaista varianssianalyysiä (ANOVA) käytettiin Posthoc-analyysillä Tukeyn monivertailutestillä parametriseen aineistoon. P<0, 05 katsottiin merkitsevän astatistisesti merkittävää eroa.
Tulokset
H2O2 vaikuttaa thecell kasvua ja sykli jakelu keuhkosyöpä solut,
cellular vaikutukset H2O2on kasvu keuhkosyöpään soluja tarkasteltiin 24 h., Treatmentwith 50-250 µM H2O2 merkittävästi reducedviable (trypan blue-negatiivinen) ja lisääntynyt kuollut (trypanblue-positiivinen) Calu-6-solujen annoksesta riippuvaisella tavalla (Kuva. 1 A). Perustuu MTT: n määrityksissä, 50-250 µMH2O2 merkittävästi heikennetty kasvu ofCalu-6-solujen kanssa IC50 ~50 µM (Kuva. 1 B). Kun solusyklin distributionin H2O2-käsitellyt Calu-6-solut tutkittiin,Calu-6-solut käsiteltiin 75-µM H2O2demonstrated merkittävä G1-vaihe pidättää solun cyclecompared ohjaus-solujen (Kuva.2 A ja B)., Kuten Calu-6, kun H2O2treatment määrä A549 eläviä soluja vähentynyt ja kuollut cellsincreased merkittävästi annoksesta riippuvaisella tavalla (Kuva. 1C). Lisäksi H2O2 pienensi annoksesta riippuvaisesti a549-solujen kasvua IC50: n ollessa ~100 µM(Kuva. 1D). 100 µMH2O2-hoito indusoi myös merkitsevästi G1-phasearrestia a549-soluissa verrattuna kontrollisoluihin (Kuva. 2 A ja B).
H2O2 influencescell kuolema ja MMP (ΔΨm) inH2O2-hoitoa keuhkosyöpä solut,
tämän Jälkeen rooli H2O2in keuhkosyöpä solukuolemaa tutkittiin tarkemmin, saada moreunderstanding., Vaikka 50-100 µM H2O2significantly lisätyn prosenttiosuudet osa-G1 solujen Calu-6cells, 250 µM H2O2 ei lisätä thepercentage osa-G1-solujen näiden solujen (Kuva. 2 A ja C). Kuitenkin hoito with50–250 µM H2O2 annoksesta riippuvaa lisääntynyt thenumbers ja Anneksiini V-FITC-värjätään solut Calu-6-solujen (Kuva. 3 A). Kun vaikutus ofH2O2 on MMP (ΔΨm) vuonna Calu-6 cellswas arvioidaan käyttämällä rodamiini 123, H2O2provoked menetys MMP (ΔΨm) annos-dependentmanner (Fig. 3 B)., Osalta toMMP (ΔΨm) tasolla Calu-6 solua lukuun ottamatta negativerhodamine 123 värjäystä solut, H2O2 decreasedthe MMP (ΔΨm) tasolla Calu-6-solujen annos-dependentmanner (Fig. 3 C). Vuonna A549-soluja,hoito 50 ja 100 µM H2O2 significantlyincreased prosenttiosuudet osa-G1-soluja, mutta hoidon 250and 500 µM H2O2 ei näytä tätä vaikutusta(Kuva. 2 A ja C).H2O2-annoksesta riippuvasti lisäsi annexin V-FITC-värjättyjen a549-solujen määrää(Kuva.3D). Lisäksi H2O2-annoksesta riippuva pienensi MMP: n (ΔΨm) menetystä a549-soluissa (Kuva. 3 E)., Kun taas 50 µMH2O2 lisääntynyt MMP (ΔΨm) tasolla inA549 soluja, 100-250 µM H2O2 significantlydecreased MMP (ΔΨm) tasoa näiden solujen (Kuva. 3 F).
