Onkologi Rapporter

Indledning

Reaktive ilt arter (ROS) er meget unstableand reaktive molekyler, der indeholder ilt ene eller begge sider. De omfatter hydrogen pero .id(H2O2), supero .idanion (O2− -) og hydro .ylradikal (OH OH).Selvom ROS anerkendes som cytotoksiske midler, kan de tjeneanden budbringere til at kontrollere mange cellulære begivenheder af geneekspression, differentiering, celleproliferation og celledød(1,2)., ROS er hele tiden genereres byendogenous aerobe stofskifte i cellerne i form af underholdningsdistriktet o2●− og/eller er med vilje lavet af oxidases,som nicotinamid adenin dinucleotide fosfat (NADPH) oxidaseand xanthin oxidase (3).O2− – omdannes til H2O2 af en .ymet supero .iddismutase(4). H2O2 forarbejdes yderligere til O2 og H2O af katalaseeller glutathionpero .idaser (5).Sammenlignet med andre medlemmer af ROS, ikke-radikalh2o2 er i stand til frit at trænge ind i cellemembraner, og det interagerer med jernholdigt jern (Fenton kemi),som producerer den meget destruktive og kortvarige OH OH., Produktionen af forskellige former for ROS på forskelligeniveauer kan være enten nyttige eller skadelige for celler og væv.Især kan store mængder ROS være resultatet af entenderes overproduktion og / eller nedregulering af antio .idanter.Forhøjede niveauer af ROS kan resultere i skade på DNA, proteiner oglipider i celler, hvilket implicerer dem i etiologien af flere sygdomme, herunder kræft (6-9).

apoptose er programmeret celledød og forekommer viato forskellige veje: den mitokondrielle indre vej og denreceptormedierede ekstrinsiske vej (10)., De vigtigste trin i themitochondrial-medieret apoptose er translokation af cytochromec fra mitokondrierne til cytosol og dens subsequentinteraction med Apaf-1 og caspase-9 for at danne et kompleks(apoptosome). Apoptosomet aktiverer yderligere e .ecutive caspase-3,-6 og -7 (11). Omvendt begynder denekstrinsiske vej med binding af specifikke ligander, sådansom TNF-a, TRAIL og Fas til de respektive celledødsreceptorer,som stimulerer caspase-8 og -3 (12) aktiviteter., Caspase-8 spalter BUD, apro-apoptotic cytosolic protein af Bcl-2 familien, til at generere atruncated produkt, tBID, der kommer ind i mitokondrierne anddecreases den mitokondriske membran potentiale (MMP;ΔΨm), der forårsager frigivelse af cytochrom c. Thetranslocation af en anden apoptotic protein, Bax fra cytosol til mitokondrierne også udløser tilsvarende tab af MMP(ΔΨm). Caspase-3 er nøglen executive caspase; itsactivation systematisk kan adskille integriteten af cellsthrough spalte flere vigtige proteiner, såsom poly(ADP-ribose) – polymerase (PARP) og RhoGDI.,

lunger er modtagelige for en række luftbårne ogblodbårne skader, der følgelig kan forårsage lungefibrose ogkræft (13). Carcinogenesen aflungekræft anses for at være tæt forbundet medh2o2-medieret vævsinflammation. Duringinflammation, væv koncentrationer af H2O2are forventes at opnå næsten millimolar niveauer, der henviser til, at lowlevels af H2O2 produceret af NADPH oxidasesunder normale forhold er en hypotese, der ikke har en higheraffect end plasma membranen microenvironment, som lipidrafts (14,15)., Ikke desto mindre, i begge tilfælde,H2O2 kan modulere vitale cellefunktioner ofcell spredning, død og differentiering ved at ændre signalingcascades og genekspression og dens højere niveauer kan føre toapoptosis og/eller nekrose. Eksogen H2O2 anvendes ofte som den repræsentative ROS til at simulere o .idativestress i celler og væv. H2O2 errelativt ugiftigt for de normale celler i humane navlestrengenendotelceller og humane lungearterieceller(16,17). H2O2-triggeredecelledød i lungecancerceller kan have cytotoksikologisk forskninginteresse.,

I den foreliggende undersøgelse, er den molekylære effekter ofexogenous H2O2 på Calu-6 og A549 lunge cancercells blev evalueret med hensyn til celle vækst og død, som wellas anti-apoptotic effekter af forskellige caspase-hæmmere wereinvestigated i H2O2-behandlet lunge cancercells.,

