Nematomorpha je kmen zvířat, který byl špatně studován. Navzdory jejich celosvětové distribuci nebyly podrobné životní cykly Nematomorfy zcela zdokumentovány . Parachordody nebo Gordius červy patří do kmene Nematomorpha (Gordiida, Gordioidea)., Dospělé Parachordodes (Chordodidae: Parachordodinae), Gordius (Gordiidae), nebo rodů podčeledi Chordodinae (Chordodidae), také obyčejně známý jako vlasy červy, jsou volně žijící sladkovodní obyvatel, a jejich larvy jsou nejprve volně žijící a pak infikovat mezihostitele. Když jsou mezilehlí hostitelé jedeni konečnými hostiteli, larvy se vyvíjejí na mladistvé a rostou na dospělou velikost. Kaudální konec samce je buď rozštěpené, nebo má dorsoventral drážky v Gordiidae a Parachordodinae, ale ne v Chordodinae., Parachordodes nebo Gordius červi mají parazitární larvální stádia, a konečné hostitelů patří kudlanka a některé masožravé nebo všežravé druhy Orthoptera (Acrididae: kobylky, Gryllidae: cvrčky, atd.) a Coleoptera (Carabidae: brouci).
Záznamy o lidských náhodného parazitismu s Parachordodes, Paragordius, nebo Gordius jsou méně časté v literatuře, i když mnohé byly identifikovány v různých částech světa ze vzorků získána zpět z úst, močové trubice a konečníku . Šest lidských případů Gordia sp. byly hlášeny v Japonsku ., V těchto případech byly červy zvraceny a vylučovány do výkalů a konečníku. Lidské případě Gordius worm nalézt v zvratky a další případ Parachordodes worm našli v močovém systému byly hlášeny také v Koreji . Kromě toho bylo v Japonsku dosud zaznamenáno nejméně 13 druhů sladkovodních Nematomorphů . Navíc, některé nebo nové záznamy Nematomorpha u hmyzu byly nedávno hlášeny z Shiga, Niigata, Nara, prefektura Gifu, Kjóto a Fukuoka Prefektury, Japonsko , a molekulární a morfologické údaje byly použity k analýze systematický vztah Nematomorpha ., Z rodu Parachordodes byly v Japonsku hlášeny 2 druhy: Parachordody okadai a P .lestici.
tato zpráva se zabývá druhy vlasů worm získané z laboratorních ústavů v listopadu a prosinci 2009, z nichž jeden byl zvracel z 80-rok-stará žena a jiné byly shromážděny z úst 1-rok-starý chlapec, jeho matka. Poddaní žili v Kjótském městě, Kjótské prefektuře A městě Nara, prefektuře Nara v Japonsku. Žena zvracela červa po kloktání fyziologickým roztokem, když cítila, že se jí něco zachytilo v krku, když ležela v posteli., Červ byl před vyšetřením zachován v 10% formalinu. Snědla zeleninu sklizenou ze soukromé zahrady. Druhý červ z úst chlapce byl odstraněn jeho matkou. Oba červy byly vyšetřeny pouhým okem a mikroskopicky. Měli typické morfologické rysy nematomorfních červů. Vzorky měřily délku 13 cm a 12,5 cm a obě měly jednotnou šířku asi 0,1 cm(obr. 1, ,2).2). Těla obou jsou černo-hnědá s krku kroužek (tmavý pigment), ale bez spodní linie, ani hřbetní linie v pokožce v zachovalém stavu (Obr. 1, ,2).,2). Tělo bylo válcové a mělo stejný průměr v celém rozsahu, i když se poněkud zúžilo dopředu. Přední konec byl zaoblený otvorem v ústech. Zadní konec byl rozdvojen. Ocasní laloky byly dlouhé 0,1 mm a poměr délky laloku k šířce byl 0,5. Otvor cloaky byl nalezen u 1 mužského červa (obr. 1). Zadní konec mužské červy byl spirálovitě zapsal a furcated do 2 laloky ocasní, které byly téměř válcovitý, i když poněkud konkávní na jejich medio-ventrální povrch., Postkloakální crescentický záhyb (kutikulární hřeben) nebyl přítomen, což znamenalo, že tyto 2 lidské exempláře nepatřily do rodu Gordius. V souladu s tím byla morfologie těchto červů analyzována na tkáňových úsecích světelně mikroskopicky (obr. 3).
a male hairworm of Parachordodes sp. zvracela 80letá žena. Celé tělo (A), přední část (B) a zadní část (C).
analýzy DNA (částečná sekvence 18s rRNA) byly provedeny pomocí databáze GenBank., Pro DNA analýzy, worm fixovány 10% formaldehydem byl promyt 3x pomocí PBS, a část červ byl řez pomocí čisté krycí sklo a prasklo pomocí mikrozkumavky paličkami (Vědecké Speciality, Inc., Lodi, Kalifornie, USA) pro extrakci DNA. DNA byla extrahována a čištěna pomocí krevních a tkáňových souprav DNeasy (Qiagen GmbH, Hilden, Německo) podle pokynů výrobce. Jaderná 18s ribozomální RNA Gen (18s rDNA) oblast obou červů byla zesílena pomocí primerů 3F a 9R, které byly dříve hlášeny ., PCR amplifikace byla provedena v objemu 50 µl obsahující 1×PCR pufr, 2 mM MgCl2, 250 µM každého dNTP, 0,5 µM každého primeru, 1.25 jednotek TaKaRa Ex Taq Hot Start Verzi (TaKaRa Shuzo Co. Ltd., Otsu, Japonsko) a 3 µl vzorku DNA. PCR reakce byla provedena za následujících podmínek: Vzorky byly denaturovány při 95 ° c po dobu 3 min; pak byly podrobeny 35 cykly 94 ° c po dobu 30 s, 55 ° c 30 sec, 72 ° c 1 min, s finální extenze při 72 ° c po dobu 7 min na termocykleru (GeneAmp PCR System 9700; Applied Biosystems, Foster City, Kalifornie, USA)., PCR produkty byly čištěny pomocí QIAquick PCR Purification Kit (Qiagen GmbH, Hilden, Německo) a byly sekvenovány v obou směrech na automatizovaný sekvencer (ABI 3130; Applied Biosystems, Foster City, Kalifornie, USA). Byly zkontrolovány sekvenční chromatogramy z každého řetězce (Sequencher verze 4.1; genové kódy Corp., Ann Arbor, Michigan, USA). Sekvence získané z obou červů byly sladěny s dostupných nukleotidových sekvencí jiných nematomorpha druhů pomocí Clustal X 2.0 (http://www.clustal.org/) s počáteční fixní hodnoty parametrů., Strom byl konstruován pomocí sousedního spojovacího algoritmu založeného na evolučních vzdálenostech vypočtených pomocí modelu Kimura 2 s vzorkováním bootstrap 1,000. Výsledný strom byl nakreslen pomocí softwaru Njplot (http://pbil.univ-lyon.fr/software/njplot.html).
