PAGE Gel (Deutsch)

PAGE Gelchemikalien zur Proteintrennung

TGX (Tris/Glycin eXtended) PAGE Gele basieren auf einer Modifikation des Laemmli-Systems. Diese Gele ermöglichen sehr schnelle Laufzeiten ohne Verzerrung und haben eine längere Haltbarkeit als Standard-Laemmli-Gele, wobei ihre Leistung und Reproduzierbarkeit bis zu einem Jahr erhalten bleiben. Diese neuartige SDS-PAGE-Gelchemie verwendet die gleichen Probentrennprofile wie Laemmli-Gele und die gleichen Proben-und Laufpuffer., Vorgefertigte TGX-Gele sind in einer Reihe von Prozentsätzen erhältlich, einschließlich Gradientengelen, mit unterschiedlichen Bohrlochkonfigurationen und-volumina in Mini-und Midi-Größen.

TGX Fleckenfreie PAGE-Gele sind eine neuere Innovation, die die Möglichkeit bietet, die Qualitätskontrolle sowohl nach Elektrophorese als auch nach Blotting oder beim Lokalisieren von Bändern zum Punktschneiden durchzuführen., Mit der fleckenfreien Technologie kann ein PAGE-Gel unmittelbar nach der Elektrophorese visualisiert werden, um zu bestätigen, dass die Probenbeladung im richtigen Bereich liegt und die Laufqualität ohne Artefakte wie horizontale oder vertikale Streifen zufriedenstellend ist; Bänder können für weitere Analysen wie Massenspektrometrie identifiziert und ausgeschnitten werden. Nach dem Blotting Transfer können Blots sofort visualisiert werden, um die Effizienz der Übertragung und die Qualität des Blot zu beurteilen.

Die Möglichkeit, die Qualität einer SEITE und eines Blot vor der weiteren Verarbeitung direkt anzuzeigen, spart Zeit und Ressourcen., Precast TGX und TGX Fleckenfreie Gele sind in der gleichen breiten Palette von Prozentsätzen und Well-Konfigurationen in Mini-und MIDI-Formaten erhältlich.

Tris-HCl, Tris-Acetat-PAGE Gele sind formuliert ohne SDS. Dies gibt die Flexibilität, einen einzelnen Geltyp entweder für die Trennung von nativen oder SDS-denaturierten Proteinen zu verwenden. Das Vorhandensein von SDS in der Probe und im laufenden Puffer schafft Denaturierungsbedingungen mit einer Trennung, die mit Laemmli SDS-PAGE-Gelen vergleichbar ist., Proteine, die in Abwesenheit von SDS (und normalerweise auch Reduktionsmittel) getrennt sind, werden in Protokollen verwendet, in denen Proteine in einer nativen Konfiguration verbleiben müssen. Migrationsmuster unter nativen Bedingungen unterscheiden sich von denen in denaturierenden Gelen, und das Molekulargewicht kann nicht genau bestimmt werden.

Bis-Tris PAGE Gele können auch zur Trennung von nativen oder denaturierten Proteinen verwendet werden. Dieses PAGE-Gel-System hat ein diskontinuierliches Puffersystem wie Laemmli, wird jedoch mit einem niedrigeren pH-Wert betrieben.MES-oder MOPS-Laufpuffer können mit Bis-Tris-Gelen verwendet werden., MOPS-Puffer wird normalerweise für mittelgroße Proteine bevorzugt, während MES für kleinere Proteine verwendet wird. Aufgrund des niedrigeren pH-Werts haben Bis-Tris-Gele eine längere Haltbarkeit als Standard-Laemmli-Gele.

Tris / tricine PAGE Gele werden formuliert, um Proteine und Peptide mit Molekulargewichten von 10 kDa und darunter zu trennen. Die langsamere Mobilität von Proteinen in Tris/Tricin-Gelen als in Tris/Glycin-Gelen führt zu einer besseren Trennung von niedermolekularen Polypeptiden von SDS-Mizellen, die nahe der Migrationsfront verlaufen.,

Spezialisierte PAGE-Gele für die Proteinanalyse

IEF PAGE-Gele werden verwendet, um Proteine nach Ladung zu trennen. In einem pH-Gradienten wandern Proteine, bis sie keine Nettoladung haben-wenn der pH-Wert dem isoelektrischen Punkt (pI) des Proteins entspricht. Ein IEF-PAGE-Gel kann verwendet werden, um native Proteine oder Proteine mit geladenen posttranslationalen Modifikationen (wie Phosphorylierung) zu trennen. Fertiggele sind sowohl mit breiten als auch mit schmalen pH-Gradienten erhältlich., Zusätzlich sind für Proben, die in immobilisierten pH-Gradienten (IPG)-Streifen (2-D-Elektrophorese) elektrophoressiert wurden, Mini-und Midi-Fertiggele mit Vertiefungen erhältlich, die die Streifen für die Elektrophorese der zweiten Dimension aufnehmen.

Zymogramm-PAGE-Gele erkennen Proteine mit Proteasen, die Gelatine oder Kasein als Substrat verwenden können. Proteine werden auf den Gelen unter denaturierenden, nicht reduzierenden Bedingungen getrennt. Nach der Elektrophorese wird das PAGE-Gel in Zymogramm-Renaturierungspuffer inkubiert., Nach der Renaturierung der Proteine wird das Gel dann in einem Zymogramm-Entwicklungspuffer inkubiert, der einen Kationskofaktor enthält, der für die Proteaseaktivität erforderlich ist. Proteasen werden normalerweise als klare Banden (wo das Casein oder die Gelatine proteolysiert wurde) auf einem blauen Hintergrund nach der Coomassie-Färbung identifiziert.

PAGE Gelchemikalien zur Nukleinsäuretrennung

TBE PAGE Gele sind nichtdenaturierende Gele zur Trennung von Nukleinsäuren. TBE-Gele werden zur dsDNA-Analyse, zur Beurteilung der Reinheit von PCR-Produkten und für RNase-Schutz-Assays verwendet., Nukleinsäuren von 50 bis 2.000 bp bis werden auf TBE-Gelen effizient abgetrennt. Bio-Rad verfügt über eine Reihe von vorgefertigten TBE-Gelen in Mini-und Midi-Größen.

TBE-urea PAGE Gele werden sowohl für RNA als auch für ssDNA verwendet. Ein denaturierendes PAGE-Gel wird zur Bestimmung der Oligonukleotidreinheit, Northern Blotting und RNase Protection Assays verwendet. TBE-Harnstoffgele geben scharfe, enge Bänder mit einem optimalen Größenbereich von bis zu 200 bp. Precast Gele sind in Mini-und Midi-Formaten erhältlich.,