Nematomorpha é um filo de animais que tem sido mal estudado. Apesar de sua distribuição mundial, ciclos de vida detalhados de Nematomorpha não foram completamente documentados . Os Parachordodes ou vermes Gordius pertencem ao filo Nematomorpha (Gordiida, Gordioidea)., Adultos de Parachordodes (Chordodidae: Parachordodinae), Gordius (Gordiidae), ou os gêneros da subfamília Chordodinae (Chordodidae), também conhecida como cabelo de vermes, são de vida livre de água doce habitantes, e suas larvas de primeiro são de vida livre e, em seguida, infectar hospedeiros intermediários. Quando hospedeiros intermediários são comidos pelos hospedeiros finais, as larvas se desenvolvem para juvenis e crescem até o tamanho adulto. A extremidade caudal do macho é bifurcada ou tem um sulco dorsoventral em Gordiidae e Parachordodinae, mas não em Chordodinae., Os pára-quedistas ou vermes Gordius têm estágios larvares parasitários, e os hospedeiros finais incluem O louva-a-Deus e algumas espécies carnívoras ou onívoras de Ortoptera (Acrididae: gafanhoppers, Gryllidae: grilos, etc.), and Coleoptera (Carabidae: ground beetles).registros de parasitismo acidental humano com Parachordodes, Paragórdio ou Gordius são incomuns na literatura, embora muitos tenham sido identificados em diferentes partes do mundo a partir de espécimes recuperados da boca, uretra e ânus . Seis casos humanos de Gordius sp. foram relatados no Japão ., Nestes casos, as minhocas eram vomitadas e excretadas nas fezes e no ânus. Um caso humano de um verme de Gordius encontrado no vomitus e outro caso de um verme de pára-quedas encontrado no sistema urinário também foram relatados na Coreia . Além disso, pelo menos 13 espécies de Nematomorpha de água doce foram registradas até à data no Japão . Além disso, alguns ou novos registros de Nematomorpha em insetos foram recentemente relatados a partir de Shiga, Niigata, Nara, Gifu, Kyoto, e Fukuoka Prefeituras, Japão , molecular e morfológica de dados têm sido utilizados para analisar a relação sistemática de Nematomorpha ., Do gênero Parachordodes, 2 espécies foram relatadas no Japão: Parachordodes okadai e P. lestici .o presente relatório trata de uma espécie de verme capilar coletado em institutos de laboratório em novembro e dezembro de 2009, um dos quais foi vomitado de uma mulher de 80 anos e o outro foi coletado da boca de um menino de 1 ano por sua mãe. Os súditos viviam na cidade de Kyoto, na Prefeitura de Kyoto e na cidade de Nara, na Prefeitura de Nara, no Japão. A mulher vomitou uma minhoca depois de gargarejar com uma solução salina enquanto sentia que algo estava preso na garganta enquanto estava deitada na cama., O verme foi preservado em 10% de formalina antes do exame. Ela tinha comido vegetais colhidos de um jardim privado. O outro verme da boca de um rapaz foi removido pela mãe. Ambos os vermes foram examinados a olho nu e microscopicamente. Eles tinham características morfológicas típicas de vermes nematomorfos. Os espécimes mediam 13 cm e 12,5 cm de comprimento e ambos tinham uma largura uniforme de cerca de 0,1 cm (figos. 1, ,2).2). Os corpos de ambos eram castanhos negros com um anel do pescoço (pigmentação escura), mas sem linha ventral nem linha dorsal na cutícula na condição preservada (figos. 1, ,2).,2). O corpo era cilíndrico e tinha o mesmo diâmetro ao longo de toda a sua extensão, embora tenha estreitado anteriormente. A extremidade anterior foi arredondada com uma abertura da boca. A extremidade posterior foi bifurcada. O lóbulo da cauda tinha 0,1 mm de comprimento e a razão entre o comprimento do lóbulo e a largura era 0,5. Uma abertura de cloaca foi encontrada em 1 verme macho (Fig. 1). A extremidade posterior dos vermes machos foi espiralmente matriculada e furcada em 2 lobos caudais, que eram quase cilíndricos, embora um pouco côncavos em sua superfície medio-ventral., Uma dobra crescentica pós-ecloacal (crista cuticular) não estava presente, o que significava que estes dois espécimes humanos não pertenciam ao gênero Gordius. Consequentemente, a morfologia destes vermes foi analisada em seções de tecido microscópico (Fig. 3).
