oncologische rapporten

Inleiding

reactieve zuurstofsoorten (ROS) zijn zeer onvast en reactieve moleculen die zuurstofdelen bevatten. Zij omvatten waterstofperoxide (H2O2), superoxide anion(O2●−) en hydroxylradicaal (●OH).Hoewel ROS als cytotoxische agenten worden erkend, kunnen zij asseconde boodschappers dienen om vele cellulaire gebeurtenissen van geneexpression, differentiatie, celproliferatie en celdood(1,2) te controleren., ROS worden continu gegenereerd door endogeen aërobe metabolisme in cellen in de vorm van theO2● – en / of worden doelbewust gemaakt door oxidasen,zoals nicotinamide adenine dinucleotide fosfaat (NADPH) oxidase en xanthine oxidase (3).O2● – wordt omgezet in H2O2 door het enzym superoxide dismutase (4). H2O2 wordt verder verwerkt tot O2 en H2O door catalaseof glutathionperoxidasen (5).Vergeleken met andere leden van ROS, kan niet-radicalH2O2 vrij celmembranen penetreren, en het interageert met ferro ijzer (Fenton chemie),die zeer destructief en kortstondig●OH produceert., De productie van verschillende vormen van ROS op verschillende niveaus kan nuttig of schadelijk zijn voor cellen en weefsels.In het bijzonder kunnen buitensporige hoeveelheden ROS het gevolg zijn van overproductie en/of vermindering van de regulering van antioxidanten.De verhoogde niveaus van ROS kunnen in schade aan DNA, proteã nen enlipiden in cellen resulteren, die hen in de etiologie van verscheidene mensenziekten, met inbegrip van kanker impliceren (6-9).

apoptose is geprogrammeerde celdood en vindt plaats via twee verschillende routes: de intrinsieke route van de mitochondriale route en de extrinsieke route van deeceptorgemedieerde Route (10)., De belangrijkste stap in themitochondriale-gemedieerde apoptose is de translocatie van cytochromec van mitochondriën naar cytosol en de daaropvolgende interactie met Apaf-1 en caspase-9 om een complex(apoptosoom) te vormen. Apoptosoom activeert verder executive caspase-3, -6 en -7 (11). Omgekeerd, begint de extrinsieke weg met de band van specifieke ligands, zoals TNF-α, spoor en Fas aan de respectieve receptoren van de celdood,die de activiteiten van caspase-8 en -3 (12) bevorderen., Caspase-8 knipt BOD, apro-apoptotic cytosolische eiwit van de Bcl-2 familie te genereren atruncated product, tBID dat komt in de mitochondriën anddecreases het mitochondriale membraanpotentiaal (MMP;ΔΨm), waardoor het vrijkomen van cytochroom c. Thetranslocation van een andere apoptotic eiwit, Bax van het cytosol naar de mitochondriën leidt ook tot soortgelijke verlies van MMP(ΔΨm). Caspase-3 is de zeer belangrijke uitvoerende caspase; zijnactivation kan systematisch de integriteit van cellen demonteren door verscheidene zeer belangrijke proteã nen, zoals poly(ADP-ribose)polymerase (PARP) en RhoGDI te splitsen.,

longen zijn gevoelig voor een verscheidenheid aan door de lucht en bloed overgedragen letsels die bijgevolg longfibrose en kanker kunnen veroorzaken (13). De carcinogenese van longkanker wordt beschouwd als nauw verbonden met H2O2-gemedieerde weefselontsteking. Tijdens ontsteking worden weefselconcentraties van H2O2 verwacht om bijna millimolaire niveaus te bereiken, terwijl lage niveaus van H2O2 geproduceerd door NADPH oxidasesonder normale omstandigheden worden verondersteld geen hoger effect te hebben dan het plasmamembraan micromilieu, zoals lipidrafts (14,15)., Niettemin kan H2O2 in beide gevallen de vitale cellulaire functies van celproliferatie,dood en differentiatie moduleren door signaalcascades en genexpressie te veranderen en de hogere niveaus ervan kunnen leiden tot apoptose en/of necrose. Exogene H2O2 wordt vaak gebruikt als representatieve ROS om oxidatievestress in cellen en weefsels te simuleren. H2O2 is relatief niet-toxisch voor de normale cellen van menselijke navelstrengveinendothelial cellen en menselijke longslagader gladde spiercellen(16,17). H2O2-veroorzaakt cell dood in longkankercellen kan cytotoxicologische onderzoeksinteresse hebben.,

