cerca de metade de todos os doentes com infecção pelo vírus agudo da hepatite C (VHC) progridem para a doença crónica, e muitos deles desenvolvem carcinoma hepatocelular numa vida posterior (1). O VHC foi classificado em seis genótipos principais, muitos dos quais contêm uma série de subtipos mais estreitamente relacionados (21)., Foram notificados níveis mais elevados de ARN do VHC para os doentes infectados com estirpes do genotipo 1 do que para os doentes infectados com outros genótipos (2), mas não foram extensivamente estudadas as possíveis diferenças de carga viral entre os genótipos. Do mesmo modo, embora tenham sido notificadas múltiplas infecções por genótipos diferentes do VHC (8), não é claro se esses doentes apresentam cargas virais superiores às dos doentes infectados com um único genótipo ou se existe interferência viral., Em alguns estudos, níveis mais elevados de transaminases hepáticas correspondem a níveis mais elevados de ARN do VHC, sugerindo que estes últimos estão associados a lesões hepáticas (7, 9, 22). No entanto, uma relação direta entre o nível de viremia e a gravidade da doença hepática ou níveis de transaminases não é universalmente aceita (10, 11). Além disso, os papéis do genótipo do VHC, da co-infecção, idade, raça e sexo do vírus da Imunodeficiência Humana (VIH) foram investigados a este respeito, com vários resultados (1, 2, 15-17, 22).,no presente estudo, investigámos a carga viral do VHC, com base no genotipo, em doentes monoinfectados, mas também em doentes co-infectados com os diferentes genótipos de VHC. Neste último caso, procurou-se determinar se estes doentes tinham cargas virais mais elevadas do que os doentes infectados com um único genótipo e, em caso afirmativo, se esta poderia estar correlacionada com outras características demográficas, tais como a idade e o sexo, ou se dependia de genótipos específicos e/ou subtipos que co-infectavam o doente.,
para testar nossa hipótese, um total de 396 pacientes cronicamente infectados da Argentina (n = 305), Uruguai (n = 66), Rússia (n = 12) e Índia (n = 13), vistos de Março de 2000 a junho de 2001, foram inicialmente investigados. Nenhum destes doentes tinha marcadores de infecção pelo VIH ou recebeu tratamento antivírico. Todas as amostras foram armazenadas a -20°C antes de serem utilizadas para extracção de ARN do VHC, tal como descrito anteriormente (3). Para a determinação da carga viral, foi utilizado o teste Amplicor HCV Monitor versão 2.0, de acordo com as instruções do fabricante (Roche Diagnostics, Genebra, Suíça)., Dos 396 doentes originalmente incluídos no nosso estudo, 139 doentes com níveis de ARN do VHC inferiores a 1.000 UI/ml foram excluídos da análise adicional a fim de se obterem resultados reprodutíveis. O genótipo e o subtipo dos restantes 257 isolados de VHC foram determinados pelo ensaio INNOLIPA VHC II (Innogenética, Gand, Bélgica) ou por análise filogenética das sequências de nucleótidos da região 5′ não codificada.(4, 5, 19, 23), a seguir à amplificação PCR, como descrito anteriormente (3, 6). Para evitar resultados falsos positivos, as recomendações de Kwok e Higuchi foram rigorosamente cumpridas (13)., Destes estudos foi possível estabelecer que 12 dos 245 doentes investigados foram co-infectados por dois genotipos diferentes, conforme determinado pelo ensaio InnoLipa (20). Estes pacientes eram da Argentina e tinham uma faixa etária de 29 a 67 anos.em seguida, comparámos os níveis médios de ARN do VHC entre os grupos de doentes apresentados no quadro 1. 1. O nível médio de ARN do VHC não diferiu significativamente entre os diferentes genótipos em doentes monoinfectados., Da mesma forma, mediana de ARN do VHC níveis para os pacientes co-infectados (356,000 ± 56,000 UI/ml) não foram significativamente maiores do que aqueles para os pacientes infectados com apenas um genótipo (344,000 ± 52,000 UI/ml) (P > 0,05) (Tabela (Tabela2).2). Comparações da mediana do ARN do VHC níveis para pacientes co-infectados pelos genótipos específicos do mesmo grupo etário (por exemplo, o genótipo 1a plus 1b; 364,000 ± 60.000 UI/ml), com mediana de ARN do VHC níveis de pacientes infectados com apenas um genótipo (i.e.,, ou 1a ou 1b; 360,000 ± 56,000 e 352,000 ± 48,000 UI/ml, respectivamente) não apresentaram diferença estatisticamente significativa entre os dois grupos (P > 0,05) (Tabela (Table11).
