Ultimo aggiornamento febbraio 4, 2021 da Sagar Aryal
MacConkey agar è stato il primo supporto differenziale solido ad essere formulato che è stato sviluppato al 20 ° secolo da Alfred Theodore MacConkey. L’agar MacConkey è il primo mezzo selettivo e differenziale per la coltivazione di organismi coliformi., Viene utilizzato per l’isolamento e la differenziazione di barre gram-negative non fastidiose, in particolare membri della famiglia Enterobacteriaceae e del genere Pseudomonas.,20c3eca”>
| Ingredients | Amount |
| Peptone (Pancreatic digest of gelatin) | 17 gm |
| Proteose peptone (meat and casein) | 3 gm |
| Lactose monohydrate | 10 gm |
| Bile salts | 1.,5 gm |
| Sodium chloride | 5 gm |
| Neutral red | 0.03 gm |
| Crystal Violet | 0.001 gm |
| Agar | 13.,5 gm |
Principio di agar di macconkey Agar
Pancreatico di caseina e peptoni (carne e caseina) fornire le sostanze nutrienti essenziali, vitamine e composti azotati fattori necessari per la crescita di microrganismi. Il lattosio monoidrato è la fonte fermentabile di carboidrati. L’azione selettiva di questo mezzo è attribuita alla viola cristallina e ai sali biliari, che sono inibitori della maggior parte delle specie di batteri gram-positivi. Il cloruro di sodio mantiene l’equilibrio osmotico nel mezzo.,
I ceppi di fermentazione del lattosio crescono come rossi o rosa. Il colore rosso è dovuto alla produzione di acido da lattosio, all’assorbimento del rosso neutro e ad un successivo cambiamento di colore del colorante quando il pH del mezzo scende al di sotto di 6,8. I batteri fermentanti del Non lattosio quali Salmonella, proteus, Pseudomonas aeruginosa e Shigella non possono utilizzare il lattosio e useranno invece il peptone. Questo forma ammoniaca, che aumenta il pH dell’agar e porta alla formazione di colonie bianche o incolori formate nella piastra e l’agar che circonda i batteri rimane relativamente trasparente., Queste colonie possono anche sembrare dorate a marrone con centri scuri.
Il lattosio può essere sostituito nel mezzo da altri zuccheri e gli zuccheri sostitutivi possono essere utilizzati per testare le capacità dei batteri gram-negativi di fermentare gli zuccheri sostitutivi. Ad esempio, il sorbitolo può essere utilizzato come zucchero sostitutivo nell’agar MacConkey per aiutare nell’isolamento e nella differenziazione dei sierotipi enteropatogeni di E. coli come E. coli O157:H7 per la presenza di colonie circolari bianche che non fermentano il sorbitolo.,
Preparazione di MacConkey Agar
- Sospendere 49,53 grammi di terreno disidratato in 1000 ml di acqua distillata.
- Riscaldare ad ebollizione per sciogliere completamente il mezzo.
- Sterilizzare in autoclave a 15 libbre di pressione (121°C) per 15 minuti.
- Raffreddare a 45°C -50°C.
- Mescolare bene prima di versare in piastre di Petri sterili.,a3c”>
Proteus
Uses of MacConkey Agar
- MacConkey agar is used for the isolation of gram-negative enteric bacteria.,
- È usato nella differenziazione del lattosio che fermenta dai batteri gram-negativi non fermentanti del lattosio.
- È uso nell’esame microbiologico degli alimenti e per la placcatura / inoculazione diretta dei campioni dell’acqua per i conteggi coliformi.
- Viene utilizzato per l’esame di latte e prodotti lattiero-caseari.
- La farmacopea britannica ha raccomandato questo mezzo per la sottocultura e l’identificazione di Escherichia coli.,
Limitazioni di MacConkey Agar
- Le caratteristiche coloniali descritte danno presuntiva identificazione solo degli organismi isolati. È necessario sottocultura e carryout altri test di conferma come test biochimici per l’identificazione finale.
- Si possono incontrare alcuni ceppi che crescono male o non riescono a crescere su questo terreno.
- L’incubazione di placche di Agar MacConkey sotto aumento di CO2 è stata riportata per ridurre la crescita e il recupero di un certo numero di ceppi di bacilli Gram-negativi.,
- Alcuni ceppi di Proteus possono sciamare su questo terreno.