in deze studie werden de moleculaire effecten vanexogeen H2O2 op Calu-6 en a549 longkankercellen geëvalueerd met betrekking tot celgroei en dood, evenals de anti-apoptotische effecten van verschillende caspaseremmers werden onderzocht in met H2O2 behandelde longkankercellen.,

materialen en methoden

celcultuur

de humane longkanker Calu-6 en A549 cellijnen werden aangekocht bij de Koreaanse Cellijnbank (Seoel, Korea) en werden gekweekt in RPMI-1640 medium aangevuld met 10% fetalbovine serum (FBS; Sigma-Aldrich; Merck KGaA, Darmstadt, Duitsland) en 1% penicilline-streptomycine (Gibco-BRL; Thermovisserswetenschappelijk, Inc., Waltham, MA, USA). Deze cellen werden regelmatig gekweekt in 100 mm plastic weefselkweekschalen (Nunc, Roskilde, Denemarken) en geoogst met een trypsine-EDTA-oplossing (Gibco-BRL;Thermo Fisher Scientific, Inc.).,

reagentia

celgroei en cel aantalassays

veranderingen in de celgroei werden geëvalueerd door de kleurstofabsorptie3-(4,5-dimethylthiazool-2-yl)-2, 5-difenyltetrazoliumbromide (MTT;Sigma-Aldrich; Merck KGaA) te beoordelen zoals eerder beschreven(19). Het aantal levensvatbare en dode cellen werd bepaald met de trypan blue cell kleuring methode (20). Cellen werden gedurende 24 uur blootgesteld aan de aangegeven hoeveelheden H2O2 met of zonder 15 µM van elke caspaseremmer.,

celcyclus en sub-G1 celanalyse

celcyclus en sub-G1 celanalyse werden uitgevoerd door propidium jodide (PI; Sigma-Aldrich; Merck KGaA) kleuring zoals eerder beschreven (20). Cellen werden blootgesteld aan de aangewezen hoeveelheden H2O2 met of zonder 15 µM van elke caspaseinhibitor gedurende 24 uur. de distributies van de celcyclus werden geanalyseerd met een aFACStar-stroomcytometer (Becton-Dickinson and Company, FranklinLakes, NJ, USA).,

Annexine V-FITC kleuring voor celdooddetectie

apoptotische celdood werd geverifieerd door celmeting met Annexine V-fluoresceïne isothiocyanaat (FITC; Invitrogen; Thermo Fisher Scientific, Inc.) zoals eerder beschreven(20). De cellen werden blootgesteld aan de aangewezen hoeveelheden H2O2 met of zonder 15µM van elke caspaseinhibitor 24 h. Annexin V-FITC het bevlekken werd geanalyseerd met een cytometer van de Facstarstroom (Becton-Dickinson andCompany).,

beoordeling van MMP(ΔΨm)

MMP (ΔΨm) werd geëvalueerd met een rhodamine123 fluorescerende kleurstof (Sigma-Aldrich; Merck KGaA) zoals eerder beschreven (21). De cellen werden blootgesteld aan de aangewezen hoeveelheden H2O2 met of zonder 15 µM van elke caspaseremmer gedurende 24 uur. Rhodamine 123kleuring intensiteit werd geanalyseerd door een FACStar flow cytometer(Becton-Dickinson and Company). De afwezigheid van rhodamine 123 uit de cellen wees op het verlies van MMP (ΔΨm) in longkankercellen., MMP(ΔΨm) niveaus in cellen zonder MMP (ΔΨm)-verliescellen werden uitgedrukt als de gemiddelde fluorescentieintensiteit, die werd geschat door CellQuest software (versie 5.1;Becton-Dickinson and Company).

