onkológiai jelentések

Bevezetés

a reaktív oxigénfajok (ros) rendkívül instabilakés az oxigénváltozásokat tartalmazó reaktív molekulák. Ezek közé tartozik a hidrogén-peroxid (H2O2), a szuperoxid anion(O2●−) és a hidroxilgyök (●OH).Bár a Ros-T citotoxikus szerekként ismerik el, a második hírvivők szolgálhatnak a geneexpresszió, a differenciálódás, a sejtproliferáció és a sejthalál(1,2) számos sejtes eseményének ellenőrzésére., A ROS-t a sejtekben folyamatosan termelődő aerob metabolizmus termeli teo2●− és/vagy szándékosan oxidázok,például nikotinamid-adenin-dinukleotid-foszfát (NADPH) oxidáz és xantin-oxidáz (3) formájában.O2●− a szuperoxid-diszmutáz(4) enzim hatására H2O2-re alakul át. A H2O2-t Catalaseor glutation-peroxidázok (5) O2-ként és H2O-ként dolgozzák fel.A ROS többi tagjához képest a nem radikális H2O2 képes szabadon behatolni a sejtmembránokba, és kölcsönhatásba lép a vas vassal (Fenton kémia),amely a rendkívül romboló és rövid életű●OH., A ROS különböző formáinak előállítása különbözőa szintek hasznosak vagy károsak lehetnek a sejtekre és a szövetekre.Különösen az antioxidánsok túltermelésének és/vagy csökkentésének eredménye lehet a túlzott mennyiségű ROS.A megnövekedett ROS-szint károsíthatja a DNS-t, a fehérjéket éslipidek a sejtekben, ami több humandiseases etiológiájába, beleértve a rákot (6-9).

az apoptózis programozott sejthalál, és két különböző úton fordul elő: a mitokondriális intrinsic útvonal és a thereceptor által közvetített extrinsic útvonal (10)., A legfontosabb lépés a themitochondrial által közvetített apoptózis a transzlokáció a cytochromec a mitokondriumok, hogy cytosol, valamint a subsequentinteraction a Apaf-1 kaszpáz-9 alkotnak komplex(apoptosome). Az apoptoszóma tovább aktiválja az executive kaszpáz-3-at, -6-ot és -7-et (11). Ezzel szemben azextrinsav út specifikus ligandumok, például TNF-α, TRAIL és Fas kötődésével kezdődik az adott sejthalál receptorokhoz, amelyek serkentik a kaszpáz-8 és -3 (12) aktivitását., A kaszpáz-8 BID-t, a Bcl-2 család apro-apoptotikus citoszolfehérjét hasítja le, hogy a mitokondriumokba belépő atrunkált terméket, a mitokondriális membránpotenciál (MMP;ΔΨm) csökken, ami a citokróm C felszabadulását okozza. egy másik apoptotikus fehérje, a bax felszabadulását a citoszolbóla mitokondriumok szintén kiváltják az MMP(δm) hasonló elvesztését. A kaszpáz-3 a kulcsfontosságú executive kaszpáz; itsaktiválása szisztematikusan szét tudja szedni a sejtek integritását több kulcsfontosságú fehérje, például a poli(ADP-ribóz)polimeráz (PARP) és a RhoGDI hasítása révén.,

a tüdő érzékeny a különböző levegőben terjedő ésvér eredetű sérülésekre, amelyek következésképpen tüdőfibrózist és daganatot okozhatnak (13). A rák karcinogenezise szorosan összefügg a H2O2 által közvetített szöveti gyulladással. A gyulladás során a H2O2 szövetkoncentrációja várhatóan közel millimoláris szintet ér el, míg a NADPH-oxidák által normál körülmények között termelt H2O2 alacsony szintje feltételezhetően nem nagyobb affinitással rendelkezik, mint a plazmamembrán mikrokörnyezete, mint például a lipidrafts (14,15)., Ennek ellenére mindkét esetben a H2O2 a sejtproliferáció, a halál és a differenciálódás létfontosságú sejtfunkcióit modulálhatja a signalingcascades és a génexpresszió megváltoztatásával, és magasabb szintje apoptózishoz és/vagy nekrózishoz vezethet. Az exogén H2O2-t gyakran használják reprezentatív ROS-ként a sejtek és szövetek oxidatív nyomásának szimulálására. A H2O2 a humán köldökzsinór veinendothelialis sejtek és a humán pulmonalis artéria simaizomsejtjeinek normális sejtjeire(16,17) nem toxikus. A tüdőrákos sejtekben a H2O2 által kiváltott sejthalál citotoxikológiai kutatással járhat.,