H2O2 influencesapoptosis liittyviä proteiineja ja caspases inH2O2-hoitoa keuhkosyöpä solut,
Arviointi apoptoosin liittyviä proteiineja duringH2O2 aiheuttama keuhkojen solujen kuolema paljasti thatBcl-2, anti-apoptoottisten proteiinien, vähentynyt uponH2O2 hoito Calu-6-solujen (Kuva. 4 A). Pro-kaspaasi-3: n tasoa pienennettiin 75 µM H2O2: lla (Kuva. 4 A). H2O2 ei muuttanut 116 kDa PARP: n katkeamatonta muotoa (Kuva. 4 A)., Toiminnan caspase-3 seuraa, että voidaan korottaa H2O2-käsitellyt Calu-6cells, kun taas caspase-8 ei merkittävästi muuttunut(Kuva. 4 B). 50-100 µMH2O2-hoito näytti laskevan BCL-2 -, Pro-kaspaasi-3-ja PARP-proteiinipitoisuuksia A549-soluissa (Kuva. 4 C). Erityisesti 100 µMH2O2 osoitti näiden proteiinien tasojen vähenevän selvästi. Hoito 75 µM H2O2significantly lisätyn toimintaa caspase-3 A549-solujen andsignificantly lisääntynyt aktiivisuus caspase-8 (Fig. 4D).,
Caspase-estäjät vaikuttaa solujen kasvuun ja kuoleman H2O2-käsitellyt keuhkojen cancercells
tämän Jälkeen yritimme tulkita rooli yksittäisten caspases H2O2 aiheuttama celldeath 24 h keuhkosyöpä solulinjoja. Calu-6-ja A549 cellswere esi-inkuboidaan 15 µM caspase-inhibiittori 1 h beforetreatment 75 tai 100 µM H2O2. Yksikään kaspaasin estäjistä ei vaikuttanut H2O2: n indusoimaan kasvun estoon sekä Calu-6-että A549-solulinjoissa(Kuva. 5 A ja D)., Kaikki H2O2-treatedCalu-6: ssa testatut kaspaasi-inhibiittorit kuitenkin pienensivät Sub-G1-solujen prosenttiosuudet kontrollisolujen tasolle (Kuva. 5 B). Lisäksi hoidon kaikki testattu caspase inhibitorssignificantly vähensi Anneksiini V-FITC-värjätään solut inH2O2-hoitoa Calu-6 solua, mutta decreasedeffect oli heikompi verrattuna lasku sub-G1-solujen(Kuva. 5 C). Kaikki kaspaseinhibiittorit pelastivat selvästi a549-soluja H2O2: n edistämästä solukuolemasta, mitä arvioidaan sub-G1-solujen populaatiolla (Kuva.5 E)., Lisäksi, nämä estäjät merkittävästi vähentää määrä Anneksiini V-FITC-värjätään solut inH2O2-hoitoa A549-solujen (Kuva. 5 F). Kullakin kaspaasi-inhibiittorilla oli verysimilaarisia Anti-death-vaikutuksia H2O2-hoitoa saaneissa keuhkosyöpäsoluissa.
Caspase-estäjät vaikuttavat MMP(ΔΨm) H2O2-käsitellyt keuhkojen cancercells
Solun kuolemaan liittyy vahvasti collapseof MMP (ΔΨm) (22).Näin ollen MMP (ΔΨm) 75 tai 100 µMH2O2-hoitoa keuhkosyöpä solut oli determinedwith tai ilman, jokainen caspase-estäjät 24 h., Kuitenkin, kaikki thecaspase estäjät eivät merkittävästi vähentää menetyksiä MMP(ΔΨm) H2O2-käsitellyt Calu-6-solujen(Kuva. 6 A). Lisäksi, useimmat näistä estäjät eivät vaikuttaneet MMP (ΔΨm) levelin H2O2-käsitellyt Calu-6-solujen. Kaspaasi-9: n estäjä (Z-LEHD) näytti kuitenkin tehostavan näiden solujen tason laskua (Kuva. 6b). A549-soluissa kaikki kaspaasin estäjät estivät osittain MMP: n (ΔΨm) käytön H2O2: lla(Kuva. 6 c). InH2O2-käsitellyt a549-solut, kaspaasi-9-inhibitorselektiivisesti paransivat edelleen MMP (ΔΨm) – tason laskua (Kuva. 6D)., Tämä inhibitoralone merkittävästi MMP (ΔΨm) tasoa Calu-6and A549 valvonta-solujen (Kuva. 6 B andD).