Western blot analysis

de veranderingen in Bcl-2 -, caspase-3-en PARP inH2O2-behandelde cellen werden geanalyseerd door middel van westernblotting. Kort, 1 × 106 cellen in 60-mm kweekschaal (Nunc) werden geïncubeerd met de aangewezen hoeveelheden H2O2 gedurende 24 uur. monsters met 20 µg totalproteïne werden gescheiden door 8 of 12.,5% SDS-pagina gel, overgebracht naar immobilon-P PVDF membranen (EMD Millipore, Billerica, MA, USA) door elektroblotting en vervolgens gesondeerd met anti-Bcl-2, anti-caspase-3,anti-PARP en anti-β-actine antilichamen (verdunning 1:5.000; Santa Cruzbiotechnologie, Santa Cruz, CA, USA). Membranen werden behandeld methorseradish peroxidase-geconjugeerde secundaire antilichamen (dilution1: 5.000; Cell signaling Technology, Inc.). Blots werden ontwikkeld door middel van een ECL kit (Amersham Life Science, Arlington Heights, IL,USA).,

kwantificering van caspase-3 en-8activiteiten

de activiteiten van caspase-3 en -8 werden geëvalueerd door middel van colorimetrische assay kits (R&D Systems, Inc.) eerder beschreven (20). Inbrief werden 1×106 cellen in een 60-mm kweekschotel (Nunc) gedurende 24 uur behandeld met 75 µM H2O2. monsters met 50 µg totaal eiwit werden gebruikt om de caspase-3 −en-8-activiteit te beoordelen.

statistische analyse

gegevens die ten minste twee onafhankelijke experimenten vertegenwoordigen (gemiddelde ± SD) werden geanalyseerd via InStat-software(GraphPad Prism4; GraphPad Software, Inc.,, San Diego, CA, USA). De t-test van de student of eenrichtingsanalyse van variantie (ANOVA) met posthoc-analyse die de veelvoudige vergelijkingstest van Tukey gebruiken werd gebruikt voorparametrische gegevens. P<0,05 werd geacht een statistisch significant verschil aan te geven.

resultaten

H2O2 beïnvloedt de celgroei en de cyclusdistributie in longkankercellen

de cellulaire effecten van H2O2 op de groei van longkankercellen werden na 24 uur onderzocht., Behandeling met 50-250 µM H2O2 verminderde significant de houdbaarheid (trypan blauw-negatief) en verhoogde dode (trypanblauw-positief) Calu-6 cellen op een dosisafhankelijke manier (Fig. 1 bis). Gebaseerd op MTT-analyses, verminderde 50-250 µMH2O2 beduidend de groei van Calu-6 cellen met een IC50 van ~ 50 µM (Fig. 1 ter). Wanneer de celcyclus distributie in H2O2-behandelde Calu – 6 cellen werd onderzocht, Calu-6 cellen behandeld met 75-µM H2O2 demonstreerde een significante G1-fase arrestatie van de celcyclus in vergelijking met de controlecellen (Fig.2A en B)., Net als in Calu-6 nam bij H2O2-behandeling het aantal a549 levensvatbare cellen af en nam de dode cellen aanzienlijk toe op een dosisafhankelijke manier (Fig. 1C). Bovendien verminderde H2O2 dosisafhankelijk de groei vana549 cellen met een IC50 van ~100 µM (Fig. 1D). Behandeling met 100 µMH2O2 veroorzaakte ook significant een G1-fasearm in a549 cellen in vergelijking met de controlecellen (Fig. 2A en B).

