PMC (Nederlands)

Nematomorpha is een stam van dieren die slecht is bestudeerd. Ondanks hun wereldwijde verspreiding zijn gedetailleerde levenscycli van Nematomorpha niet volledig gedocumenteerd . Parachordodes of Gordiuswormen behoren tot de phylum Nematomorpha (Gordiida, Gordioidea)., De larven van Parachordodes (Chordodidae: Parachordodinae), Gordius (Gordiidae), of de geslachten van de onderfamilie Chordodinae (Chordodidae), ook wel bekend als haarwormen, zijn vrij levende zoetwaterbewoners, en hun larven zijn eerst vrijlevende en infecteren dan tussenliggende gastheren. Wanneer intermediaire gastheren door de uiteindelijke gastheren worden gegeten, ontwikkelen larven zich tot juvenielen en groeien ze tot volwassen grootte. Het caudale uiteinde van het mannetje is ofwel gespleten of heeft een dorsoventrale groef in Gordiidae en Parachordodinae, maar niet in Chordodinae., Parachordodes of Gordiuswormen hebben parasitaire larve stadia, en uiteindelijke gastheren zijn de mantis en enkele carnivore of Omnivore soorten van Orthoptera (Acrididae: sprinkhanen, Gryllidae: krekels, enz.), en Coleoptera (Carabidae: loopkevers).

meldingen van menselijk per ongeluk parasitisme met Parachordodes, Paragordius of Gordius komen niet vaak voor in de literatuur, hoewel er in verschillende delen van de wereld veel zijn geïdentificeerd aan de hand van monsters uit de mond, urethra en anus . Zes menselijke gevallen van Gordius sp. zijn gemeld in Japan ., In deze gevallen werden wormen uitgebraakt en uitgescheiden in de ontlasting en uit de anus. Een menselijk geval van een Gordius worm gevonden in het braaksel en een ander geval van een Parachordodes worm gevonden in de urinewegen zijn ook gemeld in Korea . Bovendien zijn tot op heden ten minste 13 soorten Zoetwater Nematomorpha in Japan waargenomen . Daarnaast werden onlangs enkele of nieuwe records van Nematomorpha in insecten gerapporteerd uit de prefecturen Shiga, Niigata, Nara, Gifu, Kyoto en Fukuoka, Japan , en moleculaire en morfologische gegevens zijn gebruikt om de systematische relatie van Nematomorpha te analyseren ., Van het geslacht Parachordodes zijn in Japan 2 soorten gemeld: Parachordodes okadai en P. lestici .dit rapport behandelt een soort haarworm die in November en December 2009 werd verzameld bij laboratoriuminstituten, waarvan er één werd uitgebraakt bij een 80-jarige vrouw en de andere werd verzameld uit de mond van een 1-jarige jongen door zijn moeder. De onderwerpen woonden in Kyoto city, Kyoto Prefecture, en Nara city, Nara Prefecture, Japan. De vrouw braakte een worm na gorgelen met een zoutoplossing als ze voelde iets was gevangen in haar keel terwijl ze lag in bed., De worm werd bewaard in 10% formaline voor onderzoek. Ze had groenten uit een privétuin gegeten. De andere worm uit de mond van een jongen werd verwijderd door zijn moeder. Beide wormen werden met het blote oog en microscopisch onderzocht. Ze hadden de typische morfologische kenmerken van nematomorfaanse wormen. De exemplaren waren 13 cm en 12,5 cm lang en hadden beide een uniforme breedte van ongeveer 0,1 cm (Fig. 1, ,2).2). De lichamen van beide waren zwartbruin met een halsring (donkere pigmentatie) maar zonder ventrale lijn of dorsale Lijn in de cuticula in de bewaard gebleven conditie (Fig. 1, ,2).,2). Het lichaam was cilindrisch en had dezelfde diameter over de gehele omvang, hoewel het enigszins versmald anteriorly. Het voorste uiteinde was afgerond met een mondopening. Het achterste uiteinde was gespleten. De staartkwabben waren 0,1 mm lang en de verhouding tussen de lengte van de kwab en de breedte was 0,5. Een cloaca opening werd gevonden in 1 mannelijke worm (Fig. 1). Het achterste uiteinde van de mannelijke wormen werd spiraalsgewijs opgenomen en in 2 caudale kwabben gevormd, die bijna cilindrisch waren, hoewel enigszins concaaf op hun midden-ventraal oppervlak., Een postcloacale crescentic plooi (cuticulaire rug) was niet aanwezig, wat betekende dat deze 2 menselijke exemplaren niet behoorden tot het geslacht Gordius. Dienovereenkomstig, werd de morfologie van deze wormen geanalyseerd op weefselsecties licht-microscopisch (Fig. 3).