a jelen vizsgálatban az exogén H2O2 molekuláris hatásait a Calu-6-ra és az a549-es tüdőráksejtekre a sejtnövekedés és a halál tekintetében értékelték, valamint a különböző kaszpáz inhibitorok anti-apoptotikus hatásait a H2O2-vel kezelt tüdőráksejtekben vizsgálták.,

Anyagok, módszerek

a sejtkultúra

Az emberi tüdőrák Calu-6 A549 sejt lineswere vásárolt a koreai sejtvonal Bank (Seoul, Korea) andwere termesztett RPMI-1640 közepes kiegészítve 10% fetalbovine szérum (FBS; Sigma-Aldrich; Merck KGaA, Darmstadt, Németország), illetve 1% – penicillin-sztreptomicin (Gibco-BRL; Thermo FisherScientific, Inc., Waltham, MA, USA). Ezeket a sejteket rendszeresen tenyésztették 100 mm-es műanyag szövetkultúrában (Nunc, Roskilde, Dánia), és tripszin-EDTA oldattal (Gibco-BRL;Thermo Fisher Scientific, Inc.).,

reagensek

sejtnövekedés és sejtszámértékek

Sejtnövekedési változásokat értékeltek3-(4,5-dimetiltiazol-2-Il)-2, 5-difeniltetrazolium-bromid (MTT;Sigma-Aldrich; Merck KGaA) festékfelszívódás a korábban leírtak szerint(19). Életképes és elhalt sejtek számait trypan kék sejtfestési módszerrel határozták meg (20). A sejteket 24 órán keresztül 15 µM-es mindegyik kaspáz inhibitorral vagy anélkül a H2O2 jelű izotópoknak tették ki.,

sejtciklus és sub-G1 sejtanalízis

sejtciklus és sub-G1 sejtanalízis propidium-jodiddal (pi; Sigma-Aldrich; Merck KGaA) végzett festéssel (20). Cellswere kitéve a kijelölt összegek ofH2O2 vagy anélkül 15 µM az egyes caspaseinhibitor 24 h. A sejtciklus disztribúciók elemezték a aFACStar áramlási citométer (Becton-Dickinson and Company, FranklinLakes, NJ, USA).,

ANNEXIN V-FITC festés sejthaláldetection

apoptotikus sejthalál ellenőrizték mérésével cellák láncolt Annexin V-fluoreszcein izotiocianát (FITC;Invitrogen; Thermo Fisher Scientific, Inc.) a korábban leírtak szerint(20). A sejtek voltak kitéve thedesignated mennyiségű H2O2 vagy anélkül 15µM minden kaszpáz-gátló 24 h. Annexin V-FITC festéssel wasanalyzed egy FACStar áramlási citométer (Becton-Dickinson andCompany).,

az MMP(ΔΨm)

MMP (ΔΨm) értékelését egy rodamin123 fluoreszkáló festék (Sigma-Aldrich; Merck KGaA) értékelte korábban (21). A sejteket a H2O2 kijelölt mennyiségére, 24 órán keresztül 15 µM-es vagy annál nagyobb kaszpáz-inhibitorral, a Rhodamine 123staining intenzitást egy FACStar áramlási citométerrel(Becton-Dickinson and Company) elemezték. A rhodamine 123 hiánya aa sejtek MMP (ΔΨm) elvesztését jelezték a tüdőrákban., Az MMP (ΔΨm) szinteket az MMP(ΔΨm)-veszteséges sejteket nem tartalmazó sejtekben a CellQuest szoftver (5.1 verzió;Becton-Dickinson and Company) által becsült átlagos fluoreszcenciaintenzitás formájában fejezték ki.

