Naposledy Aktualizován dne 4. února 2021 podle Sagar Aryal
MacConkey agar byl první solidní diferenciální média mají být formulovány, který byl vyvinut ve 20. století Alfred Theodore MacConkey. Macconkey Agar je nejstarší selektivní a diferenciální médium pro pěstování koliformních organismů., Používá se k izolaci a diferenciaci nestravitelných gramnegativních prutů, zejména členů rodiny Enterobacteriaceae a rodu Pseudomonas.,20c3eca“>
Ingredients | Amount |
Peptone (Pancreatic digest of gelatin) | 17 gm |
Proteose peptone (meat and casein) | 3 gm |
Lactose monohydrate | 10 gm |
Bile salts | 1.,5 gm |
Sodium chloride | 5 gm |
Neutral red | 0.03 gm |
Crystal Violet | 0.001 gm |
Agar | 13.,5 gm |
Princip MacConkey Agar
Slinivky trávení želatiny a peptony (maso a kasein), poskytují základní živiny, vitamíny a dusíkatých faktory nutné pro růst mikroorganismů. Monohydrát laktózy je fermentovatelným zdrojem sacharidů. Selektivní účinek tohoto média je přičítán krystalově fialové a žlučové soli, které jsou inhibiční pro většinu druhů grampozitivních bakterií. Chlorid sodný udržuje osmotickou rovnováhu v médiu.,
kvasící kmeny laktózy rostou jako červené nebo růžové. Červená barva je způsobena produkcí kyseliny z laktózy, absorpcí neutrální červené a následnou změnou barvy barviva, když pH média klesne pod 6.8. Bakterie bez laktózy, jako jsou Salmonella, Proteus, Pseudomonas aeruginosa a Shigella, nemohou laktózu využívat a místo toho budou používat pepton. To tvoří amoniak, který zvyšuje pH agaru a vede k tvorbě bílých nebo bezbarvých kolonií vytvořených v desce a agar obklopující bakterie zůstává relativně průhledný., Tyto kolonie mohou také vypadat zlatavě až hnědé s tmavými středy.
laktózu lze v médiu nahradit jinými cukry a náhradní cukry lze použít k testování schopností gramnegativních bakterií kvasit náhradní cukry. Například, sorbitol může být použit jako náhrada cukru v MacConkey agar na pomoc při izolaci a diferenciaci enteropathogenic E. coli, sérotypy, jako jsou E. coli O157:H7 přítomností bílé kruhové kolonie, které jsou non-sorbitol kvasí.,
Příprava MacConkey Agar
- Pozastavit 49.53 gramů dehydrovaného média v 1000 ml destilované vody.
- zahřejte k varu, aby se médium úplně rozpustilo.
- sterilizujte autoklávováním při tlaku 15 liber (121°C) po dobu 15 minut.
- ochlaďte na 45°C -50°C.
- před nalitím do sterilních Petriho desek dobře promíchejte.,a3c“>
Proteus
Uses of MacConkey Agar
- MacConkey agar is used for the isolation of gram-negative enteric bacteria.,
- používá se při diferenciaci kvašení laktózy z gram-negativních bakterií bez kvašení laktózy.
- používá se při mikrobiologickém vyšetření potravin a pro přímé pokovování / inokulaci vzorků vody pro koliformní počty.
- používá se k vyšetření mléka a mléčných výrobků.
- britský lékopis doporučil toto médium pro subkulturu a identifikaci Escherichia coli.,
Omezení MacConkey Agar
- koloniální vlastnosti popisují dát presumptivní identifikaci pouze izolované organismy. Pro konečnou identifikaci je nutné provést další potvrzovací testy, jako jsou biochemické testy.
- mohou se vyskytnout některé kmeny, které rostou špatně nebo na tomto médiu nerostou.
- inkubace agarových destiček MacConkey pod zvýšeným CO2 byla hlášena ke snížení růstu a zotavení řady kmenů gramnegativních bacilů.,
- na tomto médiu se mohou rojit některé kmeny Proteusu.