Tabela 1.
VHC carrega no sexo masculino e sexo feminino
| Grupo | Todos os pacientes | Feminino | Masculino | ||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Não., de sam-ples | mediana da idade (yr) | mediana da carga do VHC (UI/ml) | No. de sam-ples | mediana da idade (yr) | mediana da carga do VHC (UI/ml) | No., | |||
| do Genótipo 4 | 4 | 56 | 316,000 | 1c | 54 | 356,000 | 3 | 59 | 272,000 |
Tabela 2.,
VHC carrega em macho e fêmea os pacientes co-infectados por mais de um genótipo
| Grupo | Todos os pacientes | Feminino | Masculino | ||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Não. de amostras | Mediana idade (anos) | Mediana do VHC carga (UI/ml) | Não., de amostras | Mediana idade (anos) | Mediana do VHC carga (UI/ml) | Não.,=”1″ rowspan=”1″>368,000 | |||
| co-infecção com genótipos 1a e 1b | 10 | 44 | 364,000 | 4 | 48 | 312,000 | 6 | 37 | 372,000 |
a Maioria dos pacientes co-infectados eram co-infectados pelos genótipos 1a e 1b. Apenas dois pacientes eram co-infectados pelo genótipo 1b plus 2a/c ou 2a/c e 2b. As cargas virais obtidos nestes dois últimos casos foram semelhantes aqueles obtidos de pacientes co-infectados com 1a plus 1b (Tabela (Tabela2).2)., Isto indica que a carga viral em doentes co-infectados é independente da Associação de genotipos que infectam o doente, apesar de ser necessária uma análise mais detalhada para tirar conclusões definitivas.também analisámos os dados relativos a potenciais correlatos da co-infecção, tais como Idade do doente e sexo e níveis de alanina aminotransferase (ALT). Não foi encontrada correlação significativa entre o nível, a idade e o sexo do ARN do VHC no grupo Co-infectado com VHC (Quadro 3).3). Foram encontrados níveis mais elevados de ALT no sexo masculino do que no sexo feminino em doentes co-infectados (Tabela 3).3)., Não há uma explicação clara para esta diferença. Acreditamos que as flutuações nos níveis de ALT durante o curso natural da infecção com VHC em diferentes doentes podem ser responsáveis por esta constatação. Esta discrepância Pode também estar relacionada com os factores genéticos e imunológicos indefinidos que podem levar a diferenças no controlo da replicação do VHC entre diferentes grupos de pessoas (16).
Tabela 3.,
dados Demográficos e características clínicas dos pacientes co-infectados com HCV
| Grupo | Não. de amostras | Média de idade (anos) | Médio nível de ALT (UI/litro)a | Significa VHC nível (UI/ml) |
|---|---|---|---|---|
| Masculino | 8 | 41.,5 | 211.0 | 316,000 |
| Feminino | 4 | 48 | 95.8 | 352,000 |
os resultados deste estudo também confirmam resultados anteriores de que os níveis de ARN do VHC nos doentes não estão correlacionados com a idade ou o sexo (16)., Os pacientes com idades entre 29 a 39, 40 a 49, 50 a 59, e 60 a 69 anos do nosso estudo não mostraram diferenças significativas nas cargas virais (dados não mostrados). Além disso, os nossos resultados mostram que os doentes crónicos co-infectados por dois genótipos diferentes do VHC apresentam cargas virais semelhantes às dos doentes infectados por um único genótipo (tabelas (quadros 11 e 2).2). Isto sugere que não existe efeito aditivo em doentes co-infectados. Não é claro se os dois genótipos se replicam com igual eficiência, uma vez que isso não estava no âmbito do estudo., No entanto, a interferência entre dois genótipos infectados é possível, como sugerido por outros (12, 14, 18). É necessária uma melhor compreensão do efeito da co-infecção com diferentes genótipos do VHC, dos determinantes do aumento do nível de ARN do VHC e da importância dos níveis elevados de ARN do VHC durante o curso natural da infecção pelo VHC, de modo a identificar os doentes que mais beneficiariam do tratamento com agentes antivíricos.