een mannelijke haarworm van Parachordodes sp. overgegeven van een 80-jarige vrouw. Het hele lichaam (a), het voorste deel (B) en het achterste deel (C).

DNA-analyses (18S rRNA partiële sequentie) werden uitgevoerd met behulp van de GenBank-database., Voor DNA-analyses werd de met 10% formaline gefixeerde worm 3 keer gewassen met behulp van PBS, en een deel van de worm werd gesneden met behulp van een schoon deksel glas en gescheurd met behulp van Microtube stampers (Scientific Specialties Inc., Lodi, California, USA) voor DNA-extractie. Het DNA werd geëxtraheerd en gezuiverd met DNeasy bloed – en Weefselkits (Qiagen GmbH, Hilden, Duitsland) volgens de instructies van de fabrikant. De kern 18S ribosomale RNA gen (18S rDNA) gebied van beide wormen werd versterkt met behulp van 3F en 9R primers eerder gemeld ., PCR-versterking werd uitgevoerd in een volume van 50 µl met 1×PCR-buffer, 2 mM MgCl2, 250 µM van elke dNTP, 0,5 µM van elke primer, 1,25 eenheden van TaKaRa Ex Taq Hot Start Version (TaKaRa Shuzo Co. Ltd., Otsu, Japan), en 3 µl DNA-monster. De PCR-reactie werd uitgevoerd onder de volgende omstandigheden: monsters werden gedenatureerd bij 95℃ gedurende 3 min; vervolgens werden ze onderworpen aan 35 cycli van 94℃ gedurende 30 sec, 55℃ gedurende 30 sec en 72℃ gedurende 1 min, met een definitieve verlenging bij 72℃ gedurende 7 min op een thermocycler (GeneAmp PCR System 9700; Applied Biosystems, Foster City, California, USA)., De PCR-producten werden gezuiverd met behulp van een QIAquick PCR-Zuiveringskit (Qiagen GmbH, Hilden, Duitsland) en werden in beide richtingen gesequenced op een geautomatiseerde sequencer (ABI 3130; Applied Biosystems, Foster City, Californië, VS). Sequentiechromatogrammen van elke streng werden geïnspecteerd (Sequencher Versie 4.1; Gene Codes Corp., Ann Arbor, Michigan, USA). De uit beide wormen verkregen sequenties werden uitgelijnd met de beschikbare nucleotidesequenties van andere nematomorpha-soorten met behulp van Clustal x 2.0 (http://www.clustal.org/) met initiële vaste parameterwaarden., Een boom werd geconstrueerd met behulp van het Buuralgoritme gebaseerd op evolutionaire afstanden berekend met behulp van het Kimura 2-parameter model met 1000 bootstrap sampling. De resulterende boom werd getekend met behulp van njplot software (http://pbil.univ-lyon.fr/software/njplot.html).