Materialer og metoder

Celle kultur

Den menneskelige lungekræft Calu-6 og A549 celle lineswere købt fra den koreanske Cell Line Bank (Seoul, Korea) andwere dyrket i RPMI-1640 medium suppleret med 10% fetalbovine serum (FBS; Sigma-Aldrich; Merck KGaA, Darmstadt, Tyskland)og 1% penicillin-streptomycin (Gibco-BRL; Thermo FisherScientific, Inc., MAALTHAM, MA, USA). Disse celler blev regularlycultured i 100-mm plast vævskultur retter (Nunc, Roskilde,Danmark) og høstet med en trypsin-EDTA-opløsning (Gibco-BRL;Thermo Fisher Scientific, Inc.).,

Reagenser

Celle vækst og celle numberassays

Celle vækst ændringer blev evalueret af assessing3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2, 5-diphenyltetrazolium bromid (MTT;Sigma-Aldrich; Merck KGaA) farvestof absorbans som tidligere beskrevet(19). Levedygtige og døde celletal blev bestemt ved trypan blå cellefarvemetode (20). Cellerne blev eksponeret for de udpegede mængder af H2O2 med eller uden 15 µM af hverkaspaseinhibitor i 24 timer.,

cellecyklus og sub-G1-celleanalyse

cellecyklus og sub-G1-celleanalyse blev udført ved propidiumiodid (PI; Sigma-Aldrich; Merck KGaA) farvning Som tidligere beskrevet (20). Cellswere udsat til det angivne beløb ofH2O2 med eller uden 15 µM i hver caspaseinhibitor for 24 timer. Celle-cyklus distributioner blev analyseret med aFACStar flowcytometer (Becton-Dickinson and Company, FranklinLakes, NJ, USA).,

Annexin V-FITC-farvning for celle deathdetection

Apoptotic celledød blev kontrolleret ved at måle cellsstained med Annexin V-fluorescein phycoerythrin (FITC;Invitrogen; Thermo Fisher Scientific, Inc.) som tidligere beskrevet (20). Cellerne blev eksponeret for thedesignated mængder af H2O2 med eller uden 15µM i hver caspase-hæmmer for 24 timer. Annexin V-FITC-farvning wasanalyzed med en FACStar flowcytometer (Becton-Dickinson andCompany).,

vurdering af MMP(Merckmm)

MMP (rhmm) blev evalueret af et rhodamine123 fluorescerende farvestof (Sigma-Aldrich; Merck KGaA) som tidligere beskrevet (21). Cellerne var exposedto de udpegede mængder af H2O2 med orwithout 15 µM i hver caspase-hæmmer for 24 timer. Rhodamine 123staining intensitet blev analyseret af en FACStar flowcytometer(Becton-Dickinson and Company). Fraværet af rhodamin 123 fracellerne angav tabet af MMP (Δmm) i lungekræftceller., MMP(Δmm) niveauer i celler ikke inklusive MMP (loss lossm)-tab celler blev udtrykt som den gennemsnitlige fluorescensintensitet, som blev estimeret af Cell .uest soft .are (version 5.1;Becton-Dickinson og Company).

Western blot analyse

ændringer i Bcl-2, caspase-3 og PARP inH2O2-behandlede celler blev analyseret ved westernblotting. Kortvarigt blev 1 106 106 celler i 60 mm dyrkningsskål(Nunc) inkuberet med de angivne mængder afh2o2 i 24 timer. prøver indeholdende 20 µg totalprotein blev adskilt med 8 eller 12.,5% SDS-PAGE gel, overføres toImmobilon-P PVDF membraner (EMD Milipore, Billerica, MA, USA) byelectroblotting og så tastede med anti-Bcl-2, anti-caspase-3,anti-PARP og anti-β-actin antistoffer (fortynding 1:5,000; Santa CruzBiotechnology, Santa Cruz, CA, amerikas forenede stater). Membraner blev behandlet medhorseradish pero .idase-konjugerede sekundære antistoffer (fortynding1:5.000; Cell signaling Technology, Inc.). Blots blev udviklet afmidler til et ECL-kit (Amersham Life Science, Arlington Heights, IL,USA).,

Kvantificering af caspase-3 og −8activities

De aktiviteter, der af caspase-3 og -8 blev evalueret bycaspase-3 og -8 kolorimetriske analyse kits (R&D Systems, Inc.) somtidligere beskrevet (20). Inbrief, 1×106 celler i 60-mm kultur fad (Nunc) weretreated med 75 µM H2O2 for 24 timer. Samplescontaining 50 µg total protein blev brugt til at vurdere caspase-3 og −8activities.

