Ostatnia aktualizacja lutego 4, 2021 przez Sagar Aryal
macconkey agar był pierwszym stałym nośnikiem różnicowym być sformułowane, który został opracowany w 20 wieku przez Alfreda Theodore MacConkey. Agar macconkeya jest najwcześniejszym selektywnym i zróżnicowanym podłożem do uprawy organizmów coli., Jest on stosowany do izolacji i różnicowania niefastycznych gram-ujemnych prętów, szczególnie członków rodziny Enterobacteriaceae i rodzaju Pseudomonas.,20c3eca”>
Ingredients | Amount |
Peptone (Pancreatic digest of gelatin) | 17 gm |
Proteose peptone (meat and casein) | 3 gm |
Lactose monohydrate | 10 gm |
Bile salts | 1.,5 gm |
Sodium chloride | 5 gm |
Neutral red | 0.03 gm |
Crystal Violet | 0.001 gm |
Agar | 13.,5 gm |
zasada działania agaru MacConkey
trzustkowy digest żelatyny i peptonów (mięsa i kazeiny) dostarcza niezbędnych składników odżywczych, witamin i czynników azotowych niezbędnych do wzrostu mikroorganizmów. Laktoza jednowodna jest fermentowalnym źródłem węglowodanów. Selektywne działanie tego podłoża przypisuje się fioletowi krystalicznemu i Solom żółciowym, które hamują większość gatunków bakterii gram-dodatnich. Chlorek sodu utrzymuje równowagę osmotyczną w pożywce.,
szczepy fermentujące laktozę rosną jako czerwone lub różowe. Barwa czerwona jest spowodowana wytwarzaniem kwasu z laktozy, wchłanianiem neutralnej czerwieni i późniejszą zmianą barwy barwnika, gdy pH pożywki spadnie poniżej 6,8. Bakterie fermentujące bez laktozy, takie jak Salmonella, Proteus, Pseudomonas aeruginosa i Shigella, nie mogą wykorzystywać laktozy i zamiast tego użyją peptonu. Tworzy to amoniak, który podnosi pH agaru i prowadzi do powstawania białych lub bezbarwnych Kolonii utworzonych w płytce, a agar otaczający bakterie pozostaje stosunkowo przezroczysty., Kolonie te mogą również wyglądać na Złote do brązowych z ciemnymi centrami.
laktozę można zastąpić w pożywce innymi cukrami, a cukry zastępcze można wykorzystać do sprawdzenia zdolności bakterii gram-ujemnych do fermentacji cukrów zastępczych. Na przykład sorbitol może być stosowany jako cukier zastępczy w agarze Macconkeya, aby pomóc w izolacji i różnicowaniu enteropatogennych serotypów E. coli, takich jak E. coli O157: H7 przez obecność białych okrągłych kolonii, które nie są fermentowane przez sorbitol.,
przygotowanie agaru MacConkey
- zawiesić 49,53 grama odwodnionego podłoża w 1000 ml wody destylowanej.
- podgrzać do wrzenia, aby całkowicie rozpuścić podłoże.
- sterylizować w autoklawie przy ciśnieniu 15 funtów (121°C) przez 15 minut.
- schłodzić do 45°C -50°C.
- dobrze wymieszać przed wylaniem do sterylnych płyt Petri.,a3c”>
Proteus
Uses of MacConkey Agar
- MacConkey agar is used for the isolation of gram-negative enteric bacteria.,
- stosuje się go w różnicowaniu fermentującej laktozy od niefermentujących laktozy bakterii gram-ujemnych.
- jest stosowany w badaniach mikrobiologicznych produktów spożywczych i do bezpośredniego powlekania / inokulacji próbek wody dla liczby bakterii z grupy coli.
- służy do badania mleka i przetworów mlecznych.
- brytyjska Farmakopea zaleciła to podłoże do subkultury i identyfikacji Escherichia coli.,
ograniczenia agaru MacConkey
- opis cech kolonialnych daje przypuszczalną identyfikację tylko izolowanych organizmów. Konieczne jest subkultura i przeprowadzenie innych testów potwierdzających, takich jak testy biochemiczne do ostatecznej identyfikacji.
- można napotkać niektóre szczepy, które słabo rosną lub nie rosną na tym podłożu.
- inkubacja płyt agarowych Macconkeya pod zwiększonym poziomem CO2 została zgłoszona, aby zmniejszyć wzrost i regenerację wielu szczepów prątków Gram-ujemnych.,
- niektóre szczepy Proteusa mogą roić się na tym podłożu.