a male hairworm of Parachordodes sp. vomitou de uma mulher de 80 anos. Corpo inteiro (a), parte anterior (B) e parte posterior (C).
DNA (sequência parcial 18S rRNA) foram realizadas análises utilizando a base de dados GenBank., Para análises de DNA, o worm fixado com 10% de formalina foi lavado 3 vezes usando PBS, e uma parte do worm foi cortada usando um vidro de cobertura limpo e rompido usando pestes de microtubo (Scientific Specialties Inc., Lodi, California, USA) for DNA extraction. O ADN foi extraído e purificado através de Kits de sangue e tecidos (Qiagen GmbH, Hilden, Alemanha) de acordo com as instruções do fabricante. A região Nuclear 18S de RNA ribossomal (18S rDNA) de ambos os vermes foi amplificada usando primers 3F e 9R relatados anteriormente ., A amplificação PCR foi realizada em um volume de 50 µl contendo 1 × tampão PCR, 2 mM MgCl2, 250 µM de cada dNTP, 0,5 µM de cada iniciador, 1,25 Unidades De TaKaRa Ex Taq versão Hot Start (TaKaRa Shuzo Co. Ltd., Otsu, Japão), e 3 µl de amostra de DNA. A reação PCR foi realizada sob as seguintes condições: as amostras foram desnaturadas a 95℃ por 3 minutos; em seguida, foram submetidas a 35 ciclos de 94℃ por 30 segundos, 55℃ por 30 segundos, e 72℃ por 1 minuto, com extensão final a 72℃ por 7 minutos em um termociclador (GeneAmp PCR System 9700; Applied Biosystems, Foster City, Califórnia, EUA)., Os produtos PCR foram purificados usando um Kit de purificação QIAQUICK PCR (Qiagen GmbH, Hilden, Alemanha), e foram sequenciados em ambas as direções em um sequenciador automático (ABI 3130; Applied Biosystems, Foster City, Califórnia, EUA). Os cromatogramas de sequência de cada cadeia foram inspeccionados (Sequencher versão 4.1; Gene Codes Corp., Ann Arbor, Michigan, EUA). As sequências obtidas de ambos os vermes estavam alinhadas com as sequências nucleotídeos disponíveis de outras espécies de nematomorpha usando Clustal X 2.0 (http://www.clustal.org/) com valores de parâmetros fixos iniciais., Uma árvore foi construída usando o algoritmo de junção de vizinhos baseado em distâncias evolutivas calculadas usando o modelo de 2 parâmetros Kimura com 1.000 amostras de bootstrap. A árvore resultante foi desenhada usando o software Njplot (http://pbil.univ-lyon.fr/software/njplot.html).as secções dos tecidos de
revelaram que a superfície do corpo estava coberta com uma cutícula de 25-50 µm de espessura, e revestida com hipoderme de 5-10 µm de espessura, sem cordão lateral. A camada muscular tinha 25-60 µm de espessura (Fig. 3)., As células parenquimatosas encheram o pseudocoel até uma capacidade próxima, e um cordão ventral, um trato digestivo, e um par de órgãos genitais masculinos foram identificados no parênquima. A espessura da camada muscular era de 30-80 µm e o cordão ventral era de 80×50 µm. A superfície cuticular era um pouco áspera e tinha pequenas areolas. Após a remoção dos músculos e camadas hipodérmicas dos 2 vermes dos seres humanos, a estrutura da cutícula foi encontrada para ser igual à do gênero Parachordodes sp. contém 2 tipos de areóis grandes e pequenos morfologicamente (figos. 