Western blot analysis

a Bcl-2, a kaszpáz-3 és a PARP inH2O2-vel kezelt sejtek változásait a westernblotting elemezte. Röviden, 1×106 sejtek 60 mm-es tenyészedény(nunc) inkubáltuk a kijelölt mennyiségű ofH2O2 24 h. tartalmazó minták 20 µg totalprotein elválasztjuk 8 vagy 12.,5% SDS-PAGE gél, amelyet azimobilon-P PVDF membránokra (EMD Millipore, Billerica, MA, USA) továbbítottelektroblotting, majd anti-Bcl-2,Anti-kaszpáz-3, Anti-PARP és anti-β-aktin antitestekkel (hígítás 1:5,000; Santa CruzBiotechnology, Santa Cruz, CA, USA). A membránokat kezeltékhorseradish peroxidáz-konjugált másodlagos antitestek (dilution1: 5,000; Cell signaling Technology, Inc.). Blotokat fejlesztettek kiegy ECL készlet eszközei (Amersham Life Science, Arlington Heights, IL,USA).,

A kaszpáz-3 és −8aktivitások számszerűsítése

a kaszpáz-3 és -8 tevékenységeit bycaspase-3 és -8 kolorimetriás vizsgálati készletek (R&D Systems, Inc.) leírtak szerint (20). Inbrief, 1×106 sejt 60 mm-es tenyészedényben (nunc) 75 µM H2O2-vel, 24 órán keresztül. 50 µg teljes fehérjét tartalmazó mintákat használtunk a kaszpáz −3 és-8aktivitások értékelésére.

Statisztikai analízis

az InStat szoftver (GraphPad Prism4; GraphPad Software, Inc. ,, San Diego, CA, USA). A T-teszt vagy a variancia egyirányú analízise (ANOVA) a poszthoc analízissel a Tukey többszörös összehasonlító tesztjét használtákparametrikus adatok. P<0,05-ös értéket az astatistically szignifikáns különbségnek tekintették.

eredmények

H2O2 befolyásolja a tüdőrákos sejtek sejtnövekedését és cikluseloszlását

a h2o2on sejtes hatásait a tüdőrákos sejtek növekedését 24 órán át vizsgálták., Az 50-250 µM H2O2-es kezelés dózisfüggő módon jelentősen csökkentette az életképes (trypan kék-negatív) és az elhalt (trypanblue-pozitív) Calu-6 sejteket (ábra). 1A). Az MTT-vizsgálatok alapján 50-250 µMH2O2 jelentősen csökkentette a Calu-6 sejtek növekedését ~50 µM IC50-rel (ábra. 1B). A H2O2-vel kezelt Calu-6 sejtek sejtciklus-eloszlásának vizsgálatakor a 75 µM-es H2O2-vel kezelt Calu-6 sejtek szignifikáns G1-fázisú letartóztatását mutatták Kia kontroll sejtekkel összehasonlítva (ábra.2A és B)., Mint a Calu-6 alapján H2O2treatment száma A549 életképes sejtek csökkent, halott cellsincreased jelentősen dózis-függő módon (Fig. 1C). Ezenkívül a H2O2 dózisfüggően csökkentette aza549 sejtek növekedését ~100 µM IC50-rel (ábra. 1D). A 100 µMH2O2-vel végzett kezelés szintén jelentősen kiváltotta az A549 sejtekben a G1-phasearrest-et a kontroll sejtekhez képest (ábra. 2A és B).