Keskustelua
Keuhkosyöpä on yksi tärkeimmistä syistä ofcancer liittyviä kuolemantapauksia ja liittyy maliciousactivity ROS. Tässä tutkimuksessa exogenousH2O2: ta käytettiin oksidatiivisen stressiini-keuhkosyöpäsolujen tuottamiseen. Tässä tutkimuksessa keskityttiin määrittelemään solujen kasvun eston ja solukuoleman molekulaariset mekanismit inH2O2-hoidetuilla Cali-6-ja a549-keuhkosyövillä., MTT-määritysten perusteella 24-h-altistuksen jälkeen H2O2: n teic50-arvot olivat ~50 ja A549-soluissa vastaavasti 100 µM.H2O2 annoksesta riippuvaa lisännyt ofdead ja Anneksiini V-FITC-petsattu Calu-6-ja A549-soluja, indicatingthat H2O2-induced lung cancer cell deathoccurred läpi apoptoosin. Ilmeisesti H2o2prosentoi Bcl-2: n ja pro-kaspaasi-3: n tasoja molemmissa solutyypeissä.PARP-arvoa pienennettiin H2O2-hoidetuilla a549celleillä. Lisäksi kaspaasi-3: n ja -8: n toiminta lisääntyi molemmissa H2O2-käsitellyissä solutyypeissä.Apoptoosi liittyy vahvasti MMP: n(ΔΨm) (22) romahtamiseen.,H2O2 laukaisi menetys MMP(ΔΨm) vuonna Calu-6-ja A549-soluja annos-dependentmanner, mikä osoittaa, että keuhkojen syöpäsolun kuoleman byH2O2 oli läheisesti romahtaa ofMMP (ΔΨm). Lisäksi H2o2vähensi MMP (ΔΨm) – tasoa keuhkosyöpäsoluissa, jotka sisältävät rhodamiini 123-väriainetta.
Vaikka 50-100 µM H2O2significantly lisääntynyt prosenttiosuudet osa-G1 Calu-6 ja A549cells, 250 tai 500 µM H2O2 ei toteutetaan samanlainen vaikutus, mikä osoittaa, että suuremmat annokset ofH2O2 korjata nämä keuhkosyöpä solut vastaava tapa etanoli tai metanoli., Näin ollen H2O2 näytti aiheuttavan keuhkosyöpäsolukuoleman samanaikaisesti nekroosin ja apoptoosin kautta riippuen siitä, miten se tapahtuu. Erityisesti, 75 ja 100 µMH2O2 ilmestyi samanaikaisesti laukaista bothapoptosis ja kuolio Calu-6-soluja, koska nämä annokset ofH2O2 ei lisätä prosenttiosuudet ofsub-G1 solujen verrattuna 50 µM H2O2-treatedcells, sekä siellä ollut mitään muutosta tasot intactform ja PARP proteiinia. On arvioitava solunulkoisen laktaattidehydrogenaasin aktiivisuutta keuhkosyöpäsoluissa, jotka on valtavirtaistettu 50 – 500 µM H2O2: lla nekroottisen solukuoleman havaitsemiseksi., Aiemmat tutkimukset paljasti lujitettava H2O2 solu-syklin vaihe pidättää andprogression säätämällä solujen elinkaareen liittyviä proteiineja (23,24).Tämän mukaisesti, – hoito 75 tai 100 µMH2O2 keskuudessa testattu annoksina significantlyshowed G1 vaiheessa pidätyksen Calu-6-ja A549-soluja. Näin ollen g1faasin pidätys yhdessä solukuoleman induktion kanssa on potentiaalinen mekanismi solujen kasvun vaimentumisen takana uponH2O2-hoito. H2O2 ei kuitenkaan tehnyt HeLa-soluissa mitään erityistä solusyklin vaihepysähdystä (20)., Nämä tulokset osoittivat, että thatH2O2: n aiheuttama oksidatiivinen stressi ilmensi sen vaikutuksia solusyklin etenemiseen riippuen solutyypistä ja H2O2-annoksesta.
