Biology Educational Videos
laatst bijgewerkt op 4 februari 2021 door Sagar Aryal
MacConkey agar was de eerste stevige differentiële media die werd geformuleerd en werd ontwikkeld in de 20e eeuw door Alfred Theodore MacConkey. MacConkey Agar is het vroegste selectieve en differentiële medium voor de teelt van coliforme organismen., Het wordt gebruikt voor de isolatie en differentiatie van niet-veeleisende gram-negatieve staafjes, in het bijzonder leden van de familie Enterobacteriaceae en het geslacht Pseudomonas.,20c3eca”>
| Ingredients |
Amount |
| Peptone (Pancreatic digest of gelatin) |
17 gm |
| Proteose peptone (meat and casein) |
3 gm |
| Lactose monohydrate |
10 gm |
| Bile salts |
1.,5 gm |
| Sodium chloride |
5 gm |
| Neutral red |
0.03 gm |
| Crystal Violet |
0.001 gm |
| Agar |
13.,5 gm |
principe van MacConkey-Agar
Pancreasdigest van gelatine en peptonen (vlees en caseïne) leveren de essentiële voedingsstoffen, vitaminen en stikstofhoudende factoren die nodig zijn voor de groei van micro-organismen. Lactosemonohydraat is de fermenteerbare bron van koolhydraten. De selectieve werking van dit medium wordt toegeschreven aan kristalviolet en galzouten, die remmend zijn voor de meeste soorten gram-positieve bacteriën. Natriumchloride handhaaft de osmotische balans in het medium.,
Lactose fermenterende stammen groeien als rood of roze. De rode kleur is het gevolg van de productie van zuur uit lactose, absorptie van neutraal rood en een daaropvolgende kleurverandering van de kleurstof wanneer de pH van het medium lager is dan 6,8. Niet-lactose fermenterende bacteriën zoals Salmonella, Proteus, Pseudomonas aeruginosa en Shigella kunnen geen lactose gebruiken, en zullen in plaats daarvan pepton gebruiken. Dit vormt ammoniak, die de pH van de agar verhoogt, en leidt tot de vorming van witte of kleurloze kolonies gevormd in de plaat en de agar rond de bacteriën blijft relatief transparant., Deze kolonies kunnen er ook goudbruin tot bruin uitzien met donkere centra.
Lactose kan in het medium worden vervangen door andere suikers en de vervangende suikers kunnen worden gebruikt om te testen of gramnegatieve bacteriën de vervangende suikers kunnen fermenteren. Sorbitol kan bijvoorbeeld worden gebruikt als vervangende suiker in MacConkey-agar om te helpen bij de isolatie en differentiatie van enteropathogene E. coli-serotypen zoals E. coli O157:H7 door de aanwezigheid van witte cirkelvormige kolonies die niet-sorbitol fermenteren.,
bereiding van MacConkey-Agar
- suspensie 49,53 g gedehydrateerd medium in 1000 ml gedestilleerd water.
- verhit tot koken om het medium volledig op te lossen.
- steriliseren door gedurende 15 minuten bij een druk van 15 lbs (121°C) te autoclaveren.
- afkoelen tot 45 ° C -50 ° C.
- goed mengen alvorens in steriele Petrischalen te gieten.,a3c”>
Proteus
Colorless colonies, swarming growth |
| Salmonella, Shigella |
Colorless colonies, or sometime medium color: orange to amber |
| Pseudomonas |
Irregular, colorless to pink colonies |
Uses of MacConkey Agar
- MacConkey agar is used for the isolation of gram-negative enteric bacteria.,
- het wordt gebruikt in de differentiatie van lactose fermenteren uit lactose niet-fermenterende gramnegatieve bacteriën.
- Het wordt gebruikt bij microbiologisch onderzoek van levensmiddelen en voor directe beplating / inoculatie van watermonsters voor coliforme tellingen.
- Het wordt gebruikt voor het onderzoek van melk en zuivelproducten.de Britse farmacopee heeft dit medium aanbevolen voor de subcultuur en identificatie van Escherichia coli.,
beperkingen van MacConkey-Agar
- De beschreven koloniale kenmerken geven alleen een vermoedelijke identificatie van de geïsoleerde organismen. Het is noodzakelijk om andere bevestigingstests zoals biochemische tests voor definitieve identificatie te subculturen en uit te voeren.
- sommige stammen kunnen worden aangetroffen die slecht groeien of niet groeien op dit medium.
- incubatie van MacConkey-agarplaten onder verhoogd CO2 zou de groei en het herstel van een aantal gramnegatieve bacillenstammen verminderen.,
- sommige stammen van Proteus kunnen op dit medium zwermen.