Zuletzt aktualisiert am 4. Februar 2021 von Sagar Aryal
MacConkey agar war das erste feste Differentialmedium, das im 20. MacConkey Agar ist das früheste selektive und differentielle Medium für die Kultivierung von coliformen Organismen., Es wird zur Isolierung und Differenzierung nicht anspruchsvoller gramnegativer Stäbchen verwendet, insbesondere Mitglieder der Familie Enterobacteriaceae und der Gattung Pseudomonas.,20c3eca“>
Ingredients | Amount |
Peptone (Pancreatic digest of gelatin) | 17 gm |
Proteose peptone (meat and casein) | 3 gm |
Lactose monohydrate | 10 gm |
Bile salts | 1.,5 gm |
Sodium chloride | 5 gm |
Neutral red | 0.03 gm |
Crystal Violet | 0.001 gm |
Agar | 13.,5 gm |
Prinzip von MacConkey Agar
Pankreas verdauung von gelatine und peptone (fleisch und kasein) bieten die wesentlichen nährstoffe, vitamine und stickstoffhaltige faktoren erforderlich für wachstum von mikroorganismen. Lactose-Monohydrat ist die fermentierbare Kohlenhydratquelle. Die selektive Wirkung dieses Mediums wird kristallvioletten und Gallensalzen zugeschrieben, die für die meisten Arten grampositiver Bakterien hemmend sind. Natriumchlorid hält das osmotische Gleichgewicht im Medium aufrecht.,
Lactose fermentierende Stämme wachsen als rot oder rosa. Die rote Farbe ist auf die Produktion von Säure aus Laktose, die Absorption von neutralem Rot und eine anschließende Farbänderung des Farbstoffs zurückzuführen, wenn der pH-Wert des Mediums unter 6,8 fällt. Nicht-Laktose-fermentierende Bakterien wie Salmonellen, Proteus, Pseudomonas aeruginosa und Shigella können keine Laktose verwenden und verwenden stattdessen Pepton. Dies bildet Ammoniak, das den pH-Wert des Agars erhöht und zur Bildung von weißen oder farblosen Kolonien führt, die in der Platte gebildet werden, und der die Bakterien umgebende Agar bleibt relativ transparent., Diese Kolonien können auch golden bis braun mit dunklen Zentren aussehen.
Laktose kann im Medium durch andere Zucker ersetzt werden und die Ersatzzucker können verwendet werden, um die Fähigkeiten gramnegativer Bakterien zur Fermentation der Ersatzzucker zu testen. Zum Beispiel kann Sorbitol als Ersatzzucker in MacConkey-Agar verwendet werden, um die Isolierung und Differenzierung enteropathogener E. coli-Serotypen wie E. coli O157:H7 durch das Vorhandensein von weißen zirkulären Kolonien zu unterstützen, die nicht sorbitolfermentieren.,
Zubereitung von MacConkey-Agar
- Suspend 49.53 G des dehydrierten Mediums in 1000 ml destilliertem Wasser.
- Zum Kochen erhitzen, um das Medium vollständig aufzulösen.
- Sterilisieren durch Autoklavieren bei 15 lbs Druck (121°C) für 15 Minuten.
- Auf 45°C -50°C abkühlen lassen
- Vor dem Eingießen in sterile Petriplatten gut mischen.,a3c“>
Proteus
Uses of MacConkey Agar
- MacConkey agar is used for the isolation of gram-negative enteric bacteria.,
- Es wird zur Differenzierung der Laktosegärung von nicht fermentierenden gramnegativen Laktosebakterien verwendet.
- Es wird zur mikrobiologischen Untersuchung von Lebensmitteln und zur direkten Beschichtung / Inokulation von Wasserproben für coliforme Zählungen verwendet.
- Es wird zur Untersuchung von Milch und Milchprodukten verwendet.
- British pharmacopoeia hat dieses Medium zur Subkultur und Identifizierung von Escherichia coli empfohlen.,
Einschränkungen von MacConkey-Agar
- Die koloniale Eigenschaften beschreiben, geben presumptive identification nur an den isolierten Organismen. Es ist notwendig, andere Bestätigungstests wie biochemische Tests zur endgültigen Identifizierung zu subkulturalisieren und zu übertragen.
- Einige Stämme können auftreten, die schlecht wachsen oder auf diesem Medium nicht wachsen.
- Es wurde berichtet, dass die Inkubation von MacConkey-Agarplatten unter erhöhtem CO2 das Wachstum und die Erholung einer Reihe von Stämmen gramnegativer Bazillen verringert.,
- Einige Proteus-Stämme können auf diesem Medium schwärmen.