Caspase estäjät, joita käytetään tässä kokeessa mielestä lieventää kasvun esto inH2O2-hoitoa Calu-6-ja A549 syöpäsoluja,ottaa huomioon, että nämä estäjät huomattavasti preventedH2O2 aiheuttama solun kuolemaan näiden solujen.Vaikka H2O2 jossain määrin lisätyn siksi tähän menoluokkaan ja caspase-8 sekä keuhkosyöpä solut, caspase-8inhibitor merkittävästi heikennetty solun kuolema laukaisi byH2O2., Näin pieni muutos siksi tähän menoluokkaan ja caspase-8 näytti olevan vahva vaikutus thepro-apoptoottisen koulutusjakson H2O2-käsitellyt lungcancer soluja. Nämä tulokset osoittivat myös, että sekä mitochondrialand solun kuoleman-reseptorin polkuja oli molempia tarvitaan koko induktion apoptoosin H2O2-treatedlung syöpäsoluja. Olisi tärkeää selvittää, miten H2O2 vaikuttaa solukuolemareseptorin tiehen, joka indusoi apoptoosia keuhkosyöpäsoluissa. Koskevat MMP(ΔΨm), caspase-estäjien ei ole mitään significanteffect menetys MMP (ΔΨm) inH2O2-hoitoa Calu-6-ja A549-soluja., Lisäksi, nämä estäjät eivät palauttaneet vähentynyt MMP(ΔΨm) tasoa H2O2-käsitellyt lungcancer soluja. Sen sijaan kaspaasi-9: n estäjä lisäsi näiden solujen määrää. On todennäköistä, että tappio ofMMP (ΔΨm) hoidon withH2O2 käytössä eri caspases liittyvät tomitochondrial ja solun kuoleman-reseptorin polkuja, consequentlyinducing apoptoosin, ja aktivointi caspases byH2O2 voinut positiivisesti parantaa MMP(ΔΨm) menetys., Lisäksi, menetys MMP(ΔΨm) aiheuttama H2O2 voivat johdosta kokonaan aiheuttaa apoptoosin Calu-6-ja A549 cellsunder, että downregulation caspase toimintaa.
johtopäätöksenä H2O2 esti keuhkosyöpäsolujen kasvua solukuoleman ja solusyklin G1-fasearrestin avulla. Calu-6: n ja a549: n solukuolema aiheutti byh2o2: n nekroosin sekä ascaspaasiriippuvaisen apoptoosin (viikuna.7). Nykyiset tulokset antavat hyödyllistä tietoa exogenoush2o2: n sytotoksikologisesta vaikutuksesta keuhkosyöpäsoluihin solujen kasvun ja kuoleman suhteen., Lisäksi uudet strategiat keuhkosyövän hoitoon H2O2: n käytön perusteella voivat auttaa vähentämään kuolleisuutta, joka liittyy tähän.
kuittaukset
Ei oleellinen.
Rahoitus
tässä tutkimuksessa tukivat avustusta kansallisten Research Foundation of Korea (NRF) rahoittama Koreangovernment (MSIP; 2016R1A2B4007773) ja tukee ’ResearchBase rakennusrahastovelat Tukea Ohjelman rahoittama Chonbuk NationalUniversity vuonna 2018.,
tietojen ja materiaalien saatavuus
Kaikki tämän tutkimuksen aikana tuotetut tai analysoidut tiedot sisältyvät tähän julkaistuun artikkeliin.
Kirjoittajien osuudet
TYKY-toiminta oli ainoa rahoittaja käsitys anddesign, tietojen hankinta, analyysi ja tulkinta tietoa kirjallisesti käsikirjoituksen. TYKY-toiminta on vastuussa kaikki näkökohtia työtä varmistamalla, että kysymykset liittyvät tarkkuutta orintegrity tahansa osa työtä ovat asianmukaisesti investigatedand ratkaistu.
etiikan hyväksyntä ja suostumus topartipaatti
Ei oleellinen.,
potilaan suostumus julkaisemiseen
Ei oleellinen.