Tkáňových řezů bylo zjištěno, že povrch těla je pokryt kutikulou 25-50 µm tlusté, a lemované jednovrstvé hypoderm 5-10 µm tlusté s žádné postranní šňůry. Svalová vrstva měla tloušťku 25-60 µm (obr. 3)., Parenchymatózní buňky naplnily pseudocoel na téměř kapacitu a v parenchymu byla identifikována ventrální nervová šňůra, trávicí trakt a pár mužských pohlavních orgánů. Tloušťka svalové vrstvy byla 30-80 µm a ventrální nervová šňůra byla 80×50 µm. Kutikulární povrch byl trochu drsný a měl malé areoly. Po odstranění svalových a podkožních vrstev 2 červů z lidí byla zjištěna struktura kutikuly, která se rovná struktuře rodu Parachordodes sp. obsahující 2 typy velkých a malých areolů morfologicky (fíky. 3, ,4).4)., Malé areoly s granule jsou stejné vlastnosti jako Parachordodes lestici , ale liší se od malé areoly P. okadai , které má hladký povrch. Velké areoly (megareoles) byly téměř kulatý a ty červa v případě 1 byly 23.9±2.5 (Průměr±SD) µm na délku a 23,5±2.7 µm na šířku, a ty v případě 2 byly 23.3±1,2 µm na délku a 23.1±1.0 µm na šířku. Megareoly jsou velmi odlišné u těchto 2 druhů, P. lestici a p. okadai. Jsou téměř kulaté V P. lestici, ale prodlužují se v p. okadai., Současné morfologické vyšetření lidských případů odhalují, že přítomní červi mají vlastnosti P.lestici a mohou být oprávněni určit jako P. lestici. Na kůžičce na obr se však objevily areoly (2 typy malých rozměrů-areoly a megareoly). 4 byly velmi podobné těm v Schmidt-Rhaesa et al. . Morfologické charakteristiky a velikosti megareolů byly také stejné jako u Schmidt-Rhaesa et al. . Proto mohou být 2 červi v této studii stejným druhem jako parachordodes megareolatus, který byl odvozen z lidského močového systému v Koreji .,
dva typy malých rozměrů-areoly (s) a megareoly (m) na pokožce Parachordodes sp. hairworms od lidí (a: nízké zvětšení; B: vysoké zvětšení).
Členové třídy Gordiacea patří do 2 uznávané rodiny, Gordiidae (Gordius) a Chordodidae. První z nich má hladkou kůžičku, ale u některých druhů gordiidae se vyskytují také areoly. Kutikula ve druhé skupině je drsná s pravými areoly. Mezi tyto podčeledi patří 18 rodů (Chordody, Paragordius, Parachordody, Neochordody, Pseudogordius a další)., Tam jsou také jiné rody se 2 druhy areoly, ale charakteristické pro Parachordodes je, že typ 1 je velmi velký a má póru na vrcholu, a tento typ se nazývá superareole . Tyto vlastnosti megareolů silně naznačují, že současné červy mohou být diagnostikovány jako Parachordody Camerano, 1897 . Z Japonska bylo dosud popsáno 17 druhů Nematomorfy (Gordiida) a v Koreji byly hlášeny také 4 druhy Nematomorfy .,
byl proveden fylogenetický vztah podle genu 18s rRNA (1 414 bp) a přítomní červi byli identifikováni jako druh, který je geneticky blíže k druhům Paragordionus (GenBank no. AF421769 a AF421770)a byly odlišné od Gordius worms (GenBank č. AF421766, GAU88337, X87985 a X80233) v analýze stromů(obr. 5). Sekvenování DNA parachordodes červa se v databázi nezobrazuje, takže v budoucnu je zapotřebí více informací o tomto druhu.,
fylogenetické analýzy vlasových červů (Třída Gordiacea) od lidí na základě 18s rRNA (1,414 bp). Evoluční historie byla odvozena metodou Neighbor-Joining (NJ). Evoluční vzdálenosti byly vypočítány metodou parametru Kimura – 2 a jsou v jednotkách počtu základních substitucí na místo. Hodnoty Bootstrap jsou zobrazeny vedle větví. Vysoká hodnota bootstrap 0,988 (počet 1000 replikátů) byla získána na křižovatce Paragordionus spp. a současné 2 červy.,
co se týče invaze trasy, současné lidské případech může mít náhodném požití hmyz, například cvrčky nebo brouka, který je mezihostitele. Současnými exempláři jsou první zaznamenaný lidský vlasový červ, Parachordodes sp. v Japonsku.