PAGE Gel (Italiano)

PAGE Gel Chemistries for Protein Separation

TGX (Tris/Glycine eXtended) PAGE Gels si basa su una modifica del sistema Laemmli. Questi gel consentono tempi di esecuzione molto veloci senza distorsioni e hanno una durata di conservazione più lunga rispetto ai gel Laemmli standard, mantenendo le loro prestazioni e riproducibilità fino a un anno. Questa nuova chimica del gel SDS-PAGE utilizza gli stessi profili di separazione del campione dei gel Laemmli e gli stessi campioni e buffer in esecuzione., I gel TGX prefabbricati sono disponibili in una gamma di percentuali, inclusi i gel sfumati, con diverse configurazioni e volumi di pozzetti in dimensioni mini e midi.

TGX Stain-Free PAGE Gel sono una recente innovazione che fornisce la capacità di fare il controllo di qualità dopo sia elettroforesi e blotting o quando si localizzano bande per il taglio spot., Con la tecnologia stain-free, un PAGE gel può essere visualizzato immediatamente dopo l’elettroforesi per confermare che il caricamento del campione è nel giusto intervallo e la qualità di esecuzione è soddisfacente senza artefatti come smiling o striature verticali; le bande possono essere identificate e asportate per ulteriori analisi come la spettrometria di massa. Dopo il trasferimento di blotting, le macchie possono essere visualizzate istantaneamente per valutare l’efficienza del trasferimento e la qualità della macchia.

La possibilità di visualizzare direttamente la qualità di un gel di PAGINA e una macchia prima di ulteriori elaborazioni consente di risparmiare tempo e risorse., I gel prefabbricati TGX e TGX Stain-Free sono disponibili nella stessa ampia gamma di percentuali e configurazioni di pozzetti nei formati mini e midi.

Tris-HCl e Tris-acetate PAGE gel sono formulati senza SDS. Ciò dà la flessibilità di usando un singolo tipo di gel per separazione delle proteine native o SDS-denatured. La presenza di SDS nel campione e nel buffer in esecuzione crea condizioni di denaturazione con separazione paragonabile ai gel Laemmli SDS-PAGE., Le proteine separate in assenza di SDS (e di solito anche agente riducente) sono utilizzate nei protocolli in cui le proteine devono rimanere in una configurazione nativa. I modelli di migrazione in condizioni native differiscono da quelli nei gel denaturanti e il peso molecolare non può essere determinato con precisione.

Bis-Tris PAGE gel può essere utilizzato anche per la separazione di proteine native o denaturate. Questo sistema di gel di pagina ha un sistema di buffer discontinuo come Laemmli, ma è eseguito ad un pH inferiore. Sia MES o MOPS esecuzione buffer possono essere utilizzati con gel Bis-Tris., MOPS buffer è di solito preferito per le proteine di medie dimensioni, mentre MES è utilizzato per le proteine più piccole. A causa del pH inferiore, i gel Bis-Tris hanno una durata di conservazione più lunga rispetto ai gel Laemmli standard.

I gel Tris / tricine PAGE sono formulati per separare proteine e peptidi con pesi molecolari di 10 kDa e inferiori. La mobilità più lenta delle proteine nei gel Tris / tricina rispetto ai gel Tris/glicina si traduce in una migliore separazione dei polipeptidi a basso peso molecolare dalle micelle SDS che corrono vicino al fronte di migrazione.,

Gel di PAGINA specializzati per l’analisi delle proteine

I gel di PAGINA IEF vengono utilizzati per separare le proteine mediante carica. In un gradiente di pH, le proteine migrano fino a quando non hanno carica netta-quando il pH è uguale al punto isoelettrico (pI) della proteina. Un gel di PAGINA di IEF può essere usato per separare le proteine native o le proteine con le modifiche post-traduzionali caricate (quale fosforilazione). I gel prefabbricati sono disponibili con gradienti di pH ampi e stretti., Inoltre, per i campioni che sono stati elettroforesi in strisce di gradiente di pH immobilizzato (IPG) per elettroforesi 2-D, sono disponibili gel prefabbricati mini e midi con pozzetti che ospitano le strisce per l’elettroforesi di seconda dimensione.

I gel Zymogram PAGE rilevano proteine che hanno proteasi che possono utilizzare gelatina o caseina come substrato. Le proteine sono separate sui gel in condizioni denaturanti e non riducenti. Dopo l’elettroforesi, il PAGE gel viene incubato in tampone di renaturazione dello zimogramma., Dopo la rinaturazione delle proteine, il gel viene quindi incubato in un tampone di sviluppo dello zimogramma contenente un cofattore cationico necessario per l’attività della proteasi. Le proteasi sono generalmente identificate come bande chiare (dove la caseina o la gelatina sono state proteolizzate) su uno sfondo blu dopo la colorazione di Coomassie.

PAGE Gel Chemistries for Nucleic Acid Separation

TBE PAGE gels are nondenaturing gels for the separation of nucleic acids. I gel di TBE sono usati per l’analisi di dsDNA, per valutare la purezza dei prodotti di PCR e per le analisi di protezione di RNase., Gli acidi nucleici da 50 a 2.000 bp a sono separati in modo efficiente su gel TBE. Bio-Rad ha una gamma di gel prefabbricati TBE nei formati mini e midi.

I gel di pagina TBE-urea sono usati sia per RNA che per ssDNA. Un gel denaturante della PAGINA è usato per la determinazione della purezza dell’oligonucleotide, del northern blotting e dei saggi di protezione della RNasi. I gel TBE-urea forniscono bande nitide e strette con un intervallo di dimensioni ottimale fino a 200 bp. I gel prefabbricati sono disponibili nei formati mini e midi.,