Senast Uppdaterad den 4 februari 2021 med Sagar Aryal
MacConkey-agar var den första solid differential media att formuleras som har utvecklats på 20-talet av Alfred Teodor MacConkey. MacConkey Agar är det tidigaste selektiva och differentiella mediet för odling av koliforma organismer., Det används för isolering och differentiering av icke-kräsna gramnegativa stavar, särskilt medlemmar av familjen Enterobacteriaceae och släktet Pseudomonas.,20c3eca”>
| Ingredients | Amount |
| Peptone (Pancreatic digest of gelatin) | 17 gm |
| Proteose peptone (meat and casein) | 3 gm |
| Lactose monohydrate | 10 gm |
| Bile salts | 1.,5 gm |
| Sodium chloride | 5 gm |
| Neutral red | 0.03 gm |
| Crystal Violet | 0.001 gm |
| Agar | 13.,5 gm |
principen om MacConkey Agar
pankreatisk smältning av gelatin och peptoner (kött och kasein) ger de väsentliga näringsämnen, vitaminer och kvävefaktorer som krävs för tillväxt av mikroorganismer. Laktosmonohydrat är den fermenterbara källan till kolhydrater. Den selektiva verkan av detta medium hänför sig till kristallviolett och gallsalter, vilka är hämmande för de flesta arter av gram-positiva bakterier. Natriumklorid upprätthåller den osmotiska balansen i mediet.,
Laktosfermenterande stammar växer som röda eller rosa. Den röda färgen beror på produktion av syra från laktos, absorption av neutralt rött och en efterföljande färgförändring av färgämnet när mediets pH sjunker under 6, 8. Icke-laktos fermenterande bakterier som Salmonella, Proteus, Pseudomonas aeruginosa och Shigella kan inte använda laktos, och kommer att använda pepton istället. Detta bildar ammoniak, vilket höjer agarns pH, och leder till bildandet av vita eller färglösa kolonier bildade i plattan och agar som omger bakterierna förblir relativt transparenta., Dessa kolonier kan också se Gyllene till bruna med mörka centra.
laktos kan i mediet ersättas med andra sockerarter och ersättningssocker kan användas för att testa förmågan hos gramnegativa bakterier att jäsa ersättningssocker. Sorbitol kan till exempel användas som ersättningssocker i MacConkey agar för att hjälpa till vid isolering och differentiering av enteropatogena E. coli-serotyper som E. coli O157:H7 genom närvaron av vita cirkulära kolonier som inte sorbitol fermenterar.,
beredning av MacConkey Agar
- suspendera 49,53 gram dehydratiserat medium i 1000 ml destillerat vatten.
- värm till kokning för att lösa mediet helt.
- sterilisera genom autoklavering vid 15 lbs tryck (121°C) i 15 minuter.
- kyl till 45°C -50°C.
- blanda väl innan du häller i sterila Petriplattor.,a3c”>
Proteus
Uses of MacConkey Agar
- MacConkey agar is used for the isolation of gram-negative enteric bacteria.,
- Det används vid differentiering av laktos fermentering från laktos icke-fermenterande gramnegativa bakterier.
- Det används vid mikrobiologisk undersökning av livsmedel och för direkt plätering / ympning av vattenprover för koliformantal.
- Det används för undersökning av mjölk och mejeriprodukter.
- British pharmacopoeia har rekommenderat detta medium för subkultur och identifiering av Escherichia coli.,
begränsningar av MacConkey Agar
- de koloniala egenskaperna beskriver ger presumptiv identifiering endast av de isolerade organismerna. Det är nödvändigt att subkultur och genomföra andra bekräftelsetester som biokemiska tester för slutlig identifiering.
- vissa stammar kan uppstå som växer dåligt eller misslyckas med att växa på detta medium.
- inkubation av MacConkey Agar plattor under ökad CO2 har rapporterats för att minska tillväxt och återhämtning av ett antal stammar av gramnegativa baciller.,
- vissa stammar av Proteus kan svärma på detta medium.