H2O2 influencescell death and MMP (ΔΨm) inH2O2-vel kezelt tüdőrákos sejtek

ezt követően a h2o2in tüdőrákos sejthalál szerepét tovább vizsgálták, hogy jobban megértsük., Míg 50-100 µM h2o2jelentősen megnövelte a Calu-6cellák al-G1 sejtjeinek százalékos arányát, a 250 µM H2O2 nem növelte a sub-G1 sejtek százalékos arányát ezekben a sejtekben (ábra. 2A és C). A kezelés azonban 50-250 µM H2O2 dózissal-a Calu-6 sejtekben az Annexin V-FITC-foltos sejtek száma jelentősen megnőtt (1.ábra). 3A). Amikor a H2O2 MMP-re (ΔΨm) gyakorolt hatását a Calu-6 sejtekben a rhodamine 123 alkalmazásával értékelték, a h2o2provokálta az MMP (ΔΨm) elvesztését egy dózisfüggőanner (ábra. 3B)., Ami a toMMP (ΔΨm) szintet illeti a Calu-6 sejtekben, kivéve a negativerhodamine 123 festősejteket, a H2O2 csökkentette az MMP (ΔΨm) szintet a Calu-6 sejtekben egy dózisfüggőbenmanner (ábra. 3C). Az A549 sejtekben az 50 és 100 µM H2O2 kezelés jelentősen növelte a G1 alatti sejtek százalékos arányát, de a 250 és 500 µM H2O2-es kezelés nem mutatta ezt a hatást(ábra. 2A és C).H2O2 dózisfüggően növelte azannexin V-FITC-festett a549 sejtek számát (ábra.3D). Ezenkívül a H2O2 dózisfüggő módon csökkentette az MMP (ΔΨm) elvesztését az A549 sejtekben (ábra. E.3., Míg 50 µMH2O2 növelte az MMP (ΔΨm) szintjét aza549 sejtekben, 100-250 µM H2O2 jelentősen csökkentette az MMP (ΔΨm) szintet ezekben a sejtekben (ábra. 3F).

H2O2 influencesapoptosishoz kapcsolódó fehérjék és kaszpázok in2o2-vel kezelt tüdőrákos sejtek

az apoptózissal összefüggő fehérjék értékelése a 2O2-indukált tüdősejt-halálozás során kiderült, hogybcl-2, egy anti-apoptotikus fehérje, csökkentette az uponH2O2 kezelést a Calu-6 sejtekben (6.ábra). 4A). A Pro-kaszpáz-3 szintjét 75 µM H2O2-rel csökkentették (ábra. 4A). A 116 kDa PARP töretlen formáját nem változtatta meg a H2O2 (ábra. 4A)., A kaszpáz-3 aktivitása a H2O2-vel kezelt Calu-6cellákban nőtt, míg a kaszpáz-8 aktivitása nem változott jelentősen (1.ábra). 4B). Az 50-100 µMH2O2-vel végzett kezelés a Bcl-2,a Pro-kaszpáz-3 és a PARP fehérjeszintjét csökkentette az A549 sejtekben (2.ábra). 4C). Pontosabban, a 100 µMH2O2 jelentősen csökkentette a szinteketezek a fehérjék. Kezelés 75 µM H2o2jelentősen növelte a kaszpáz-3 aktivitását az A549 sejtekben ésjelentősen növelte a kaszpáz-8 aktivitását (ábra. 4D).,

A kaszpáz inhibitorok hatással vannak a sejtnövekedésreés a halál a H2O2-vel kezelt tüdőrákban

ezt követően arra törekedtünk, hogy megfejtsük az egyedi kaszpázok szerepét a H2O2-indukálta sejthalálban 24 óra alatt a tüdőkarcinóma sejtvonalakban. A 75 vagy 100 µM H2O2-es kezelés előtt a Calu-6 és az A549 sejteket 15 µM kaszpáz inhibitorral 1 órán át inkubáltuk. A vizsgált kaszpáz inhibitorok egyike sem befolyásolta a H2O2 által kiváltott növekedési gátlást mind a Calu-6, mind az A549 sejtvonalakban(ábra). 5A és D)., Azonban a H2O2-treatedCalu-6-ban vizsgált összes acaspáz inhibitor csökkentette a sub-G1 sejtek százalékos arányát a kontroll sejtek szintjére (ábra. 5B). Ezenkívül az összes vizsgált kaszpáz inhibitorral történő kezelésjelentősen csökkentette az Annexin V-FITC-festett sejtek számát in2o2-vel kezelt Calu-6 sejtekben, de a csökkentésa hatás gyengébb volt a sub-G1 sejtek csökkenéséhez képest(ábra. 5C). Az összes kaszpaszeinhibitor jelentősen megmentette az a549 sejteket ah2o2-elősegített sejthalálból, amint azt a G1 alatti sejtek populációja értékelte (ábra.E.5., Továbbá, ezek az inhibitorok jelentősen csökkentekaz Annexin V-FITC-festett sejtek száma inH2O2-kezelt a549 sejtek száma (ábra. 5F). Minden kaszpáz inhibitornak nagyon hasonló halálellenes hatása volt a 2O2-vel kezelt tüdőrákos sejtekben.