3, ,4).4)., As pequenas areolas com grânulos são as mesmas características que Parachordodes lestici , mas diferentes das pequenas areolas de P. okadai, que tem superfície lisa. Os grandes areóis (megareóis) eram quase redondos e os do verme no caso 1 eram 23,9±2,5 (média±DP) µm de comprimento e 23,5±2,7 µm de largura, e aqueles no caso 2 eram 23,3±1,2 µm de comprimento e 23,1±1,0 µm de largura. Os megareóis são muito diferentes nestas duas espécies, P. lestici e P. okadai. Eles são quase redondos em P. lestici, mas alongados em P. okadai., Os presentes exames morfológicos de casos humanos revelam que os vermes presentes têm as características de P. lestici, e pode ser justificado para determinar como P. lestici. No entanto, os areóis (2 tipos de pequenos-areóis e megareoles) apareceram na cutícula em Figo. 4 foram muito semelhantes aos DE Schmidt-Rhaesa et al. . As características morfológicas e os tamanhos dos megareóis também eram iguais aos DE Schmidt-Rhesa et al. . Portanto, os 2 vermes do presente estudo podem ser da mesma espécie que os Parachordodes megareolatus, que foi derivado do sistema urinário humano na Coreia .,
dois tipos de pequenas areolas (s) e megareolas (m) na cutícula de Parachordodes sp. ancilostomídeos (A: baixa ampliação; B: Alta Ampliação).
os Membros da classe Gordiacea pertencem a 2 reconhecidas famílias, Gordiidae (Gordius) e Chordodidae. O primeiro tem uma cutícula suave, mas em algumas espécies de “Gordiidae areoles” também ocorrem. A cutícula no segundo grupo é áspera com areóis verdadeiros. Estes grupos subfamília incluem 18 géneros (Chordodes, Paragordius, Parachordodes, Neochordodes, Pseudogordius e outros)., Existem também outros gêneros com 2 tipos de areóis, mas característica para os Paraquedistas é que 1 tipo é muito grande e tem um poro no topo, e este tipo é chamado de superareole . Estas características dos megareóis sugerem fortemente que os vermes atuais podem ser diagnosticados como Camerano de pára-quedas, 1897 . Do Japão, 17 espécies de Nematomorpha (Gordiida) foram descritas até à data e 4 espécies de Nematomorpha também foram relatadas na Coreia .,
uma relação filogenética de acordo com o gene rRNA 18S (1414 bp) foi conduzida e os vermes atuais foram identificados como uma espécie que está geneticamente mais próxima da espécie Paragordionus (GenBank no. AF421769 e AF421770) e eram diferentes de Gordius worms (GenBank no. AF421766, GAU88337, X87985, and X80233) in a tree analysis (Fig. 5). Sequenciamento de DNA do worm dos paraquedistas não aparece no banco de dados, então mais informações sobre esta espécie são necessárias no futuro.,
Phylogenetic analyses of hairworms (class Gordiacea) from humans based on 18S rRNA (1,414 bp). A história evolutiva foi inferida usando o método de união de vizinhos (NJ). As distâncias evolucionárias foram computadas usando o método do parâmetro Kimura-2 e estão nas unidades do número de substituições de base por local. Os valores de Bootstrap são mostrados ao lado dos ramos. Um elevado valor de bootstrap 0, 988 (número de 1000 replicados) foi obtido numa junção de Paragordionus spp. e os dois vermes actuais.,
As for the invasion route, the present human cases may have accidentally swallowed insects, such as a cricket or a beetle which is an intermediate host. Os espécimes presentes são o primeiro verme de cabelo humano registrado, Parachordodes sp. no Japão.