Sidst Opdateret den 4 februar 2021 ved Sagar Aryal
MacConkey agar var den første solid differentieret medier til at være formuleret som blev udviklet i det 20-århundrede af Alfred Theodore MacConkey. MacConkey Agar er det tidligste selektive og differentierede medium til dyrkning af coliforme organismer., Det bruges til isolering og differentiering af ikke-kræsne gram-negative stænger, især medlemmer af familien Enterobacteriaceae og slægten Pseudomonas.,20c3eca”>
| Ingredients | Amount |
| Peptone (Pancreatic digest of gelatin) | 17 gm |
| Proteose peptone (meat and casein) | 3 gm |
| Lactose monohydrate | 10 gm |
| Bile salts | 1.,5 gm |
| Sodium chloride | 5 gm |
| Neutral red | 0.03 gm |
| Crystal Violet | 0.001 gm |
| Agar | 13.,5 gm |
Princip af MacConkey Agar
Pankreatisk fordøjelse af gelatine og peptoner (kød og kasein) give de essentielle næringsstoffer, vitaminer og kvælstofholdige faktorer, der er nødvendige for vækst af mikroorganismer. Lactosemonohydrat er den fermenterbare kilde til kulhydrat. Den selektive virkning af dette medium tilskrives krystal violet og galdesalte, som er hæmmende for de fleste arter af gram-positive bakterier. Natriumchlorid opretholder den osmotiske balance i mediet.,
Lactosefermenteringsstammer vokser som røde eller lyserøde. Den røde farve skyldes produktion af syre fra lactose, absorption af neutral rød og en efterfølgende farveændring af farvestoffet, når mediet pH falder til under 6,8. Ikke-lactose fermenterende bakterier såsom Salmonella, Proteus, Pseudomonas aeruginosa og Shigella kan ikke udnytte lactose, og vil bruge pepton i stedet. Dette danner ammoniak, som hæver agarens pH og fører til dannelsen af hvide eller farveløse kolonier dannet i pladen, og agaren omkring bakterierne forbliver relativt gennemsigtig., Disse kolonier kan også se gyldne til brune ud med mørke Centre.
laktose kan erstattes i mediet med andre sukkerarter, og erstatningssukker kan bruges til at teste gram-negative bakteriers evner til at fermentere erstatningssukker. For eksempel kan sorbitol anvendes som erstatningssukker i MacConkey-agar for at hjælpe med isolering og differentiering af enteropatogene E. coli-serotyper såsom E. coli O157:H7 ved tilstedeværelsen af hvide cirkulære kolonier, der ikke er sorbitolfermentering.,
Forberedelse af MacConkey Agar
- Suspendere 49.53 gram tørrede medium i 1000 ml destilleret vand.
- opvarm til kogning for at opløse mediet fuldstændigt.
- steriliseres ved autoklavering ved 15 lbs tryk (121.C) i 15 minutter.
- afkøles til 45.C -50. C.
- blandes godt, inden der hældes i sterile Petreplader.,a3c”>
Proteus
Uses of MacConkey Agar
- MacConkey agar is used for the isolation of gram-negative enteric bacteria.,
- det anvendes til differentiering af lactose fermentering fra lactose ikke-fermenterende gram-negative bakterier.
- det anvendes til mikrobiologisk undersøgelse af fødevarer og til direkte plating / podning af vandprøver til coliforme tællinger.
- det bruges til undersøgelse af mælk og mejeriprodukter.
- Britisk farmakop has har anbefalet dette medium til subkultur og identifikation af Escherichia coli.,
Begrænsninger af MacConkey Agar
- Den koloniale egenskaber, beskrive, give, formodet identifikation af isolerede organismer. Det er nødvendigt at subkultur og carryout andre bekræftelse tests som biokemiske tests for endelig identifikation.
- nogle stammer kan forekomme, der vokser dårligt eller ikke vokser på dette medium.
- inkubation af MacConkey-agarplader under øget CO2 er rapporteret at reducere vækst og genopretning af en række stammer af Gram-negative baciller.,
- nogle stammer af Proteus kan sværme på dette medium.