A kaszpáz inhibitorok hatással vannak az MMP-re (ΔΨm) a H2O2-vel kezelt tüdőrákban

a sejthalál erősen összefügg az MMP összeomlásával (ΔΨm) (22).Így az MMP (ΔΨm) 75 vagy 100 µMH2O2-vel kezelt tüdőrákos sejtekben 24 órán keresztül meghatározták minden kaszpáz inhibitorral vagy anélkül., Azonban az összes thecaspase inhibitor nem csökkentette szignifikánsan az MMP(ΔΨm) elvesztését a H2O2-vel kezelt Calu-6 sejtekben(ábra. 6A). Ezen túlmenően ezek az inhibitorok többsége nem befolyásolta az MMP (ΔΨm) levelin H2O2-vel kezelt Calu-6 sejteket. Azonban úgy tűnt, hogy a kaszpáz-9 inhibitor (Z-LEHD) fokozza a szint csökkenését ezekben a sejtekben (ábra. 6B). az A549 sejtekben az összes kaszpáz inhibitor részben megakadályozta az MMP (ΔΨm) H2O2(ábra. 6C). InH2O2-kezelt a549 sejtek, kaszpáz-9 gátló szelektíven tovább növelte az MMP (ΔΨm)szint csökkenését (ábra. 6D)., Ez a inhibitoralon szignifikánsan csökkentette az MMP (ΔΨm) szintet a Calu-6-banés az A549 kontrollsejtekben (ábra. 6B andD).

a tüdőrák a rák okozta halálozás egyik fő oka világszerte, és összefügg a ROS rosszindulatú aktivitásával. A jelen vizsgálatban az exogenousH2O2-t oxidatív stressz előállítására használtáka tüdőrákos sejtekben. Ez a vizsgálat a sejtnövekedés-gátlás és a sejthalál molekuláris mechanizmusainak meghatározására összpontosított2o2-vel kezelt Calu-6 és a549 tüdőkrák esetén., Az MTT-vizsgálatok alapján 24 órás expozíció után a H2O2-re vonatkozó 50 és 100 µM érték volt a Calu-6, illetve az A549 sejtekben.A H2O2 dózisfüggően növelte a Head és az Annexin V-FITC-foltos Calu-6 és A549 sejtek számát, ami arra utal, hogy a H2O2-indukálta tüdőrákos sejtek halálát apoptózis okozta. Nyilvánvaló, hogy a H2O2 mindkét sejttípusban csökkentette a Bcl-2 és a Pro-kaszpáz-3 szintjét.A PARP csökkent a H2O2-vel kezelt A549cellákban. Továbbá a kaszpáz-3 és -8 aktivitása mindkét H2O2-vel kezelt sejttípusban nőtt.Az apoptózis erősen kapcsolódik az MMP(ΔΨm) (22) összeomlásához.,A H2O2 az MMP(ΔΨm) elvesztését váltotta ki a Calu-6 és az a549 sejtekben dózisfüggő módon, ami arra utal, hogy a tüdőrákos sejthalál byH2O2 szorosan összefügg az AMMP (ΔΨm) összeomlásával. Ezenkívül a H2O2 csökkentette az MMP (ΔΨm) szintet a tüdőrákos sejtekbena rhodamine 123 festéket tartalmazó.