H2O2 influencescell death en MMP (ΔΨm) inH2O2-behandelde longkankercellen

vervolgens werd de rol van H2O2 in longkankerceldood verder onderzocht om meer inzicht te krijgen., Terwijl 50-100 µM H2O2 de percentages sub-G1-cellen in Calu-6-cellen aanzienlijk vergrootte, verhoogde 250 µM H2O2 het percentage sub-G1-cellen in deze cellen niet (Fig. 2A en C). Nochtans, verhoogde de behandeling met 50-250 µM H2O2 dosisafhankelijk het aantal Annexine V-FITC-bevlekte cellen in Calu – 6 cellen (Fig. 3A). Wanneer het effect van H2O2 op MMP (ΔΨm) in Calu-6 cellen werd beoordeeld met behulp van rhodamine 123, veroorzaakte H2O2 het verlies van MMP (ΔΨm) in een dosisafhankelijke scanner (Fig. 3B)., Met betrekking tot toMMP (ΔΨm) niveau in Calu-6 cellen met uitzondering van negativerhodamine 123 kleuring cellen, H2O2 verlaagt het MMP (ΔΨm) niveau in Calu-6 cellen in een dosisafhankelijke scanner (Fig. 3C). In A549-cellen verhoogde de behandeling van 50 en 100 µM H2O2 aanzienlijk de percentages sub – G1-cellen, maar de behandeling met 250en 500 µM H2O2 vertoonde dit effect niet (Fig. 2A en C).H2O2 verhoogde dosisafhankelijk het aantal annexine V-FITC-bevlekte a549 cellen (Fig.3D). Bovendien leidde H2O2 dosisafhankelijk het verlies van MMP (ΔΨm) in a549 cellen (Fig. 3E)., Terwijl 50 µMH2O2 MMP (ΔΨm) niveau in549 cellen verhoogde, 100-250 µM H2O2 beduidend verminderde MMP (ΔΨm) niveaus in deze cellen (Fig. 3F).

H2O2 influences apoptose-gerelateerde eiwitten en caspasen inH2O2-behandelde longkankercellen

beoordeling van apoptose-gerelateerde eiwitten duringH2O2-geïnduceerde longceldood toonde aan dat bcl-2, een anti-apoptotisch eiwit, de uponH2O2-behandeling in Calu-6-cellen verlaagde (Fig. 4A). Het niveau van pro-caspase-3 werd verminderd met 75 µM H2O2 (Fig. 4A). De ononderbroken vorm van 116 kDa PARP werd door H2O2 niet gewijzigd (Fig. 4A)., De activiteit van caspase-3 bleek verhoogd te zijn in met H2O2 behandelde Calu-6cells, terwijl die van caspase-8 niet significant veranderde(Fig. 4B). Behandeling met 50-100 µMH2O2 bleek het Bcl-2 -, pro-caspase-3-en PARP-eiwitgehalte in a549-cellen te verlagen (Fig. 4C). Specifiek, toonde 100 µMH2O2 een duidelijke daling van de niveaus van deze proteã nen. Behandeling met 75 µM H2O2 verhoogde significant de activiteit van caspase-3 in a549 cellen en verhoogde significant de activiteit van caspase-8 (Fig. 4D).,

Caspaseremmers beïnvloeden celgroei en dood in met H2O2 behandelde longkankercellen

vervolgens probeerden we de rol van individuele caspasen in H2O2-geïnduceerde celldeath bij 24 uur in longcarcinoomcellijnen te ontcijferen. Calu-6-en A549-cellen werden gedurende 1 uur vooraf geïncubeerd met een caspaseremmer van 15 µM alvorens met 75 of 100 µM H2O2 te worden behandeld. Geen van de geteste caspaseremmers beïnvloedde de door H2O2 geïnduceerde groeiremming in zowel Calu-6-als A549-cellijnen (Fig. 5A en D)., Alle in H2O2-behandelde Kalu-6 geteste aspaseremmers verminderden echter het percentage sub-G1-cellen tot het niveau van de controlecellen (Fig. 5B). Bovendien verminderde de behandeling met alle geteste caspaseremmers het aantal met Annexine V-FITC bevlekte cellen inH2O2-behandelde Calu-6-cellen aanzienlijk, maar het verminderde effect was zwakker in vergelijking met de afname van sub-G1-cellen(Fig. 5C). Alle caspaseinhibitors hebben duidelijk A549-cellen gered van door H2O2 bevorderde celdood, zoals blijkt uit de populatie van sub-G1-cellen (Fig.5E)., Voorts verminderden deze inhibitors beduidend het aantal Annexine V-FITC-bevlekte cellen inH2O2-behandelde a549 cellen (Fig. 5F). Elke caspaseremmer had zeer vergelijkbare antidood-effecten in de met H2O2 behandelde longkankercellen.

