dernière mise à jour le 4 février 2021 par Sagar Aryal
MacConkey agar a été le premier milieu différentiel solide à être formulé qui a été développé au 20ème siècle par Alfred Theodore MacConkey. La gélose MacConkey est le premier milieu sélectif et différentiel pour la culture d’organismes coliformes., Il est utilisé pour l’isolement et la différenciation des bâtonnets gram-négatifs non exigeants, en particulier les membres de la famille des Enterobacteriaceae et du genre Pseudomonas.,20c3eca »>
| Ingredients | Amount |
| Peptone (Pancreatic digest of gelatin) | 17 gm |
| Proteose peptone (meat and casein) | 3 gm |
| Lactose monohydrate | 10 gm |
| Bile salts | 1.,5 gm |
| Sodium chloride | 5 gm |
| Neutral red | 0.03 gm |
| Crystal Violet | 0.001 gm |
| Agar | 13.,5 g |
principe de la gélose MacConkey
Le digest pancréatique de la gélatine et des peptones (viande et caséine) nutriments, vitamines et facteurs azotés nécessaires à la croissance des micro-organismes. Le Lactose monohydraté est la source fermentescible de glucides. L’action sélective de ce milieu est attribuée à la violette cristalline et aux sels biliaires, qui sont inhibiteurs de la plupart des espèces de bactéries à gram positif. Chlorure de Sodium maintient l’équilibre osmotique dans le milieu.,
Les souches fermentant le Lactose poussent en rouge ou en rose. La couleur Rouge est due à la production d’acide à partir du lactose, à l’absorption d’un rouge neutre et à un changement de couleur ultérieur du colorant lorsque le pH du milieu tombe en dessous de 6,8. Les bactéries qui fermentent sans lactose telles que Salmonella, Proteus, Pseudomonas aeruginosa et Shigella ne peuvent pas utiliser de lactose et utiliseront plutôt de la peptone. Cela forme de l’ammoniac, ce qui augmente le pH de la gélose, et conduit à la formation de colonies blanches ou incolores formées dans la plaque et la gélose entourant les bactéries reste relativement transparente., Ces colonies peuvent également paraître dorées à brunes avec des centres sombres.
le Lactose peut être remplacé dans le milieu par d’autres sucres et les sucres de remplacement peuvent être utilisés pour tester la capacité des bactéries à gram négatif à fermenter les sucres de remplacement. Par exemple, le sorbitol peut être utilisé comme sucre de remplacement dans la gélose MacConkey pour aider à l’isolement et à la différenciation des sérotypes entéropathogènes D’E. coli tels que E. coli O157:H7 par la présence de colonies circulaires blanches qui ne fermentent pas le sorbitol.,
la Préparation de la Gélose de MacConkey
- Suspendre 49.53 grammes d’un milieu déshydraté dans 1000 ml d’eau distillée.
- chauffer à ébullition pour dissoudre complètement le milieu.
- stériliser par autoclavage à une pression de 15 lb (121°C) pendant 15 minutes.
- refroidir à 45°C -50°C.
- bien mélanger avant de verser dans des plaques de Petri stériles.,a3c »>
Proteus
Uses of MacConkey Agar
- MacConkey agar is used for the isolation of gram-negative enteric bacteria.,
- Il est utilisé dans la différenciation de la fermentation du lactose à partir de bactéries gram-négatives non fermentantes du lactose.
- Il est utilisé dans l’examen microbiologique des aliments et pour le placage direct / inoculation d’échantillons d’eau pour le nombre de coliformes.
- Il est utilisé pour l’examen du lait et des produits laitiers.
- La pharmacopée britannique a recommandé ce milieu pour la sous-culture et l’identification D’Escherichia coli.,
limites de la gélose MacConkey
- Les caractéristiques coloniales décrites ne permettent l’identification présumée que des organismes isolés. Il est nécessaire de subculture et de réaliser d’autres tests de confirmation comme des tests biochimiques pour l’identification finale.
- certaines souches peuvent être rencontrées qui poussent mal ou ne poussent pas sur ce milieu.
- L’Incubation de plaques de gélose MacConkey sous une augmentation du CO2 a été rapportée pour réduire la croissance et la récupération d’un certain nombre de souches de bacilles à Gram négatif.,
- certaines souches de Proteus peuvent essaimer sur ce milieu.