bár 50-100 µM h2o2jelentősen növelte a G1 Calu-6 és A549cellák százalékos arányát, a 250 vagy 500 µM H2O2 nem mutatott hasonló hatást, ami azt jelzi, hogy a nagyobb dózisú ofH2O2 ezeket a tüdőrákos sejteket az etanolhoz vagy a metanolhoz hasonló módon rögzítette., Így úgy tűnt, hogy a H2O2 egyszerre indukálja a tüdőrákos sejtet nekrózis és apoptózis útján, annak koncentrációjától függően. Különösen, 75, illetve 100 µMH2O2 úgy tűnt, hogy egyidejűleg ravaszt bothapoptosis, majd elhalás a Calu-6 cella, mivel ezek az adagok ofH2O2 nem növeli a százalékok ofsub-G1 sejtek képest 50 µM H2O2-treatedcells, valamint nem volt változás a szinten a intactform a PARP fehérje. A tüdőrákos sejtekben az extracelluláris laktát – dehidrogenáz aktivitását 50-500 µM H2O2-vel kell értékelni a nekrotikus sejthalál detektálásához., A korábbi vizsgálatok kimutatták, hogy a H2O2 szerepet játszik a sejtciklus fázisleállásában ésprogresszió a sejtciklussal összefüggő fehérjék (23,24) beállításával. ezzel összhangban a vizsgált dózisok között 75 vagy 100 µMH2O2-vel végzett kezelés szignifikánsan G1 fázisleállást mutatott a Calu-6 és az A549 sejtekben. Így a g1phase letartóztatása a sejthalál indukciójával együtt a potenciálismechanizmus a sejtek növekedésének csillapítása mögött uponH2O2 kezelés. A H2O2 azonban nem hajtott végre specifikus fázislefogásta sejtciklusból a HeLa sejtekben (20)., Ezek az eredmények azt mutatták, hogy2o2-indukálta oxidatív stressz megnyilvánulhat a sejtciklus progressziójára, a sejttípustól és2o2 dózistól függően.

Az ebben a kísérletben alkalmazott kaszpáz inhibitorok nem tudták csillapítani a növekedést gátló inH2O2-vel kezelt Calu-6 és A549 rákos sejteket, míg ezek az inhibitorok jelentősen megakadályozták ezekben a sejtekben a H2O2-indukálta sejthalált.Bár a H2O2 bizonyos mértékig növelte a kaszpáz-8 aktivitását mindkét tüdőrákos sejtben, a kaszpáz-8inhibitor szignifikánsan csökkentette a sejthalál által kiváltott H2O2-t., Így úgy tűnt, hogy a kaszpáz-8 aktivitásának enyhe változása erősen befolyásolja a H2O2-vel kezelt tüdőrákos sejtek Pro-apoptotikus útvonalát. Ezek az eredmények azt is jelezték, hogy mindkét mitokondriális és sejthalál receptor útvonal kölcsönösen szükséges volt az apoptózis H2O2-vel kezelt rákos sejtekben történő indukciójához. Fontos lenne annak megállapítása, hogy a H2O2 hogyan befolyásolja a sejthalál receptor útvonalátaz apoptózis kiváltására a tüdőrákos sejtekben. Az MMP (ΔΨm) esetében a kaszpáz inhibitoroknak nem volt szignifikáns hatásuk az MMP (ΔΨm) inH2O2-vel kezelt Calu-6 és A549 sejtek elvesztésére., Ezenkívül ezek az inhibitorok nem állították vissza a csökkent MMP(ΔΨm) szintet a H2O2-vel kezelt lungcancer sejtekben. Ehelyett a kaszpáz – 9 inhibitor fokozta őketcsökkent szintek ezekben a sejtekben. Valószínű, hogy az AMMP (ΔΨm) elvesztése a 2O2-es kezelést követően aktiválta a tomitokondriális és sejthalál receptorokhoz kapcsolódó különböző kaszpázokat, aminek következtében apoptózis alakult ki, és a kaszpázok byH2O2 aktiválása nem tudta pozitívan fokozni az MMP(ΔΨm) veszteséget., Ezenkívül a H2O2 által kiváltott MMP(ΔΨm) veszteség nem biztos, hogy teljesen kiváltja az apoptózist a Calu-6 és A549 sejtekben a kaszpáz aktivitás downregulációja alatt.