Caspaseremmers beïnvloeden MMP (ΔΨm) in met H2O2 behandelde longkankercellen

celdood is sterk geassocieerd met het instorten van MMP (ΔΨm) (22).Zo werd MMP (ΔΨm) in 75 of 100 µMH2O2-behandelde longkankercellen bepaald met of zonder elke caspaseremmers bij 24 uur., Echter, alle thecaspaseremmers verminderden niet significant het verlies van MMP(ΔΨm) in met H2O2 behandelde Calu-6 cellen (Fig. 6 bis). Bovendien hadden de meeste van deze remmers geen invloed op het MMP (ΔΨm)-niveau in met H2O2 behandelde Calu-6-cellen. Caspase-9 inhibitor (Z-LEHD) bleek echter de afname van het niveau in deze cellen te versterken (Fig. 6B). in a549 cellen, voorkwamen alle caspaseinhibitors gedeeltelijk het verlies van MMP(ΔΨm) door H2O2 (Fig. 6C). InH2O2-behandelde a549 cellen, caspase-9 inhibitor versterkte selectief verder de afname van MMP (ΔΨm)niveau (Fig. 6D)., Dit inhibitoralone verminderde beduidend MMP (ΔΨm) niveaus in Calu-6 en A549 controlecellen (Fig. 6B en d).

discussie

longkanker is een van de belangrijkste oorzaken van kankergerelateerde mortaliteit wereldwijd en is gerelateerd aan de kwaadaardige activiteit van ROS. In de huidige studie, werd exogenousH2O2 gebruikt voor het genereren van oxidatieve stressin longkankercellen. Deze studie richtte zich op het definiëren van de moleculaire mechanismen van celgroei remming en celdood inH2O2-behandelde Calu-6 en a549 longkankercellen., Gebaseerd op MTT assays, na 24-h blootstelling, theic50 waarden voor H2O2 waren ~50 en 100 µM in Calu-6 en A549 cellen, respectievelijk.H2O2 nam dosisafhankelijk het aantal dode en Annexine V-FITC-gekleurde Calu-6 en A549 cellen toe, wat erop wijst dat H2O2-geïnduceerde longkanker celdood door apoptose optrad. Blijkbaar heeft H2O2 de niveaus van Bcl-2 en pro-caspase-3 in beide celtypen verlaagd.PARP was verlaagd in de met H2O2 behandelde A549-cellen. Bovendien werden de activiteiten van caspase-3 en -8 verhoogd in beide met H2O2 behandelde celtypen.Apoptose is sterk gerelateerd aan de instorting van MMP(ΔΨm) (22).,H2O2 leidde tot het verlies van MMP (ΔΨm) in Calu-6 en a549 cellen in een dosisafhankelijke scanner, die erop wijst dat de dood van de longkanker celdood door H2O2 nauw verbonden was met de ineenstorting van MMP (ΔΨm). Bovendien verminderde H2O2 het MMP (ΔΨm) niveau in longkankercellen die de rhodamine 123 kleurstof bevatten.

