Sist Oppdatert februar 4, 2021 av Sagar Aryal
MacConkey-agar var den første fast differensial media til å være formulert som ble utviklet i det 20. århundre av Alfred Theodore MacConkey. MacConkey-Agar er den tidligste selektiv og differensiert medium for dyrking av koliforme organismer., Det er brukt til isolasjon og differensiering av ikke-selektiv gram-negative staver, særlig medlemmer av familien Enterobacteriaceae og slekten Pseudomonas.,20c3eca»>
| Ingredients | Amount |
| Peptone (Pancreatic digest of gelatin) | 17 gm |
| Proteose peptone (meat and casein) | 3 gm |
| Lactose monohydrate | 10 gm |
| Bile salts | 1.,5 gm |
| Sodium chloride | 5 gm |
| Neutral red | 0.03 gm |
| Crystal Violet | 0.001 gm |
| Agar | 13.,5 gm |
Prinsippet om MacConkey-Agar
Bukspyttkjertelen sammendrag av gelatin og peptones (kjøtt og kasein) gir viktige næringsstoffer, vitaminer og nitrogenholdige faktorer som er nødvendig for vekst av mikroorganismer. Laktose monohydrat er gjæringsdyktig kilde til karbohydrater. Selektiv virkningen av dette mediet er knyttet til crystal violet og galle salter, som er hemmende for de fleste arter av gram-positive bakterier. Natriumklorid opprettholder den osmotiske balansen i mediet.,
Laktose gjæring stammer vokse som rød eller rosa. Den røde fargen er på grunn av produksjonen av syre fra laktose, absorpsjon av nøytrale rød og en påfølgende farge endring av farge når pH i mediet faller under 6.8. Ikke-laktose gjæring bakterier som for eksempel Salmonella, Proteus, Pseudomonas aeruginosa og Shigella ikke kan utnytte laktose, og vil bruke peptone i stedet. Dette danner ammoniakk, som hever pH i agar, og fører til dannelse av hvite eller fargeløs kolonier dannet i plate og agar rundt bakterier er fortsatt relativt gjennomsiktig., Disse koloniene kan også se gylden brun med mørke sentre.
Laktose kan byttes i medium med andre sukkerarter og utskifting sukker kan brukes til å teste evner av gram-negative bakterier å gjære erstatning sukker. For eksempel, sorbitol kan brukes som en erstatning for sukker i MacConkey-agar for å bistå i isolasjon og differensiering av enteropathogenic E. coli serotypes slik som E. coli O157:H7 med tilstedeværelsen av hvit sirkulær kolonier som er ikke-sorbitol gjæring.,
Utarbeidelse av MacConkey-Agar
- Suspender 49.53 gram av dehydrert medium i 1000 ml destillert vann.
- Varme til koking for å oppløse middels helt.
- Sterilisere av autoclaving på 15 kg trykk (121°C) i 15 minutter.
- Kult til 45°C -50°C.
- Bland godt før du heller i sterilt Petri plater.,a3c»>
Proteus
Uses of MacConkey Agar
- MacConkey agar is used for the isolation of gram-negative enteric bacteria.,
- Det er brukt i den differensiering av laktose gjæring fra laktose ikke-gjæring gram-negative bakterier.
- Det er bruk i mikrobiologisk undersøkelse av mat stuffs og for direkte plating / grader av vann-prøver for koliforme teller.
- Det er brukt til undersøkelse av melk og meieriprodukter.
- Britiske farmakopé har anbefalt dette medium for subkultur og identifisering av Escherichia coli.,
Begrensninger av MacConkey-Agar
- Den koloniale egenskaper beskrive gi presumptive identifikasjon bare av den isolerte organismer. Det er nødvendig å subkultur og kanduforetafølgende andre bekreftelse tester som biokjemiske tester for endelig identifikasjon.
- Noen varianter kan være oppstått som vokser dårlig, eller ikke klarer å vokse på dette mediet.
- Inkubering av MacConkey-Agar plater under økt CO2 har blitt rapportert å redusere vekst og gjenvinning av en rekke stammer av Gram-negative staver.,
- Noen stammer av Proteus kan sverm på dette mediet.