PAGE Gel

PAGE Gel Chemistries for Protein Separation

TGX (Tris/Glycine eXtended) PAGE Gels zijn gebaseerd op een modificatie van het Laemmli systeem. Deze gels zorgen voor zeer snelle draaitijden zonder vervorming en hebben een langere houdbaarheid dan standaard Laemmli gels, met behoud van hun prestaties en reproduceerbaarheid voor maximaal een jaar. Deze nieuwe SDS-pagina gelchemie gebruikt dezelfde monsterscheidingsprofielen als Laemmli gels en dezelfde monster en lopende buffers., Prefab TGX-gels zijn verkrijgbaar in een reeks percentages, waaronder gradient-gels, met verschillende goedconfiguraties en volumes in zowel mini-als midi-maten.

TGX vlekvrije pagina-Gels zijn een recente innovatie die de mogelijkheid biedt om kwaliteitscontrole uit te voeren na zowel elektroforese als het bevlekken of bij het lokaliseren van banden voor vleksnijden., Met vlekvrije technologie kan een PAGINAGEL onmiddellijk na elektroforese worden gevisualiseerd om te bevestigen dat de monsterlading in het juiste bereik ligt en de loopprestatiekwaliteit bevredigend is zonder artefacten zoals glimlachen of verticale strepen; banden kunnen worden geïdentificeerd en verwijderd voor verdere analyse zoals massaspectrometrie. Na het bevlekken van overdracht, kunnen vlekken onmiddellijk worden gevisualiseerd om de efficiëntie van overdracht en de kwaliteit van de vlek te beoordelen.

de mogelijkheid om direct de kwaliteit van een PAGINAGEL en een blot te bekijken voorafgaand aan verdere verwerking bespaart tijd en middelen., Prefab TGX en TGX vlekvrije Gels zijn verkrijgbaar in dezelfde brede waaier van percentages en goed configuraties in mini-en midi-formaten.

Tris-HCl en Tris-acetaat PAGINAGEL worden zonder SDS geformuleerd. Dit geeft de flexibiliteit om één enkel type van gel voor of scheiding van inheemse of SDS-gedenatureerde proteã nen te gebruiken. De aanwezigheid van SDS in het monster en de lopende buffer creëert denatureringsvoorwaarden met scheiding vergelijkbaar met LAEMMLI SDS-PAGE gels., De proteã nen gescheiden in afwezigheid van SDS (en gewoonlijk ook verminderend agent) worden gebruikt in protocollen waar de proteã nen in een inheemse configuratie moeten blijven. Migratiepatronen onder inheemse omstandigheden verschillen van die in denaturerende gels, en het molecuulgewicht kan niet nauwkeurig worden bepaald.

Bis-Tris PAGE gels kunnen ook worden gebruikt voor de scheiding van inheemse of gedenatureerde eiwitten. Dit PAGE gel systeem heeft een discontinue buffer systeem zoals Laemmli, maar wordt uitgevoerd op een lagere pH. MES of MOPS lopende buffers kunnen worden gebruikt met Bis-Tris gels., De MOPSBUFFER heeft gewoonlijk de voorkeur voor middelgrote proteã nen, terwijl MES voor kleinere proteã nen wordt gebruikt. Door de lagere pH hebben Bis-Tris gels een langere houdbaarheid dan standaard Laemmli gels.

Tris / tricine PAGE gels zijn geformuleerd om eiwitten en peptiden te scheiden met molecuulgewichten van 10 kDa en lager. De langzamere mobiliteit van proteã nen in Tris/tricine-gels dan in Tris/glycine-gels resulteert in betere scheiding van polypeptiden met laag molecuulgewicht vanaf SDS-micellen die dicht bij het migratiefront lopen.,

gespecialiseerde pagina-Gels voor eiwitanalyse

IEF pagina-gels worden gebruikt om eiwitten per lading te scheiden. In een pH-gradiënt, migreren de proteã nen tot zij geen netto last hebben — wanneer pH het iso-elektrische punt (pI) van de proteã ne gelijk is. Een IEF-PAGINAGEL kan worden gebruikt om inheemse proteã nen of proteã nen met geladen post-Vertalende wijzigingen (zoals phosphorylation) te scheiden. Prefab gels zijn verkrijgbaar met zowel brede als smalle pH-gradiënten., Bovendien, voor steekproeven die in geà mmobiliseerde pH gradiënt (IPG) stroken voor 2-D elektroforese zijn elektroforese, mini en midi prefab gels beschikbaar met putten die de stroken voor de tweede dimensie elektroforese geschikt.

Zymogrampagina gels detecteren eiwitten met proteasen die gelatine of caseïne als substraat kunnen gebruiken. De proteã nen worden gescheiden op de gels onder denaturerende, nietreducerende voorwaarden. Na elektroforese, wordt de pagina gel geïncubeerd in zymogram renaturing buffer., Na renaturatie van de eiwitten wordt de gel vervolgens geïncubeerd in de zymogram-ontwikkelingsbuffer die een kationcofactor bevat die nodig is voor protease-activiteit. Proteasen worden meestal geïdentificeerd als duidelijke banden (waar de caseïne of gelatine is proteolysed) op een blauwe achtergrond na coomassie kleuring.

PAGINAGEL chemie voor nucleïnezuur scheiding

De PAGINAGEL is niet-verzachtende gels voor de scheiding van nucleïnezuren. TBE-gels worden gebruikt voor dsDNA-analyse, om de zuiverheid van PCR-producten te beoordelen en voor RNase-beschermingstests., Nucleïnezuren van 50 tot 2000 bp worden efficiënt gescheiden op TBE-gels. Bio-Rad heeft een assortiment prefab TBE gels in mini en midi maten.

TBE-ureum pagina gels worden gebruikt voor zowel RNA als ssDNA. Een denaturerend BLADGEL wordt gebruikt voor de bepaling van oligonucleotidezuiverheid, Noordelijke bevlekken en RNase-beschermingsanalyses. TBE-ureum gels geven scherpe, strakke banden met een optimaal groottebereik tot 200 bp. Prefab gels zijn verkrijgbaar in mini-en midi-formaten.,