hoewel 50-100 µM H2O2 de percentages Sub-G1 Calu-6 en A549cellen aanzienlijk verhoogde, toonde 250 of 500 µM H2O2 geen vergelijkbaar effect aan, wat erop wijst dat de hogere doses H2O2 deze longkankercellen op een vergelijkbare manier fixeerden als ethanol of methanol., H2O2 bleek dus gelijktijdig longkanker celldeath te veroorzaken via necrose en apoptose, afhankelijk van de concentratie. In het bijzonder bleken 75 en 100 µMH2O2 gelijktijdig zowel apoptose als necrose in Calu-6-cellen te veroorzaken, aangezien deze doses H2O2 de percentages van sub-G1-cellen niet verhoogden in vergelijking met 50 µM H2O2-behandelde cellen, en er geen verandering was in de niveaus van de intactvorm van PARP-eiwit. Het is nodig om de activiteit van het extracellulaire lactaatdehydrogenase in longkanker cellen gestreamd met 50 – 500 µM H2O2 voor dedetectie van necrotische celdood te evalueren., Eerdere studies toonden een rol aan van H2O2 in de celcyclus fasestilstand en progressie door celcyclus-gerelateerde eiwitten aan te passen (23,24).in lijn hiermee bleek een behandeling met 75 of 100 µMH2O2 onder de geteste doses significant een G1 fasestilstand in Calu-6-en A549-cellen. Aldus, is de g1phasestop samen met inductie van celdood het potentiële mechanisme achter de verzwakking van celgroei uponH2O2 behandeling. Nochtans, maakte H2O2 geen specifieke faseaanvallen van de celcyclus in HeLa cellen (20)., Deze resultaten duidden erop dat door 2O2 geïnduceerde oxidatieve stress zijn effecten op de progressie van de celcyclus manifesteerde, afhankelijk van het celtype en de H2O2-dosis.

Caspaseremmers die in dit experiment werden gebruikt,slaagden er niet in de groeiremming te verminderen die inH2O2-behandelde Calu-6-en a549-kankercellen inhielden, terwijl deze remmers de door H2O2-geïnduceerde celdood in deze cellen aanzienlijk voorkwamen.Hoewel H2O2 de werkzaamheid van caspase-8 in beide longkankercellen tot op zekere hoogte verhoogde, verzwakte caspase-8inhibitor significant de celdood veroorzaakt door H2O2., Een lichte verandering in de werkzaamheid van caspase-8 bleek dus een sterke invloed te hebben op de pro-apoptotische route in met H2O2 behandelde longkanker-cellen. Deze resultaten wezen er ook op dat beide mitochondriën en celdoodreceptorroutes wederzijds nodig waren voor de volledige inductie van apoptose in H2O2-behandelde longkankercellen. Het zou belangrijk zijn om na te gaan hoe H2O2 de weg van de celdoodreceptor beïnvloedt om apoptosis in longkankercellen te veroorzaken. Met betrekking tot MMP(ΔΨm) hadden caspaseremmers geen significant effect op het verlies van met MMP (ΔΨm) inH2O2-behandelde Calu-6-en a549-cellen., Bovendien herstelden deze remmers de verlaagde MMP(ΔΨm) spiegels in met H2O2 behandelde longkanker cellen niet. In plaats daarvan, verbeterde de inhibitor caspase-9 de verminderde niveaus in deze cellen. Het is aannemelijk dat het verlies van MMP (ΔΨm) na behandeling met H2O2 diverse caspasen-gerelateerde tomitochondriale en celdoodreceptorroutes activeerde, resulterend in apoptose, en de activering van caspasen door H2O2 het verlies van MMP(ΔΨm) niet positief konden verhogen., Bovendien kan het verlies van MMP (ΔΨm) veroorzaakt door H2O2 niet genoeg zijn geweest om apoptose in Calu-6 en A549 cellen volledig te veroorzaken onder de downregulation van caspase activiteit.

concluderend, remde H2O2 de groei van longkankercellen door celdood en G1-faserest van de celcyclus. Calu-6 en A549 celdood veroorzaakt door H2O2 het gevolg van necrose, evenals ascaspase-afhankelijke apoptose (Fig.7). De huidige resultaten leveren nuttige informatie op om het cytotoxicologische effect van exogenousH2O2 op longkankercellen met betrekking tot celgroei en dood te begrijpen., Daarnaast kunnen nieuwe strategieën voor de behandeling van longkanker gebaseerd op het gebruik van H2O2 misschien nuttig zijn bij het verminderen van de mortaliteit gerelateerd aan deze maligniteit.