Statistisk analyse

Data, der repræsenterer mindst to independentexperiments (mean ± SD) blev analyseret gennem InStat software(GraphPad Prism4; GraphPad Software, Inc.,, San Diego, CA, USA). Studentens t-test eller envejsanalyse af varians (ANOVA) med posthoc-analyse ved hjælp af Tukeys multiple sammenligningstest blev anvendt tilparametriske data. P<0.05 blev anset for at indikere astatistisk signifikant forskel.

resultater

H2O2 påvirker cellevækst og cyklusfordeling i lungecancerceller

de cellulære virkninger af H2O2on væksten af lungecancerceller blev undersøgt ved 24 timer., Behandlingmed 50-250 µM H2O2 reduceres signifikant levedygtig (trypan blå-negativ) og øget død (trypanblue-positiv) Calu-6 celler på en dosisafhængig måde (fig. 1A). Baseret på MTT-assays svækkede 50-250 µMH2O2 signifikant væksten afcalu-6 celler med en IC50 på ~50 µM (fig. 1B). Da cellecyklusfordelingeni H2O2-behandlede Calu-6-celler blev undersøgt, viste Calu-6-celler behandlet med 75-µM H2O2 en signifikant G1-fasestopning af cellecyklussensammenlignet med kontrolcellerne (fig.2A og B)., Som i Calu-6 faldt antallet af a549 levedygtige celler efter H2O2-behandling og døde cellerøget signifikant på en dosisafhængig måde (fig. 1C). Derudover reducerede H2O2 dosisafhængigt væksten afa549 celler med en IC50 på ~100 µM (Fig. 1D). Behandling med 100 µMH2O2 inducerede også signifikant en G1-fasearm i a549 celler sammenlignet med kontrolcellerne (fig. 2A og B).

H2O2 influencescell død og MMP (Δmm) inH2O2-behandlede lungecancerceller

efterfølgende blev rollen af H2O2in lungecancercelledød yderligere undersøgt for at få mereforståelse., Mens 50-100 µM H2O2significantly augmented procenter af sub-G1 celler i Calu-6cells, 250 µM H2O2 ikke øge thepercentage af sub-G1 celler i disse celler (Fig. 2A og C). Behandling med 50-250 µM H2O2 dosisafhængigt steg imidlertid antallet af Anne .in v-FITC-farvede celler i Calu-6 celler (fig. 3A). Når virkningen ofH2O2 på MMP (Δmm) i Calu-6 cellerblev vurderet ved hjælp af rhodamin 123, H2O2provoked tabet af MMP (δ 6m) i en dosisafhængigmanner (Fig. 3B)., Med hensyn toMMP (ΔΨm) niveau i Calu-6 celler undtagen negativerhodamine 123 farvning af celler, H2O2 decreasedthe MMP (ΔΨm) niveau i Calu-6 celler i en dosis-dependentmanner (Fig. 3C). I A549 celler,behandling af 50 og 100 µM H2O2 significantlyincreased de procenter af sub-G1 celler, men behandling med 250and 500 µM H2O2 ikke vise denne effekt(Fig. 2A og C).H2O2 dosisafhængigt forbedrede antallet af Anne .in v-FITC-farvede a549-celler (fig.3D). Derudover dosisafhængige H2O2INDUCEREDE tabet af MMP (Δmm) i a549 celler (Fig. 3E)., Mens 50 µMH2O2 øget MMP (ΔΨm) niveau inA549 celler, 100-250 µM H2O2 significantlydecreased MMP (ΔΨm) niveauer i disse celler (Fig. 3F).