összefoglalva, a H2O2 a sejthalál és a sejtciklus G1-fázisa révén gátolta a tüdőrákos sejtek növekedését. A Calu-6 és az a549 sejthalál a2o2 okozta nekrózis, valamint aszpázfüggő apoptózis (ábra.7). A jelenlegi eredmények hasznos információkat szolgáltatnakaz exogenousH2O2 tüdőrákos sejtekre gyakorolt citotoxikológiai hatásának vizsgálata a sejtnövekedés és a halál tekintetében., Ezenkívül a H2O2 használatán alapuló tüdőrák kezelésére szolgáló új stratégiák talán hasznosak lehetnek az ezzel kapcsolatos halálozás csökkentésébenalignitás.

köszönetnyilvánítások

nem értelmezhető.

finanszírozás

a jelen tanulmányt a Koreai Nemzeti Kutatási Alapítvány (NRF) támogatásával, a Koreangovernment (MSIP; 2016R1A2B4007773) támogatásával, a Chonbuk Nemzeti Egyetem által 2018-ban finanszírozott “ResearchBase Construction Fund Support Program” támogatásával támogatták.,

adatok és anyagok rendelkezésre állása

A tanulmány során keletkezett vagy elemzett összes adat szerepel ebben a közzétett cikkben.

A szerzők hozzászólásai

a WHP volt az egyedüli közreműködő a kézirat kidolgozásában és tervezésében, adatszerzésében, elemzésében és értelmezésében, valamint a kézirat írásában. A WHP minden szempontért felelős annak biztosítása érdekében, hogy a munka bármely részének pontosságával vagy integritásával kapcsolatos kérdéseket megfelelően kivizsgálják és megoldják.

etikai jóváhagyás és beleegyezés toparticipate

nem alkalmazható.,

beteg hozzájárulása a közzétételhez

nem alkalmazható.

konkurens érdekek

a szerző kijelenti,hogy nincs kompetens érdekei.,-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromid

