PAGE GEL Chemistries for Protein Separation
Los Geles de PAGE TGX (tris/Glycine eXtended) se basan en una modificación del sistema Laemmli. Estos geles permiten tiempos de funcionamiento muy rápidos sin distorsión y tienen una vida útil más larga que los geles Laemmli estándar, conservando su rendimiento y reproducibilidad hasta por un año. Esta novedosa química de gel SDS-PAGE utiliza los mismos perfiles de separación de muestras que los geles Laemmli y los mismos tampones de muestra y ejecución., Los geles TGX prefabricados están disponibles en una gama de porcentajes, incluidos los geles degradados, con diferentes configuraciones de pozos y volúmenes en tamaños mini y midi.
los geles de página sin manchas TGX son una innovación reciente que proporciona la capacidad de hacer control de calidad después de la electroforesis y el blotting o al ubicar bandas para el corte por puntos., Con la tecnología sin manchas, se puede visualizar un gel de Página inmediatamente después de la electroforesis para confirmar que la carga de la muestra está en el rango correcto y la calidad de ejecución es satisfactoria sin artefactos como sonrisas o rayas verticales; las bandas se pueden identificar y extirpar para un análisis posterior, como la espectrometría de masas. Después de la transferencia de Blot, los blots se pueden visualizar instantáneamente para evaluar la eficiencia de la transferencia y la calidad del blot.
la capacidad de ver directamente la calidad de un gel de Página y un blot antes de procesarlo ahorra tiempo y recursos., Los geles prefabricados TGX y TGX Stain-Free están disponibles en la misma amplia gama de porcentajes y configuraciones de pocillos en formatos mini y midi.
Tris-HCl y Tris-acetato de PÁGINA geles están formulados sin SDS. Esto da la flexibilidad de usar un solo tipo de gel para la separación de proteínas nativas o desnaturalizadas SDS. La presencia de SDS en la muestra y el búfer en ejecución crean condiciones de desnaturalización con una separación comparable a los geles de página SDS de Laemmli., Las proteínas separadas en ausencia de SDS (y generalmente también agente reductor) se utilizan en protocolos donde las proteínas necesitan permanecer en una configuración nativa. Los patrones de migración en condiciones nativas difieren de los de los geles desnaturalizantes, y el peso molecular no se puede determinar con precisión.
Los geles Bis-Tris PAGE también se pueden utilizar para la separación de proteínas nativas o desnaturalizadas. Este sistema de gel de página tiene un sistema de búfer discontinuo como Laemmli, pero se ejecuta a un pH más bajo., El tampón MOPS se prefiere generalmente para proteínas de tamaño mediano, mientras que el MES se usa para proteínas más pequeñas. Debido al pH más bajo, los geles Bis-Tris tienen una vida útil más larga que los geles Laemmli estándar.
Los geles Tris / tricine PAGE están formulados para separar proteínas y péptidos con pesos moleculares de 10 kDa o inferiores. La movilidad más lenta de las proteínas en los geles Tris/tricine que en los geles tris/glycine resulta en una mejor separación de los polipéptidos de bajo peso molecular lejos de las micelas SDS que corren cerca del frente de migración.,
geles de página especializados para el análisis de proteínas
Los geles de página IEF se utilizan para separar proteínas por carga. En un gradiente de pH, las proteínas migran hasta que no tienen carga neta, cuando el pH es igual al punto isoeléctrico (pI) de la proteína. Un gel de la página de IEF se puede utilizar para separar las proteínas nativas o las proteínas con modificaciones post-traduccionales cargadas (tales como fosforilación). Los geles prefabricados están disponibles con gradientes de pH anchos y estrechos., Además, para las muestras que han sido electroforizadas en tiras de gradiente de pH inmovilizado (IPG) para electroforesis 2-D, los geles prefabricados mini y midi están disponibles con pocillos que acomodan las tiras para la electroforesis de segunda dimensión.
Los geles de Zymogram PAGE detectan proteínas que tienen proteasas que pueden usar gelatina o caseína como sustrato. Las proteínas se separan en los geles bajo condiciones de desnaturalización y no Reducción. Después de la electroforesis, el gel de la página se incuba en el almacenador intermediario de renaturing del zymogram., Después de la renaturalización de las proteínas, el gel se incuba en un tampón de desarrollo de zymogram que contiene un cofactor catiónico necesario para la actividad de la proteasa. Las proteasas se identifican generalmente como bandas claras (donde la caseína o gelatina ha sido proteolizada) sobre un fondo azul después de la tinción de Coomassie.
PAGE GEL Chemistries for Nucleic Acid Separation
TBE PAGE gels are nondenaturing gels for the separation of nucleic acids. Los geles de TBE se utilizan para el análisis de dsDNA, para evaluar la pureza de los productos PCR y para ensayos de protección de la RNasa., Los ácidos nucleicos de 50 a 2.000 PB se separan eficientemente en geles TBE. Bio-Rad tiene una gama de geles TBE prefabricados en tamaños mini y midi.
Los geles de TBE-Urea PAGE se utilizan tanto para ARN como para ssDNA. Un gel de página desnaturalizante se utiliza para la determinación de la pureza del oligonucleótido, el Northern blotting y los ensayos de protección de la RNasa. Los geles TBE-urea proporcionan bandas afiladas y apretadas con un rango de tamaño óptimo de hasta 200 PB. Los geles prefabricados están disponibles en formatos mini y midi.,
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