PAGE Gel (Português)

PAGE Gel Chemistries for Protein Separation

TGX (Tris / Glycine eXtended) PAGE Gels are based on a modification of the Laemmli system. Estes géis permitem tempos de execução muito rápidos sem distorção e têm um prazo de validade mais longo do que o padrão laemmli gels, mantendo o seu desempenho e reprodutibilidade por até um ano. Este novo gel SDS-PAGE usa os mesmos perfis de separação de amostras que laemmli gels e a mesma amostra e buffers em execução., Os géis TGX pré-fabricados estão disponíveis em uma gama de porcentagens, incluindo géis gradientes, com diferentes configurações de poços e volumes em mini e MIDI tamanhos.

TGX géis de página sem manchas são uma inovação recente, proporcionando a capacidade de fazer o controle de qualidade após tanto eletroforese e blotting ou ao localizar bandas para corte pontual., Com a tecnologia sem manchas, um gel de página pode ser visualizado imediatamente após a eletroforese para confirmar que o carregamento de amostras está na faixa certa e a qualidade de execução é satisfatória, sem artefatos como riscas sorridentes ou verticais; bandas podem ser identificadas e excisadas para análise posterior, como espectrometria de massa. Após a transferência de blotting, blots podem ser visualizados instantaneamente para avaliar a eficiência da transferência e a qualidade da blot.

a capacidade de ver diretamente a qualidade de um gel de página e uma mancha antes de mais processamento economiza tempo e recursos., Géis pré-fabricados TGX e TGX sem manchas estão disponíveis na mesma ampla gama de porcentagens e configurações de poço em formatos mini e midi.

Tris-HCl e placas de acetato de Tris são formulados sem SDS. Isto dá a flexibilidade de usar um único tipo de gel para a separação de proteínas nativas ou desnaturadas SDS. A presença de SDS na amostra e no tampão de funcionamento cria condições de desnaturação com separação comparável à de laemmli SDS-PAGE gels., Proteínas separadas na ausência de SDS (e geralmente também agente redutor) são usadas em protocolos onde as proteínas precisam permanecer em uma configuração nativa. Os padrões de migração em condições nativas diferem dos padrões de desnaturação dos géis, e o peso molecular não pode ser determinado com precisão.

Bis-Tris PAGE gels can also be used for the separation of either native or denatured proteins. Este sistema de gel de página tem um sistema de buffer descontínuo como Laemmli, mas é executado em um pH mais baixo. tanto MES ou MOPS buffers running pode ser usado com bis-Tris gels., O tampão de esfregões é geralmente preferido para proteínas de tamanho médio, enquanto o MES é usado para proteínas menores. Devido ao pH mais baixo, o Bis-Tris gels tem um prazo de validade mais longo do que o padrão laemmli gels.os géis de página Tris/tricina são formulados para separar proteínas e peptídeos com pesos moleculares iguais ou inferiores a 10 kDa. A mobilidade mais lenta das proteínas nos géis Tris / tricina do que nos géis Tris/glicina resulta numa melhor separação dos polipeptídeos de baixo peso molecular dos SDS micelles que correm perto da frente de migração.,géis de página especializada para análise de proteínas são usados para separar proteínas por carga. Em um gradiente de pH, as proteínas migram até que não tenham carga líquida — quando o pH é igual ao ponto isoelétrico (pI) da proteína. Um gel de página IEF pode ser usado para separar proteínas nativas ou proteínas com modificações pós-translacionais carregadas (como fosforilação). Géis pré-cozidos estão disponíveis com gradientes de pH largo e estreito., Adicionalmente, para amostras que foram electroforizadas em faixas imobilizadas com gradiente de pH (IPG) para electroforese 2-D, estão disponíveis géis pré-cozidos mini e midi com poços que acomodam as tiras para a electroforese de segunda dimensão.géis de página de Zimograma detectam proteínas que têm proteases que podem usar gelatina ou caseína como substrato. As proteínas são separadas nos géis em condições de desnaturação e não redutoras. Após a electroforese, o gel de página é incubado em tampão de renaturação zymogram., Após a renaturação das proteínas, o gel é então incubado em tampão de desenvolvimento de zimogramas contendo um cofactor de catião necessário para a actividade da protease. As Proteases são geralmente identificadas como faixas claras (em que a caseína ou gelatina foi proteolisada) sobre um fundo azul após coloração de Coomassie.os géis de páginas não desnaturadas para a separação dos ácidos nucleicos são os géis de páginas não desnaturadas. Os géis TBE são utilizados para a análise dsDNA, para avaliar a pureza dos produtos PCR e para os ensaios de protecção RNase., Ácidos nucleicos de 50 a 2000 bp são eficientemente separados em géis TBE. Bio-Rad tem uma gama de géis pré-mastro do TBE em mini e MIDI tamanhos.géis de página TBE-ureia são utilizados tanto para RNA como para ssDNA. Utiliza-se um gel de página desnaturante para determinar a pureza dos oligonucleótidos, os ensaios de coagulação do Norte e os ensaios de protecção da RNase. Os géis TBE-ureia dão bandas afiadas e apertadas com uma gama de tamanho ideal até 200 bp. Os géis pré-masterizados estão disponíveis nos formatos mini e midi.,