PMC (Dansk)

Nematomorpha er en phylum af dyr, der er blevet dårligt undersøgt. På trods af deres verdensomspændende distribution er detaljerede livscyklusser af Nematomorpha ikke blevet fuldstændigt dokumenteret . Parachordodes eller Gordius orme tilhører phylum Nematomorpha (Gordiida, Gordioidea)., Voksne i Parachordodes (Chordodidae: Parachordodinae), Gordius (Gordiidae), eller slægter af underfamilie Chordodinae (Chordodidae), også almindeligt kendt som hår orme, er free-living freshwater indbyggere, og deres larver er første fritlevende og derefter inficere mellemværter. Når mellemliggende værter spises af de endelige værter, larver udvikler sig til unge og vokser til voksen størrelse. Den kaudale ende af mandlige enten er tvedelt eller har en dorsoventral rille i Gordiidae og Parachordodinae, men ikke i Chordodinae., Parachordodes eller Gordius orme har parasitære larve stadier, og endelig værter mantis og nogle kødædende eller altædende arter af Orthoptera (Acrididae: grasshoppers, Gryllidae: fårekyllinger osv.), og Coleoptera (Carabidae: jordbiller).registreringer af menneskelig utilsigtet parasitisme med faldskærmsudspring, Paragordius eller Gordius er usædvanlige i litteraturen, selvom mange er blevet identificeret i forskellige dele af verden fra prøver, der er genvundet fra munden, urinrøret og anus . Seks menneskelige tilfælde af Gordius sp. er blevet rapporteret i Japan ., I disse tilfælde blev orme opkastet og udskilt i fæces og fra anus. Et menneskeligt tilfælde af en Gordius-orm fundet i vomitus og et andet tilfælde af en Parachordodes-orm fundet i urinsystemet er også rapporteret i Korea . Desuden er mindst 13 arter af ferskvand Nematomorpha blevet registreret til dato i Japan . Dertil kommer, at nogle eller nye registreringer af Nematomorpha i insekter, blev for nylig rapporterede fra Shiga, Niigata, Nara, Gifu, Kyoto, og Fukuoka Præfekturer i Japan og molekylære og morfologiske data er blevet anvendt til at analysere den systematiske forhold af Nematomorpha ., Af slægten Parachordodes er der rapporteret 2 arter i Japan: Parachordodes okadai og P. lestici .

Den foreliggende rapport omhandler en art of hair orm, der er indsamlet fra laboratorier institutter i November og December, 2009, der blev kastet op fra en 80-årig kvinde, og den anden blev indsamlet fra munden af en 1-årig dreng, der af sin mor. Emnerne boede i Kyoto city, Kyoto Prefecture, og Nara city, Nara Prefecture, Japan. Kvinden kastede op en orm efter gurgling med en saltopløsning, da hun følte, at der blev fanget noget i halsen, mens hun lå i sengen., Ormen blev bevaret i 10% formalin før undersøgelse. Hun havde spist grøntsager høstet fra en privat have. Den anden orm fra munden af en dreng blev fjernet af sin mor. Begge orme blev undersøgt med det blotte øje og mikroskopisk. De havde de typiske morfologiske træk ved nematomorphan orme. Prøverne målte 13 cm og 12,5 cm i længden og begge havde en ensartet bredde på omkring 0,1 cm (Fig. 1, ,2).2). Begge kroppe var sortbrune med en halsring (mørk pigmentering), men uden ventral linje eller ryglinie i neglebåndet i bevaret tilstand (Fig. 1, ,2).,2). Kroppen var cylindrisk og havde samme diameter langs hele sin Udstrækning, selvom det noget indsnævret anteriorly. Den forreste ende blev afrundet med en mundåbning. Den bageste ende blev forgrenet. Haleloberne var 0,1 mm lange, og forholdet mellem længden af loben og bredden var 0,5. En cloaca åbning blev fundet i 1 hanorm (Fig. 1). Den bageste ende af de mandlige orme blev spiralformet indskrevet og furcated i 2 caudale lobes, som var næsten cylindrisk, dog noget konkav på deres medio-ventrale overflade., En postcloacal crescentic fold (cuticular ridge) var ikke til stede, hvilket betød, at disse 2 menneskelige prøver ikke tilhørte slægten Gordius. Følgelig blev morfologien af disse orme analyseret på vævssektioner lysmikroskopisk (Fig. 3).

en mandlig hårorm af Parachordodes sp. opkast fra en 80 – årig kvinde. Hele kroppen (a), den forreste del (B) og den bageste del (C).