bevestigingen

niet van toepassing.

financiering

deze studie werd ondersteund door een subsidie van de National Research Foundation of Korea (NRF), gefinancierd door de Koreangovernment (MSIP; 2016R1A2B4007773) en ondersteund door het ‘ResearchBase Construction Fund Support Program’, gefinancierd door Chonbuk NationalUniversity in 2018.,

beschikbaarheid van gegevens en materialen

alle gegevens die tijdens deze studie worden gegenereerd of geanalyseerd, zijn opgenomen in dit gepubliceerde artikel.

bijdragen van auteurs

WHP was de enige bijdrager aan het ontwerpen en ontwerpen, verzamelen van gegevens, analyseren en interpreteren van gegevens en schrijven van het manuscript. WHP is verantwoordelijk voor alle aspecten van het werk door ervoor te zorgen dat vragen met betrekking tot de juistheid ofintegriteit van enig onderdeel van het werk naar behoren worden onderzocht en opgelost.

ethische goedkeuring en toestemming om deel te nemen

niet van toepassing.,

toestemming van de patiënt voor publicatie

niet van toepassing.

concurrerende belangen

de auteur verklaart dat hij geen concurrerende belangen heeft.,-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide

FITC

fluoresceïne isothiocyanaat

PI

propidium jodide

	Gonzalez C, Sanz-Alfayate G, Agapito MT,Gomez-Kind, Rocher en Obesitas Bij: de Betekenis van de ROS in oxygensensing in mobiele systemen met gevoeligheid voor fysiologische hypoxie.,Respir Physiol Neurobiol. 132:17–41. 2002. Bekijk artikel: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Baran CP, Zeigler MM, Tridandapani s andMarsh CB: The role of ROS and RNS in regulating life and death ofblood monocytes. Curr Pharm Des. 10:855–866. 2004. Bekijk artikel: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Zorov DB, Juhaszova M and Sollott SJ:Mitochondrial ROS-induced ROS release: An update and review.Biochim Biophys Acta. 1757:509–517. 2006., Bekijk artikel : Google Scholar : PubMed/NCBI
Zelko in, Mariani TJ and Folz RJ:Superoxide dismutase multigene family: a comparison of the CuZn-SOD(SOD1), Mn-SOD (SOD2), and EC-SOD (SOD3) genstructuren,evolutie en expressie. Gratis Radic Biol Med. 33:337–349. 2002.Bekijk artikel: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Wilcox CS: Reactive oxygen species: Rolesin blood pressure and kidney function. 4: 160-166. 2002., Bekijk artikel: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Chen TJ, Jeng JY, Lin CW, Wu CY en ChenYC: Quercetin inhibition of ROS-dependent and-independentapoptosis in rat glioma C6 cells. Toxicologie. 223:113–126. 2006.,Bekijk artikel : Google Scholar : PubMed/NCBI
	Dasmahapatra G, Rahmani M, Dent P andGrant s: the tyrphostin adaphostin interacts synergisticly withproteasome inhibitors to induce apoptosis in human leukemia cellsdoor a reactieve oxygen species (ROS)-afhankelijk mechanisme. Bloed.107:232–240. 2006., Bekijk artikel : Google Scholar : PubMed/NCBI
	Wallach-Dayan SB, Izbicki G, Cohen PY,Gerstl-Golan R, Fine A en Breuer R: bleomycine initieert apoptosis van longepitheliale cellen door ROS maar niet door Fas Fasl pad. Am JPhysiol Long Cell Mol Physiol. 290: L790–L796. 2006. Bekijk artikel: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Sarsour EH, Kumar MG, Chaudhuri L, KalenAL and Goswami PC: Redox control of the cell cycle in health and disease., Antioxid Redox Signal. 11:2985–3011. 2009. View Article : Google Scholar : PubMed/NCBI