FITC

a fluoreszcein isothiocyanate

PI

propidium jodid

	Gonzalez C, Sanz-Alfayate G, Agapito MT Gomez-Gyermek, Rocher, illetve Elhízott A: Jelentősége ROS oxygensensing a cella rendszerek érzékenység élettani hypoxia.,Respir Physiol Neurobiol. 132:17–41. 2002. Cikk megtekintése: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Baran CP, Zeigler MM, Tridandapani s andMarsh CB: a ROS és RNS szerepe a monociták életének és halálának szabályozásában. Curr Pharm Des. 10:855–866. 2004. Cikk megtekintése: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Zorov DB, Juhaszova M és Sollott SJ:Mitokondrial ROS-induced ROS release: an update and review.Biochim Biophys Acta. 1757:509–517. 2006., Cikk megtekintése : Google Scholar : PubMed/NCBI
	Zelko IN, Mariani TJ and Folz RJ:Superoxid dismutase multigene family: a CuZn-SOD(SOD1), mn-SOD (SOD2) és EC-SOD (sod3) Génstruktúrák, evolúció és expresszió. Ingyenes Radic Biol Med. 33:337–349. 2002.Cikk megtekintése: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Wilcox CS: reaktív oxigénfajok: Rolesin vérnyomás és vesefunkció. Currens 4:160-166. 2002., Cikk megtekintése: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Chen TJ, Jeng JY, Lin CW, Wu CY és ChenYC: kvercetin gátlása ros-függő és-independentapoptosis patkány glioma C6 sejtekben. Toxikológia. 223:113–126. 2006.,Cikk megtekintése : Google Scholar: PubMed/NCBI
	Dasmahapatra G, Rahmani M, Dent p andGrant S: a tyrphostin adapthostin szinergikusan kölcsönhatásba lép a proteasome inhibitorokkal, hogy apoptózist indukáljon az emberi leukémiás sejtekben egy reaktív oxigénfajon keresztül (ros)-függő mechanizmus. Vér.107:232–240. 2006., Cikk megtekintése : Google Scholar : PubMed/NCBI
	Wallach-Dayan SB, Izbicki G, Cohen PY,Gerstl-Golan R, Fine A és Breuer R: a Bleomycin a tüdő epithelialis sejtjeinek apoptózisát a Ros, de nem a FAS/Fasl. Am Jphysiol Tüdősejt Mol Physiol. 290: L790-L796. 2006. Cikk megtekintése: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Sarsour EH, Kumar MG, Chaudhuri L, KalenAL and Goswami PC: redox control of the cell cycle in health anddisease., Antioxid Redox Signal. 11:2985–3011. 2009. View Article : Google Scholar : PubMed/NCBI
	Budihardjo I, Oliver H, Lutter M, Luo Xand Wang X: Biochemical pathways of caspase activation duringapoptosis. Annu Rev Cell Dev Biol. 15:269–290. 1999. View Article : Google Scholar : PubMed/NCBI
	Mehmet H: Caspases find a new place tohide. Nature. 403:29–30. 2000., ViewArticle: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Hengartner MO: the biochemistry ofapoptosis. Természet. 407:770–776. 2000. Cikk megtekintése : Google Scholar : PubMed/NCBI
	Hinz B, Phan SH, Thannickal VJ, PrunottoM, Desmoulière a, Varga J, De Wever O, Mareel m and Gabbiani g:a Myofibroblast biológia legújabb fejleményei: paradigmák a szövet átalakításához. J Pathol Vagyok. 180:1340–1355.,Cikk megtekintése: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Rhee SG, Kang SW, Jeong W, Chang TS, YangKS és Woo HA: intracelluláris hírvivő funkciója a hidrogénperoxidnak és szabályozásának peroxiredoxinok. Curr Opin Sejt Biol.17:183–189. 2005. Cikk megtekintése: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Vilhardt F és van Deurs B: a fagocytenadph oxidáz a koleszterinnel dúsított membrán mikrodomainjeitől függ. EMBO J. 23: 739-748. 2004., Cikk megtekintése: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Park WH: az exogén H2O2 OnCell halál, reaktív oxigénfajok és glutationszintek hatása a calfpulmonalis artériában és a humán köldökvén endotheliális sejtekben. Int JMol Med. 31:471–476. 2013. Cikk megtekintése: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Park WH: az exogén H2O2 a glutation kimerülésével az emberi pulmonalis artéria sima izomsejtjeinek növekedését és sejthalálát indukálja., Mol Medgyessy 14:936-942. 2016.Cikk megtekintése: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Han YH, Kim SZ, Kim sh és Park WH:a Pirogallol gátolja a tüdőrák növekedését Calu-6 sejtek viacaspase-függő apoptosis. Chem Biol Interact. 177:107–114. 2009.,Cikk megtekintése : Google Scholar : PubMed/NCBI
	Park WH, Seol JG, Kim ES, Hyun JM, Jungcw, Lee CC, Kim BK és Lee yy: arzén-trioxid által közvetített growthinhibition in MC/CAR myeloma sejtek sejtcikluson keresztül Ciklinfüggő kináz inhibitor,P21 és apoptózis indukciójával való összefüggés. Rák Res. 60: 3065-3071. 2000.,PubMed / NCBI
	Park WH: a kaszpaszeinhibitorok H2O2-vel kezelt HeLa sejtekre gyakorolt anti-apoptotikus hatása az oxidatív stressz korai elnyomása révén. Oncol Rep. 31:2413-2421. 2014. Cikk megtekintése: Google Scholar: PubMed/NCBI
	you BR, Kim SH és Park WH: Reactiveoxygen Fajok, glutation és tioredoxin hatása suberoylbishydroxamic sav-indukált apoptosis a549 tüdőrákos sejtek.Tumor Biol. 36:3429–3439. 2015., Cikk megtekintése : Google Scholar : PubMed/NCBI
	Yang J, Liu X, Bhalla K, Kim CN, IbradoAM, Cai J, Peng TI, Jones DP and Wang X: apoptosis megelőzése byBcl-2: citokróm C felszabadítása a mitokondriumokból blokkolva. Tudomány.275:1129–1132. 1997. Cikk megtekintése: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Han YH, Kim SH, Kim SZ és Park WH:az Antimicin a mitokondrium károsodást okozó szer a sejtciklus s phasearrestjét indukálja a HeLa sejtekben. Élet Sci., 83:346–355. 2008.Cikk megtekintése: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Han YH, Kim SZ, Kim sh és Park WH:a Pirogallol gátolja az emberi tüdőrák növekedését. Toxikol In Vitro.22:1605–1609. 2008. Cikk megtekintése: Google Scholar: PubMed / NCBI