kilpailevat intressit
kirjoittaja ilmoittaa, ettei hänellä ole kilpailevia intressejä.,-dimetyylitiatsol-2-yyli)-2,5-difenyylitetratsoliumbromidi
FITC
fluoreseiini-isotiosyanaatti
PI
propidium jodidi
|
Gonzalez C, Sanz-Alfayate G, Agapito MT,Gomez-Lapsi, Rocher ja Lihavia Klo: Merkitys ROS oxygensensing solujen järjestelmissä, joissa herkkyys fysiologinen hypoksia.,Respir Physiol Neurobiol. 132:17–41. 2002. Näytä Artikkeli : Google Scholar : PubMed/NCBI |
|
|
Baran CP, Zeigler MM, Tridandapani S andMarsh CB: rooli ROS ja RNS säätelyssä elämän ja kuoleman verta monosyytit. Curr Pharm Des. 10:855–866. 2004. Näytä Artikkeli : Google Scholar : PubMed/NCBI |
|
|
Zorov DB, Juhaszova M ja Sollott SJ:Mitokondrioiden ROS aiheuttama ROS julkaisussa: päivitys ja tarkastelu.Biochim Biofys Acta. 1757:509–517. 2006., Näytä Artikkeli : Google Scholar : PubMed/NCBI |
|
|
Zelko VUONNA, Mariani TJ ja Folz RJ:superoksididismutaasi multigene perhe: vertailu CuZn-SOD(SOD1), Mn-SOD (SOD2), ja EC-SOD (SOD3) geenin rakenteet,kehitys ja ilmaisu. Ilmainen Radic Biol Med. 33:337–349. 2002.Näytä Artikkeli : Google Scholar : PubMed/NCBI |
|
|
Wilcox CS: Reaktiivisia happiradikaaleja: Rolesin verenpaine ja munuaisten toiminta. Curr Hypertens Rep. 4:160-166. 2002., Näytä Artikkeli : Google Scholar : PubMed/NCBI |
|
|
Chen TJ, Jeng JY, Lin CW, Wu CC ja ChenYC: Quercetin estämällä ROS-riippuvainen ja -independentapoptosis rotan gliooma C6 soluja. Toksikologia. 223:113–126. 2006.,Näytä Artikkeli : Google Scholar : PubMed/NCBI |
|
|
Dasmahapatra G, Rahmani M, Dent P andGrant S: tyrphostin adaphostin toimii synergisesti withproteasome estäjät aiheuttaa apoptoosin ihmisen leukemia cellsthrough reaktiivinen hapen lajien (ROS)-dependent mekanismi. Verenkierto.107:232–240. 2006., Näytä Artikkeli : Google Scholar : PubMed/NCBI |
|
|
Wallach-Dayan SB, Izbicki G, Cohen PY,Gerstl-Golan R, Hieno ja Breuer R: Bleomysiini aloittaa apoptosisof keuhkojen epiteelin solujen ROS mutta ei Fas/FasL polku. Am JPhysiol-Keuhkosolumolyfysioli. 290: L790-L796. 2006. Näytä Artikkeli : Google Scholar : PubMed/NCBI |
|
|
Sarsour EH, Kumar MG, Chaudhuri L, KalenAL ja Goswami PC: Redox-ohjaus solusyklin terveyden anddisease., Antioxid Redox Signal. 11:2985–3011. 2009. View Article : Google Scholar : PubMed/NCBI |
|
|
Budihardjo I, Oliver H, Lutter M, Luo Xand Wang X: Biochemical pathways of caspase activation duringapoptosis. Annu Rev Cell Dev Biol. 15:269–290. 1999. View Article : Google Scholar : PubMed/NCBI |
|
|
Mehmet H: Caspases find a new place tohide. Nature. 403:29–30. 2000., ViewArticle : Google Scholar : PubMed/NCBI |
|
|
Hengartner MO: biokemia ofapoptosis. Luonto. 407:770–776. 2000. Näytä Artikkeli : Google Scholar : PubMed/NCBI |
|
|