H2O2 influencesapoptosis-relaterede proteiner og caspases inH2O2-behandlet lunge cancer cells

Evaluering af apoptose-relaterede proteiner duringH2O2-lunge-induceret celledød afsløret thatBcl-2, en anti-apoptotic protein, faldt uponH2O2 behandling i Calu-6-celler (Fig. 4A). Niveauet af pro-caspase-3 varreduceret med 75 µM H2O2 (Fig. 4A). Den ubrudte form af 116 kDa Parpblev ikke ændret af H2O2 (Fig. 4A)., Aktiviteten af caspase-3 varfundet at blive forøget i H2O2-behandlede Calu-6celler, mens caspase-8 ikke blev signifikant ændret (fig. 4B). Behandling med 50-100 µMH2O2 syntes at reducere Bcl-2, pro-caspase-3 og PARP proteinniveauer i A549 celler (fig. 4C). Specifikt viste 100 µMH2O2 et markant fald i niveauerneaf disse proteiner. Behandling med 75 µM H2O2significantly forøget aktivitet af caspase-3 i A549 celler andsignificantly øget aktivitet af caspase-8 (Fig. 4D).,

Caspase-hæmmere påvirker cellevækst og død i H2O2-behandlede lungekræftceller

efterfølgende forsøgte vi at dechiffrere rollen somindividuelle caspaser i H2O2-induceret celledød ved 24 timer i lungecarcinomcellelinjer. Calu-6 og A549 cellerblev præincuberet med 15 µM caspase inhibitor i 1 time førbehandling med 75 eller 100 µM H2O2. Ingen af de testede caspaseinhibitorer påvirkede væksthæmningen induceret af H2O2 i både Calu-6 og A549 cellelinjer(Fig. 5A og D)., Imidlertid reducerede alle thecaspaseinhibitorer testet i H2O2-behandlede Calu-6 procentdelene af sub-G1-celler til niveauet for kontrolcellerne (fig. 5B). Inaddition, behandling med alle de testede caspase inhibitorssignificantly reduceret antallet af Annexin V-FITC-farvede celler inH2O2-behandlet Calu-6 celler, men decreasedeffect var svagere sammenlignet med faldet i sub-G1-celler(Fig. 5C). Alle kaspasehibitorer reddede markant a549-celler frah2o2-fremmet celledød, vurderet afpopulationen af sub-G1-celler (fig.5E)., Endvidere reducerede disse inhibitorer signifikant antallet af Anne .in V-FITC-farvede celler inH2O2-behandlede A549-celler (fig. 5F). Hver caspaseinhibitor havde megetlignende anti-dødseffekter ih2o2-behandlede lungecancerceller.

Caspase-hæmmere påvirker MMP(Δmm) i H2O2-behandlede lungekræftceller

celledød er stærkt forbundet med sammenbruddet af MMP (22mm) (22).Således blev MMP (Δmm) i 75 eller 100 µMH2O2-behandlede lungekræftceller bestemtmed eller uden hver caspaseinhibitorer ved 24 timer., Imidlertid reducerede alle thecaspase-hæmmere ikke signifikant tabet af MMP(Δmm) i H2O2-behandlede Calu-6-celler (Fig. 6A). Desuden påvirkede de fleste af disse hæmmere ikke MMP-niveauet (Δmm) i H2O2-behandlede Calu-6-celler. Caspase-9 inhibitor (Leh-LEHD) syntes imidlertid at øge faldet i niveauet i disse celler (fig. 6B). i a549 celler forhindrede alle caspase-hæmmere delvist tab af MMP (Δmm) ved H2O2(Fig. 6C). InH2O2-behandlede a549-celler, caspase-9-hæmmerelektivt forbedrede faldet i MMP (Δmm)niveau (Fig. 6D)., Dette inhibitoralone reducerede signifikant MMP (Δmm) niveauer i Calu-6og a549 kontrolceller (Fig. 6 B og d).

Diskussion

lungekræft repræsenterer en af hovedårsagerne tilkræftrelateret dødelighed over hele verden og er relateret til den ondsindedeaktivitet af ROS. I den foreliggende undersøgelse blev e .ogenoush2o2 anvendt til generering af O .idative stresin lungecancerceller. Denne undersøgelse fokuserede på at definere molekyletmekanismer for cellevæksthæmning og celledød inH2O2-behandlede Calu-6 og A549 lungekræftceller., Baseret på MTT assays, efter 24-h eksponering, var deic50 værdier for H2O2 ~50 og 100 µM i Calu-6 og A549 celler, henholdsvis.Dosisafhængigt af H2O2 øgede antallet af døde og Anneksinfarvede Calu-6-og A549-celler, hvilket indikerede, at H2O2-induceret lungecancercelledød opstod gennem apoptose. Åbenbart faldt H2O2 niveauet af Bcl-2 og pro-caspase-3 i begge celletyper.PARP blev reduceret i de H2O2-behandlede a549celler. Desuden blev caspase-3 og -8 ‘ s aktiviteter øget i begge H2O2-behandlede celletyper.Apoptose er stærkt relateret til sammenbruddet af MMP(22mm) (22).,H2O2 udløste tab af MMP(ΔΨm) i Calu-6 og A549 celler i en dosis-dependentmanner, hvilket indikerer, at lungekræft celledød byH2O2 var tæt forbundet med sammenbrud ofMMP (ΔΨm). Hertil kommer, H2o2nedsat MMP (Δmm) niveau i lungecancercellerindeholder rhodamin 123 farvestof.

