PAGE Gel (Dansk)

PAGE Gel Kemiske stoffer for Protein Adskillelse

TGX (Tris/Glycin-forlængede) PAGE Geler er baseret på en modifikation af den Laemmli system. Disse geler muliggør meget hurtige køretider uden forvrængning og har en længere holdbarhed end standard Laemmli-geler, hvilket bevarer deres ydeevne og reproducerbarhed i op til et år. Denne nye SDS-side gelkemi bruger de samme prøveseparationsprofiler som Laemmli-geler og de samme prøve-og løbebuffere., Præfabrikerede TG. – geler Fås i en række procentdele, inklusive gradientgeler, med forskellige brøndkonfigurationer og volumener i både mini-og midi-størrelser.tg.pletfri SIDEGELER er en nylig innovation, der giver mulighed for at udføre kvalitetskontrol efter både elektroforese og blotting eller ved lokalisering af bånd til spotskæring., Med plet-fri teknologi, en SIDE gel kan visualiseres umiddelbart efter elektroforese for at bekræfte, at prøve lastning er i den rigtige udvalg og køre kvalitet er tilfredsstillende med nogen artefakter så som at smile eller lodrette striber; bands kan blive identificeret og fjernet for yderligere analyser, såsom massespektrometri. Efter blotting overførsel kan blots øjeblikkeligt visualiseres for at vurdere effektiviteten af overførslen og kvaliteten af blot.

muligheden for direkte at se kvaliteten af en SIDEGEL og en blot inden videre behandling sparer tid og ressourcer., Precast TG.og TG. pletfri geler er tilgængelige i samme brede vifte af procenter og godt konfigurationer i mini og midi-formater.

Tris-HCl-og Tri-acetat PAGE geler er formuleret uden SDS. Dette giver fleksibiliteten ved at anvende en enkelt type gel til enten adskillelse af native eller SDS-denaturerede proteiner. Tilstedeværelse af SDS i prøven og kørende buffer skaber denatureringsbetingelser med adskillelse sammenlignelig med Laemmli SDS-side geler., Proteiner adskilt i fravær af SDS (og normalt også reduktionsmiddel) anvendes i protokoller, hvor proteiner skal forblive i en native konfiguration. Migrationsmønstre under indfødte forhold adskiller sig fra dem i denaturerende geler, og molekylvægt kan ikke bestemmes med nøjagtighed.

Bis-Tris side geler kan også anvendes til adskillelse af enten native eller denaturerede proteiner. Dette sidegelsystem har et diskontinuerligt buffersystem som Laemmli, men køres med en lavere pH. enten MES eller MOPS kører buffere kan bruges med Bis-Tris geler., MOPS-buffer foretrækkes normalt for mellemstore proteiner, mens MES bruges til mindre proteiner. På grund af den lavere pH har Bis-Tris geler en længere holdbarhed end standard Laemmli geler.

Tris / tricine side geler er formuleret til at adskille proteiner og peptider med molekylvægte på 10 kDa og derunder. Den langsommere mobilitet af proteiner i Tris/tricine geler end i Tris/glycine geler resulterer i bedre adskillelse af lavmolekylære polypeptider væk fra SDS miceller, der løber tæt på migrationsfronten.,

specialiserede Sidegeler til proteinanalyse

IEF-sidegeler bruges til at adskille proteiner efter ladning. I en pH-gradient migrerer proteiner, indtil de ikke har nogen nettoladning-når pH er lig med det isoelektriske punkt (pI) af proteinet. En IEF-sidegel kan bruges til at adskille native proteiner eller proteiner med ladede post-translationelle modifikationer (såsom phosphorylering). Præfabrikerede geler fås med både brede og smalle ph-gradienter., Derudover, for prøver, der er blevet elektroforeret i immobiliseret pH-gradient (IPG) strimler til 2-D elektroforese, mini og midi præfabrikerede geler er tilgængelige med brønde, der rumme strimlerne for den anden dimension elektroforese.

gymogram side geler registrerer proteiner, der har proteaser, der kan bruge gelatine eller kasein som substrat. Proteiner adskilles på gelerne under denaturerende, ikke-reducerende betingelser. Efter elektroforese inkuberes SIDEGELEN i bufferymogram renering buffer., Efter renaturering af proteinerne inkuberes gelen derefter i developmentymogramudviklingsbuffer indeholdende en kation-cofaktor, der kræves til proteaseaktivitet. Proteaser er normalt identificeret som klare bånd (hvor kasein eller gelatine er blevet proteolysed) på en blå baggrund efter Coomassie farvning.

side gel Kemi til Nukleinsyreseparation

TBE side geler er nondenerende geler til adskillelse af nukleinsyrer. TBE-geler bruges til dsDNA-analyse, til at vurdere renheden af PCR-produkter og til RNase-beskyttelsesassays., Nukleinsyrer fra 50 til 2.000 bp til adskilles effektivt på TBE-geler. Bio-Rad har en række præfabrikerede TBE-geler i mini-og midi-størrelser.

TBE-urea side geler bruges til både RNA og ssDNA. En denaturering side gel anvendes til bestemmelse af oligonukleotid renhed, northern blotting og RNase beskyttelse assays. TBE-urea geler giver skarpe, stramme bånd med et optimalt størrelsesområde op til 200 bp. Præfabrikerede geler Fås i mini-og midi-formater.,