PAGE Gel (Svenska)

PAGE Gel Chemistries for Protein Separation

TGX (Tris/Glycine eXtended) PAGE Gels bygger på en modifiering av Laemmli-systemet. Dessa geler möjliggör mycket snabba körtider utan förvrängning och har en längre hållbarhet än standard laemmli geler, behåller deras prestanda och reproducerbarhet i upp till ett år. Denna nya SDS-PAGE gel kemi använder samma provseparationsprofiler som laemmli geler och samma prov och kör buffertar., Precast TGX geler finns i en rad procentsatser, inklusive gradient geler, med olika brunnskonfigurationer och volymer i både mini och midi storlekar.

TGX fläckfria SIDGELER är en ny innovation som ger möjlighet att göra kvalitetskontroll efter både elektrofores och blotting eller när man lokaliserar band för spotskärning., Med fläckfri teknik kan en PAGE gel visualiseras omedelbart efter elektrofores för att bekräfta att provbelastningen ligger i rätt intervall och körkvaliteten är tillfredsställande utan artefakter som leende eller vertikal strimning.band kan identifieras och skäras ut för vidare analys, såsom masspektrometri. Efter blotting överföring kan blots omedelbart visualiseras för att bedöma effektiviteten av överföringen och blotens kvalitet.

möjligheten att direkt visa kvaliteten på en PAGE gel och en blot före vidare bearbetning sparar tid och resurser., Precast TGX och TGX fläckfria geler finns i samma brett spektrum av procentsatser och brunnskonfigurationer i mini-och midi-format.

Tris-HCl-och Tris-acetatsidgeler formuleras utan SDS. Detta ger flexibiliteten att använda en enda typ av gel för antingen separation av inhemska eller SDS-denaturerade proteiner. Närvaro av SDS i provet och kör buffert skapar denatureringsförhållanden med separation jämförbar med laemmli SDS-PAGE gels., Proteiner separerade i frånvaro av SDS (och vanligtvis också reduktionsmedel) används i protokoll där proteiner måste förbli i en infödd konfiguration. Migrationsmönster under inhemska förhållanden skiljer sig från dem i denatureringsgeler, och molekylvikt kan inte bestämmas med noggrannhet.

bis-Tris page gels kan också användas för separation av antingen inhemska eller denaturerade proteiner. Denna sida gel systemet har en diskontinuerlig buffertsystem som Laemmli, men körs vid ett lägre pH. antingen MES eller MOPS kör buffertar kan användas med Bis-Tris geler., Mops buffert är vanligtvis att föredra för medelstora proteiner, medan MES används för mindre proteiner. På grund av det lägre pH-värdet har bis-Tris geler en längre hållbarhet än standard laemmli geler.

Tris / tricine PAGE gels är formulerade för att separera proteiner och peptider med molekylvikter på 10 kDa och nedan. Den långsammare rörligheten hos proteiner i Tris / tricingeler än i Tris/glycingeler resulterar i bättre separation av lågmolekylära polypeptider bort från SDS-miceller som löper nära migreringsfronten.,

specialiserade Sidgeler för proteinanalys

IEF-sidgeler används för att separera proteiner genom laddning. I en pH-gradient migrerar proteiner tills de inte har någon nettoladdning – när pH är lika med proteinets isoelektriska punkt (pI). En IEF PAGE gel kan användas för att separera inhemska proteiner eller proteiner med laddade post-translationella modifieringar (såsom fosforylering). Prefabricerade geler finns med både breda och smala pH-gradienter., Dessutom, för prover som har elektroforeserats i immobiliserade pH-gradient (IPG) remsor för 2-D elektrofores, mini och midi prefabricerade geler finns med brunnar som rymmer remsorna för den andra dimensionen elektrofores.

zymogram PAGE gels detekterar proteiner som har proteaser som kan använda gelatin eller kasein som substrat. Proteiner separeras på gelerna under denaturering, icke-reducerande förhållanden. Efter elektrofores inkuberas PAGE gel i zymogram renaturing buffert., Efter renaturering av proteinerna inkuberas gelén sedan i zymogramutvecklingsbuffert innehållande en katjonkofaktor som krävs för proteasaktivitet. Proteaser identifieras vanligtvis som tydliga band (där kasein eller gelatin har proteolyserats) på en blå bakgrund efter coomassie-färgning.

SIDA Gel Kemi för Nukleinsyra Separation

TBE SIDAN geler är nondenaturing geler för separation av nukleinsyror. TBE geler används för dsDNA analys för att bedöma renheten av PCR-produkter och för RNase skydd analyser., Nukleinsyror från 50 till 2000 bp separeras effektivt på TBE-geler. Bio-Rad har en rad precast TBE geler i mini och midi storlekar.

TBE-urea sidgeler används för både RNA och ssDNA. En denaturering PAGE gel används för bestämning av oligonukleotid renhet, northern blotting och RNase protection analyser. TBE-urea geler ger skarpa, snäva band med ett optimalt storleksområde upp till 200 bp. Prefabricerade geler finns i mini-och midi-format.,