DNA (18S rRNA partielle sekvens) analyser blev udført ved hjælp af GenBank-databasen., Til DNA-analyser, ormen fast med 10% formalin blev vasket 3 gange med PBS, og en del af ormen blev skåret ved hjælp af en ren dække glas og bristede hjælp mikrorør pestles (Videnskabelige Specialiteter, Inc., Lodi, Californien, USA) til DNA-ekstraktion. DNA ‘ et blev ekstraheret og renset ved hjælp af Dneasy blod-og Vævssæt (.iagen GmbH, Hilden, Tyskland) i henhold til producentens anvisninger. Det nukleare 18S ribosomale RNA-gen (18S rDNA) – område af begge orme blev forstærket under anvendelse af 3F-og 9R-primere rapporteret tidligere ., PCR-amplifikation blev udført i et volumen på 50 µl indeholder 1×PCR buffer, 2 mM MgCl2, 250 µM af hver dNTP, 0.5 µM af hver primer, 1.25 enheder af TaKaRa Ex Taq-Hot Start-Version (TaKaRa Shuzo Co. Ltd., Otsu, Japan) og 3 µl DNA-prøve. PCR-reaktion var udføres under følgende betingelser: Prøver blev denatureret på 95℃ til 3 min. så de er blevet udsat for 35 cyklusser af 94℃ for 30 sek., 55℃ for 30 sek., og 72 ° c i 1 min., med final extension 72℃ til 7 min på en termocykler (GeneAmp PCR-System 9700; Applied Biosystems, Foster City, California, amerikas forenede stater)., PCR produkterne blev renset ved hjælp af en QIAquick PCR Rensning Kit (Qiagen GmbH, Hilden, Tyskland), og blev sekventeret i begge retninger på en automatiseret sequencer (ABI 3130; Applied Biosystems, Foster City, California, amerikas forenede stater). Sekvenskromatogrammer fra hver streng blev inspiceret (se .uencher Version 4.1; Genkoder Corp., Ann Arbor, Michigan, USA). Sekvenserne opnået fra begge orme blev justeret med de tilgængelige nukleotidsekvenser af andre nematomorpha-arter under anvendelse af Clustal 2.0 2.0 (http://www.clustal.org/) med indledende faste parameterværdier., Et træ blev konstrueret ved hjælp af nabo-Sammenføjningsalgoritmen baseret på evolutionære afstande beregnet ved hjælp af Kimura 2-parameter-modellen med 1,000 Bootstrap-prøveudtagning. Det resulterende træ blev tegnet ved hjælp af Njplot-soft .are (http://pbil.univ-lyon.fr/software/njplot.html).

vævssektioner afslørede, at kropsoverfladen var dækket med en kutikula på 25-50 µm tyk og foret med monolag hypoderm på 5-10 µm tyk uden lateral ledning. Muskellaget var 25-60 µm tykt (Fig. 3)., Parenkymceller fyldte pseudocoel til nær kapacitet, og en ventral nervesnor, en fordøjelseskanal og et par mandlige kønsorganer blev identificeret i parenchymen. Tykkelsen af muskellaget var 30-80 µm, og den ventrale nervesnor var 80.50 µm. Den kutikulære overflade var lidt ru og havde små areoler. Efter fjernelse af muskel-og hypodermislag af de 2 orme fra mennesker blev strukturen af neglebåndet fundet at være lig med slægten Parachordodes sp. indeholder 2 typer af store og små areoler morfologisk (Fig. 3, ,4).4)., De små areoler med granuler er de samme egenskaber som Parachordodes lestici , men forskellige fra de små areoler af P. okadai , som har glat overflade. De store areoler (megareoler) var næsten runde, og ormen i tilfælde 1 var 23.9 2.5 2.5 (gennemsnit SD SD )mm i længden og 23.5.2.7mm i bredden, og dem i tilfælde 2 var 23.3. 1.2 µm i længden og 23.1. 1.0 µm i bredden. Den megareoles er meget forskellige i disse 2 arter, P. lestici og P. okadai. De er næsten runde i P. lestici, men aflange i P. okadai., De nuværende morfologiske undersøgelser af menneskelige tilfælde afslører, at de nuværende orme har karakteristika for P. lestici, og kunne være berettiget til at bestemme som P. lestici. Imidlertid optrådte areolerne (2 typer små størrelse-areoler og megareoler) på kutiklen i Fig. 4 var meget ens med dem i Schmidt-Rhaesa et al. . De morfologiske egenskaber og størrelser af megareoler var også lig med dem i Schmidt-Rhaesa et al. . Derfor kan de 2 orme i den foreliggende undersøgelse være de samme arter som Parachordodes megareolatus, der stammer fra det menneskelige urinsystem i Korea .,

medlemmer af klassen Gordiacea tilhører 2 anerkendte familier, Gordiidae (Gordius) og Chordodidae. Førstnævnte har en glat kutikula, men i nogle arter af Gordiidae forekommer areoler også. Cuticle i den anden gruppe er ru med ægte areoler. Disse underfamilie grupper omfatter 18 slægter (Chordodes, Paragordius, Parachordodes, Neochordodes, Pseudogordius og andre)., Der er også andre slægter med 2 typer areoler, men karakteristisk for Parachordoder er, at 1 type er meget stor og har en pore på toppen, og denne type kaldes superareole . Disse egenskaber ved megareoler tyder stærkt på, at de nuværende orme kan diagnosticeres som Parachordodes Camerano, 1897 . Fra Japan er 17 arter af Nematomorpha (Gordiida) blevet beskrevet til dato, og 4 arter af Nematomorpha er også rapporteret i Korea .,

Et fylogenetisk forhold i henhold til 18S rRNA genet (1,414 bp) blev gennemført, og den nuværende orme blev identificeret som en art, der er genetisk tættere på Paragordionus arter (GenBank nr. AF421769 og AF421770) og var forskellige fra Gordius orme (GenBank nr. AF421766, GAU88337, GAU87985 og8080233) i en træanalyse (Fig. 5). DNA-sekventering af Parachordodes-ormen vises ikke i databasen, så der kræves mere information om denne art i fremtiden.,

hvad angår invasionsruten, kan de nuværende menneskelige tilfælde ved et uheld have slugt insekter, såsom en cricket eller en bille, der er en mellemliggende vært. De foreliggende prøver er den første registrerede menneskehårorm, Parachordodes sp. i Japan.