Selv om 50-100 µM H2O2significantly øget procenter af sub-G1 Calu-6 og A549cells, 250 eller 500 µM H2O2 ikke demonstratea lignende effekt, hvilket indikerer, at højere doser ofH2O2 faste disse lunge cancer celler i asimilar måde at ethanol eller methanol., Således syntes H2O2 at inducere lungekræftcelledød samtidigt via nekrose og apoptose, afhængigt af denskoncentration. I særdeleshed, 75 og 100 µMH2O2 syntes at i takt udløse bothapoptosis og nekrose i Calu-6 celler, da disse doser ofH2O2 ikke øge procenter ofsub-G1 celler sammenlignet med 50 µM H2O2-treatedcells, samt var der ingen ændring i niveauet af intactform af PARP protein. Det er nødvendigt at evaluere aktiviteten afden ekstracellulære lactat dehydrogenase i lungecancercelle, der er behandlet med 50 – 500 µM H2O2 tilpåvisning af nekrotisk celledød., Tidligere undersøgelser viste en roleof H2O2 i celle-cyklus fase anholdelse andprogression ved at justere cellecyklus-relaterede proteiner (23,24).I tråd med dette, behandling med 75 eller 100 µMH2O2 blandt de testede doser significantlyshowed en G1-fase anholdelse i Calu-6 og A549 celler. Således er g1phase-arrestationen sammen med induktion af celledød potentialemekanismen bag dæmpningen af cellevækst uponH2O2-behandling. H2O2 foretog imidlertid ingen specifikke faseanfald af cellecyklussen i HeLa-celler (20)., Disse resultater viste, at2o2-induceret o .idativ stress manifesterede sinvirkninger på cellecyklusprogression afhængigt af celletypen og2o2 dosis.

Caspase-hæmmere anvendes i dette forsøg mislykkedes dæmpe vækst hæmning inH2O2-behandlet Calu-6 og A549 kræft celler,der henviser til, at disse inhibitorer betydeligt preventedH2O2-induceret celledød i disse celler.Selvom H2O2 til en vis grad forstørretaktivitet af caspase-8 i begge lungecancerceller, caspase-8inhibitor signifikant svækket celledød udløst afh2o2., Således syntes en lille ændring iaktivitet af caspase-8 at have stærk indflydelse påpro-apoptotisk vej i H2O2-behandlede lungekræftceller. Disse resultater indikerede også, at begge mitokondrielle og celledødreceptorveje var gensidigt nødvendige for theentire induktion af apoptose i H2O2-behandlede lungecancerceller. Det ville være vigtigt at fastslå hvordanh2o2 påvirker celledødreceptorvejenat inducere apoptose i lungecancerceller. Med hensyn til MMP(ΔΨm) havde caspase-hæmmere ingen betydeligeffekt på tabet af MMP (inhmm) i2o2-behandlede Calu-6-og A549-celler., Desuden gendannede disse hæmmere ikke de nedsatte MMP-niveauer (Δmm) i H2O2-behandlede lungcancerceller. I stedet forbedrede caspase-9-inhibitoren sænkede niveauer i disse celler. Det er plausibelt, at tabet ofMMP (ΔΨm) efter behandling withH2O2 aktiveret forskellige caspases relaterede tomitochondrial og celledød receptor veje, consequentlyinducing apoptose, og aktivering af caspases byH2O2 kunne ikke positivt styrke MMP(ΔΨm) tab., Hertil kommer, at tabet af MMP(ΔΨm) induceret af H2O2 kan ikke beenough til helt at fremkalde apoptose i Calu-6 og A549 cellsunder downregulation af caspase aktivitet.