	Budihardjo I, Oliver H, Lutter M, Luo Xand Wang X: Biochemical pathways of caspase activation duringapoptosis. Annu Rev Cell Dev Biol. 15:269–290. 1999. View Article : Google Scholar : PubMed/NCBI
	Mehmet H: Caspases find a new place tohide. Nature. 403:29–30. 2000., ViewArticle: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Hengartner MO: The biochemistry ofapoptosis. Natuur. 407:770–776. 2000. Bekijk artikel : Google Scholar : PubMed/NCBI
	Hinz B, Phan SH, Thannickal VJ, PrunottoM, Desmoulière A, Varga J, De Wever O, Mareel M and Gabbiani G:Recent developments in myofibroblast biology: paradigma ‘ s Voorverbonden Weefsel remodellering. Am J Pathol. 180:1340–1355.,Bekijk artikel: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Rhee SG, Kang SW, Jeong W, Chang TS, YangKS and Woo HA: Intracellular messenger function of hydrogenperoxide and its regulation by peroxiredoxins. Curr Opin Cell Biol.17:183–189. 2005. Bekijk artikel: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Vilhardt F en van Deurs B: de phagocytenadfoxidase hangt af van met cholesterol verrijkte membraanmicrodomeinen voor assemblage. EMBO J. 23: 739-748. 2004., Bekijk artikel: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Park WH: the effects of exogene H2O2 oncell death, reactieve oxygen species and glutathion levels in calfpulmonary artery and human umbilical vein endothelial cells. Int JMol Med. 31:471–476. 2013. Bekijk artikel: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Park WH: exogene H2O2 induceert growthinhibition en celdood van humane pulmonale slagader gladde musclecells via glutathiondepletie., Mol Med Rep. 14: 936-942. 2016.Bekijk artikel: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Han YH, Kim SZ, Kim SH en Park WH:Pyrogallol remt de groei van longkanker Calu-6 cellen viacaspase-afhankelijke apoptose. Chem Biol Interactie. 177:107–114. 2009.,Bekijk artikel : Google Scholar : PubMed/NCBI
	Park WH, Seol JG, Kim ES, Hyun JM, JungCW, Lee CC, Kim BK and Lee YY: arseentrioxide-gemedieerde growthinhibition in Mc/CAR myeloma cells via cell cycle arrest inassociation with induction of cyclin-afhankelijke Kinaseinhibitor,P21, en apoptosis. Cancer Res. 60: 3065-3071. 2000.,PubMed/NCBI
	Park WH: Anti-apoptotisch effect van caspaseinhibitors op met H2O2 behandelde Helacellen door vroegtijdige onderdrukking van haar oxidatieve stress. Oncol Rapport 31: 2413-2421. 2014. Bekijk artikel: Google Scholar: PubMed/NCBI
	You BR, Kim sh and Park WH: reactieve oxygen species, glutathion, and thioredoxin influence suberoylbishydroxamic acid-induced apoptose in a549 long cancer cells.Tumor Biol. 36:3429–3439. 2015., Bekijk artikel: Google Scholar: PubMed/NCBI
Yang J, Liu X, Bhalla K, Kim CN, IbradoAM, Cai J, Peng TI, Jones DP and Wang X: Prevention of apoptosis byBcl-2: Release of cytochroom c from mitochondria blocked. Wetenschap.275:1129–1132. 1997. Bekijk artikel: Google Scholar:PubMed/NCBI
	Han YH, Kim SH, Kim SZ en Park WH: Antimycine A als mitochondriënbeschadigingsmiddel induceert een S-fasearm van de celcyclus in HeLa-cellen. Life Sci., 83:346–355. 2008.Bekijk artikel: Google Scholar: PubMed/NCBI
	Han YH, Kim SZ, Kim SH en Park WH:Pyrogallol remt de groei van menselijke longkanker Calu-6 cellsvia het arresteren van de celcyclus arrestatie. Toxicol In Vitro.22:1605–1609. 2008. Bekijk artikel: Google Scholar: PubMed / NCBI