Weefsel secties bleek dat het lichaamsoppervlak was bedekt met een cuticula van 25-50 µm dik, en bekleed met monolaag hypoderm van 5-10 µm dik zonder laterale koord. De spierlaag was 25-60 µm dik (Fig. 3)., Parenchymateuze cellen vulden de pseudocoel tot bijna capaciteit, en een ventrale zenuw koord, een spijsverteringskanaal, en een paar mannelijke geslachtsorganen werden geïdentificeerd in het parenchym. De dikte van de spierlaag was 30-80 µm en de ventrale zenuw was 80×50 µm. Het cuticulaire oppervlak was een beetje ruw en had kleine areolen. Na verwijdering van spier-en hypodermislagen van de 2 wormen van de mens, bleek de structuur van de cuticula gelijk te zijn aan die van het geslacht Parachordodes sp. bevat 2 soorten grote en kleine areolen morfologisch (Fig. 3, ,4).4)., De kleine areolen met korrels hebben dezelfde kenmerken als Parachordodes lestici, maar verschillen van de kleine areolen van P. okadai, die een glad oppervlak heeft. De grote areolen (megareolen) waren bijna rond en die van de worm in geval 1 waren 23,9±2,5 (gemiddelde±SD) µm in lengte en 23,5±2,7 µm in breedte, en die in geval 2 waren 23,3±1,2 µm in lengte en 23,1±1,0 µm in breedte. De megareolen zijn zeer verschillend in deze 2 soorten, P. lestici en P. okadai. Ze zijn bijna rond in P. lestici, maar langgerekt in P. okadai., De huidige morfologische onderzoeken van menselijke gevallen tonen aan dat de huidige wormen de kenmerken van P. lestici hebben, en kunnen worden gerechtvaardigd om te bepalen als P. lestici. Echter, de areolen (2 soorten klein formaat-areolen en megareolen) verscheen op de cuticula in Fig. 4 waren zeer vergelijkbaar met die in Schmidt-Rhaesa et al. . De morfologische kenmerken en maten van megareoles waren ook gelijk aan die in Schmidt-Rhaesa et al. . Daarom kunnen de 2 wormen in dit onderzoek dezelfde soort zijn als Parachordodes megareolatus die werd afgeleid van het menselijke urinestelsel in Korea .,

leden van de klasse Gordiacea behoren tot 2 erkende families, Gordiidae (Gordius) en Chordodidae. De eerste heeft een gladde cuticula, maar bij sommige Gordiidae komen ook areolen voor. De cuticula in de tweede groep is ruw met echte areolen. Deze onderfamilie groepen omvatten 18 geslachten (Chordodes, Paragordius, Parachordodes, Neochordodes, Pseudogordius en anderen)., Er zijn ook andere geslachten met 2 soorten areolen, maar kenmerkend voor Parachordodes is dat 1 type zeer groot is en een porie bovenop heeft, en dit type heet superareole . Deze kenmerken van megareolen suggereren sterk dat de huidige wormen kunnen worden gediagnosticeerd als Parachordodes Camerano, 1897 . Uit Japan zijn tot op heden 17 soorten Nematomorpha (Gordiida) beschreven en 4 soorten Nematomorpha zijn ook gemeld in Korea .,

een fylogenetische relatie volgens het 18S rRNA-gen (1.414 bp) werd uitgevoerd en de aanwezige wormen werden geïdentificeerd als een soort die genetisch dichter bij Paragordionus-soorten ligt (GenBank no. AF421769 en AF421770) en verschilden van Gordius worms (GenBank no. AF421766, GAU88337, X87985, en X80233) in een boomanalyse (Fig. 5). DNA-sequencing van de Parachordodenworm verschijnt niet in de database, dus meer informatie over deze soort is in de toekomst nodig.,

wat de invasieroute betreft, kunnen de huidige menselijke gevallen per ongeluk insecten hebben ingeslikt, zoals een krekel of een kever, die een tussenliggende gastheer is. De huidige exemplaren zijn de eerste geregistreerde menselijke haarworm, Parachordodes sp. in Japan.