Som konklusion hæmmede H2O2VÆKSTEN af lungecancerceller gennem celledød og G1-fasearrest af cellecyklussen. Calu-6 og a549 celledød forårsaget afh2o2 skyldtes nekrose, såvel som ascaspaseafhængig apoptose (fig .7). De foreliggende resultater giver nyttige oplysninger om at forstå den cytotoksikologiske virkning af e .ogenoush2o2 på lungecancerceller med hensyn til cellevækst og død., Derudover kan nye strategier til behandling af lungekræft baseret på brug af H2O2 måske være nyttige til at reducere dødeligheden i forbindelse med dennemalignitet.

anerkendelser

Ikke relevant.

Finansiering

Den foreliggende undersøgelse blev støttet af tilskud fra nationale Research Foundation i Korea (NRF), der finansieres af Koreangovernment (MSIP; 2016R1A2B4007773) og støttes af ‘ResearchBase Konstruktion Støtte fra Fonden Program’ finansieret af Chonbuk NationalUniversity i 2018.,

tilgængelighed af data og materialer

alle data, der genereres eller analyseres under denne undersøgelse, er inkluderet i denne offentliggjorte artikel.

Forfatteres bidrag

WHP var den eneste bidragyder til den opfattelse anddesign, indsamling af data, analyse og fortolkning af data, og skrivning af manuskript. WHHP er ansvarlig for alle aspekter af arbejdet med at sikre, at spørgsmål vedrørende nøjagtigheden eller integriteten af en del af arbejdet undersøges og løses på passende vis.

etik godkendelse og samtykke tildeltagelse

Ikke relevant.,

patient samtykke til offentliggørelse

Ikke relevant.

konkurrerende interesser

forfatteren erklærer, at han ikke har nogen konkurrerende interesser.,-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromid

FITC

fluorescein phycoerythrin

PI

propidium iodid

	Gonzalez C, Sanz-Alfayate G, Agapito MT,Gomez-Barn, Rocher og Overvægtige På: Betydningen af ROS i oxygensensing i cellekulturer med følsomhed over for fysiologiske hypoxi.,Respir Physiol Neurobiol. 132:17–41. 2002. Se Artiklen : Google Scholar : PubMed/NCBI
	Baran CP, Zeigler MM, Tridandapani S andMarsh CB: Den rolle, ROS og RNS i, der regulerer liv og død ofblood monocytter. Curr Pharm Des. 10:855–866. 2004. Se Artiklen : Google Scholar : PubMed/NCBI
	Zorov DB, Juhaszova M og Sollott SJ:Mitokondrie-ROS-induceret ROS udgivelse: En opdatering og revision.Biochim Biophys Acta. 1757:509–517. 2006., Se Artiklen : Google Scholar : PubMed/NCBI
	Zelko I, Mariani TJ og Folz RJ:Superoxid dismutase multigene familie: En sammenligning af CuZn-SOD(SOD1), Mn-SOD (SOD2), og EF-SOD (SOD3) gen-strukturer,udvikling og udtryk. Gratis Radic Biol Medith. 33:337–349. 2002.Se Artiklen : Google Scholar : PubMed/NCBI
	Wilcox CS: Reaktiv ilt arter: Rolesin blodtryk og nyrefunktion. Curr Hypertens Rep. 4:160-166. 2002., Se Artiklen : Google Scholar : PubMed/NCBI
	Chen TJ, Jeng JY, Lin CW, Wu CY og ChenYC: Quercetin hæmning af ROS-afhængige og -independentapoptosis i rotte gliom C6 celler. Toksikologi. 223:113–126. 2006.,Se Artiklen : Google Scholar : PubMed/NCBI
	Dasmahapatra G, Rahmani M, Bule P andGrant S: tyrphostin adaphostin interagerer synergistisk withproteasome hæmmere at fremkalde apoptose i menneskelige leukæmi cellsthrough en reaktiv ilt arter (ROS)-afhængige mekanisme. Blod.107:232–240. 2006., Se Artiklen : Google Scholar : PubMed/NCBI
	Wallach-Dayan SB, Izbicki G, Cohen PY,Gerstl-Golan-R, Fint og Breuer R: Bleomycin indleder apoptosisof lunge epithelceller af ROS, men ikke af Fas/FasL vej. Am Jphysiol Lungecelle Mol Physiol. 290:L790–L796. 2006. Se Artiklen : Google Scholar : PubMed/NCBI
	Sarsour EH, Kumar MG, Chaudhuri L, KalenAL og Goswami PC: Redox kontrol af cellecyklus i sundhed anddisease., Antioxid Redox Signal. 11:2985–3011. 2009. View Article : Google Scholar : PubMed/NCBI
	Budihardjo I, Oliver H, Lutter M, Luo Xand Wang X: Biochemical pathways of caspase activation duringapoptosis. Annu Rev Cell Dev Biol. 15:269–290. 1999. View Article : Google Scholar : PubMed/NCBI
	Mehmet H: Caspases find a new place tohide. Nature. 403:29–30. 2000., ViewArticle : Google Scholar : PubMed/NCBI
	Hengartner MO: biokemi ofapoptosis. Natur. 407:770–776. 2000. Se Artiklen : Google Scholar : PubMed/NCBI
	Hinz B, Phan SH, Thannickal VJ, PrunottoM, Desmoulière En, Varga J, De Wever O, Mareel M og Gabbiani G:den Seneste udvikling i myofibroblast biologi: Paradigmer forconnective væv remodeling. Am J Pathol. 180:1340–1355.,Se Artiklen : Google Scholar : PubMed/NCBI
	Rhee SG, Kang SW, Jeong W, Chang TS, YangKS og Bejle til HA: Intracellulær messenger funktion af hydrogenperoxide og dens regulering af peroxiredoxins. Curr Opin Cell Biol.17:183–189. 2005. Se Artiklen : Google Scholar : PubMed/NCBI
	Vilhardt F og van Deurs B: phagocyteNADPH oxidase afhænger af kolesterol-beriget membran microdomainsfor forsamling. EMBO J. 23:739-748. 2004., Se Artiklen : Google Scholar : PubMed/NCBI
	Park WH: virkningerne af eksogene H2O2 oncell død, reaktive ilt arter og glutathion niveauer i calfpulmonary arterie og menneskelige umbilical venen endothelial celler. Int JMol Med. 31:471–476. 2013. Se Artiklen : Google Scholar : PubMed/NCBI
	Park WH: Eksogene H2O2 inducerer growthinhibition og celledød af menneskelige pulmonal arterie glat musclecells via glutathion udtynding., Mol Med Rep. 14:936-942. 2016.Se Artiklen : Google Scholar : PubMed/NCBI
	Han YH, Kim SZ, Kim SH og Park WH:Pyrogallol hæmmer væksten af lungekræft Calu-6 celler viacaspase afhængige af apoptose. Chem Biol Interagerer. 177:107–114. 2009.,Se Artiklen : Google Scholar : PubMed/NCBI
	Park WH, Seol JG, Kim ES, Hyun JM, JungCW, Lee CC, Kim BK og Lee YY: Arsen trioxid-medieret growthinhibition i MC/BIL myelomatose celler via cellecyklus arrest inassociation med induktion af cyclin-dependent kinase inhibitor,p21, og apoptose. 60: 3065-3071. 2000.,PubMed/NCBI
	Park WH: Anti-apoptotic effekt af caspaseinhibitors på H2O2-behandlet HeLa celler gennem tidlig bekæmpelse ofits oxidativ stress. Oncol Rep. 31:2413-2421. 2014. Se Artiklen : Google Scholar : PubMed/NCBI
	Du BR, Kim SH og Park WH: Reactiveoxygen arter, glutathion, og thioredoxin indflydelse suberoylbishydroxamic syre-induceret apoptose i A549 lunge cancer cells.Tumor Biol. 36:3429–3439. 2015., Se Artiklen : Google Scholar : PubMed/NCBI
	Yang J, Liu X, Bhalla K, Kim CN, IbradoAM, Cai J, Peng TI, Jones DP og Wang X: Forebyggelse af apoptose byBcl-2: Frigivelse af cytochrom c fra mitokondrierne blokeret. Videnskab.275:1129–1132. 1997. Se Artiklen : Google Scholar : PubMed/NCBI
	Han YH, Kim SH, Kim SZ og Park WH:Antimycin En som mitokondrierne skader agens inducerer en S phasearrest af celle-cyklus i HeLa celler. Life Sci., 83:346–355. 2008.Se Artiklen : Google Scholar : PubMed/NCBI
	Han YH, Kim SZ, Kim SH og Park WH:Pyrogallol hæmmer væksten af humane lunge cancer Calu-6 cellsvia arrestere cellecyklus arrest. Toxicol In Vitro.22:1605–1609. 2008. Se Artiklen : Google Scholar : PubMed/NCBI