Hinz B, Phan SH, Thannickal VJ, PrunottoM, Desmoulière A, Varga J, De Wever O, Mareel M ja Gabbiani G:Viimeaikainen kehitys myofibroblast biologia: Paradigmat forconnective kudoksen uudelleen. Olen J Pathol. 180:1340–1355.,Näytä Artikkeli : Google Scholar : PubMed/NCBI |
|
|
Rhee SG, Kang SW, Jeong W, Chang TS, YangKS ja Woo HA: Solunsisäinen messenger-toiminto hydrogenperoxide ja sen asetuksen mukaan peroxiredoxins. Curr Opin Cell Biol.17:183–189. 2005. Näytä Artikkeli : Google Scholar : PubMed/NCBI |
|
|
Vilhardt F ja van Deurs B: phagocyteNADPH oksidaasi riippuu kolesteroli-rikastettu kalvo microdomainsfor kokoonpano. EMBO J. 23: 739-748. 2004., Näytä Artikkeli : Google Scholar : PubMed/NCBI |
|
|
Park WH: vaikutukset eksogeeninen H2O2 oncell kuolema, reaktiivisen hapen lajien ja glutationi tasot calfpulmonary valtimo ja ihmisen napalaskimon endoteelisolujen. Int JMol Med. 31:471–476. 2013. Näytä Artikkeli : Google Scholar : PubMed/NCBI |
|
|
Park WH: Eksogeeninen H2O2 aiheuttaa growthinhibition ja solun kuolema, ihmisen keuhkojen valtimo sileä musclecells kautta glutationin väheneminen., Mol Med Rep. 14: 936-942. 2016.Näytä Artikkeli : Google Scholar : PubMed/NCBI |
|
|
Han LV, Kim SZ, Kim SH ja Puisto WH:Pyrogallol estää niiden kasvun keuhkosyöpä Calu-6-solujen viacaspase-riippuvainen apoptoosin. Chem Biol Vuorovaikutuksessa. 177:107–114. 2009.,Näytä Artikkeli : Google Scholar : PubMed/NCBI |
|
|
Park WH, Seol JG, ES Kim, Hyun JM, JungCW, Lee CC, Kim BK ja Lee YY: Arseenitrioksidi-välitteisen growthinhibition MC/AUTO myeloomasolut kautta solusyklin pidätys inassociation induktio sykliini riippuvainen kinaasi-inhibiittori,p21, ja apoptoosin. Syöpä Res. 60: 3065-3071. 2000.,PubMed/NCBI |
|
|
Park WH: Anti-apoptoottisen vaikutus caspaseinhibitors on H2O2-käsitellyt HeLa-solujen varhaisen tukahduttaminen sen oksidatiivista stressiä. 31: 2413-2421. 2014. Näytä Artikkeli : Google Scholar : PubMed/NCBI |
|
|
BR, Kim SH ja Puisto WH: Reactiveoxygen lajeja, glutationi, ja thioredoxin nitraattien vaikutus suberoylbishydroxamic hapon aiheuttama apoptoosin A549 keuhkosyöpä solut.Tuumoribiolia. 36:3429–3439. 2015., Näytä Artikkeli : Google Scholar : PubMed/NCBI |
|
|
Yang J, Liu X, Bhalla K, Kim CN, IbradoAM, Cai J, Peng TI, Jones DP ja Wang X: Ehkäisy apoptoosin byBcl-2: Vapauta sytokromi c mitokondrioita tukossa. Tiede.275:1129–1132. 1997. Näytä Artikkeli : Google Scholar : PubMed/NCBI |
|
|
Han LV, Kim SH, Kim SZ ja Puisto WH:Antimycin kuin mitokondrioiden vaurioita agentti aiheuttaa S phasearrest solun syklin HeLa-soluja. Life Sci., 83:346–355. 2008.Näytä Artikkeli : Google Scholar : PubMed/NCBI |
|
|
Han LV, Kim SZ, Kim SH ja Puisto WH:Pyrogallol estää niiden kasvun ihmisen keuhkosyöpä Calu-6 cellsvia pidättää solusyklin pidätys. Toxicol In Vitro.22:1605–1609. 2008. Näytä Artikkeli : Google Scholar : PubMed/NCBI |