Chalke skuespillerkarriere begynte på åtte år da hun begynte å vises i musikal-produksjoner. 12, ble hun en reporter på den Kanadiske barns vis KidZone. I 1993, hun tok over rollen til Rebecca Conner-Healy på Roseanne etter Lecy Goranson venstre serien; Chalke laget en cameo opptreden som en annen karakter i Roseanne episode av «Halloween: Siste Kapittel» (#178, som opprinnelig sendt oktober 31, 1995) etter Goranson tilbake. Chalke kom senere tilbake til rollen som Becky etter Goranson vike for andre gang., Etter showet ble avsluttet, Chalke returnerte kort til Canada, hvor hun spilte hovedrollen i CBC Tv-drama Ingenting for God for en Cowboy (1998-1999).
I 2001, hun ble kastet som Dr. Elliot Reid i NBC-komedie-serien Scrubs og hun ville bli en cast medlem for alle ni sesonger før serien ble avsluttet sitt løp i 2010. Hun har dukket opp i flere filmer, inkludert Ernest Går på Skole og Kake. Hun dukket opp i Kanal 101 ‘ s ‘Bu med Den Ensomme Øya, en parodi på treff-viser O. C., men ble kreditert som «Pamela Fenton»., I 2007, hun dukket opp som en støtte karakter i Kaos Teori, som spilte andre Kanadiske Ryan Reynolds. I 2008, Chalke ble talsperson for en linje av kvinners undertøy av Hanes, som omfattet en rekke reklamefilmer regissert av hennes Scrubs co-stjerners Zach Braff. I 2008 og 2009, har hun gjort flere opptredener i CBS-serien How i Met Your Mother som Stella Zinman. I begynnelsen av 2011, spilte hun i CBS tv-serien Mad Love, en romantisk komedie som debuterte som midseason erstatning og ble avbrutt etter bare én sesong ble produsert.,
Chalke ble undertegnet av tidligere Scrubs utøvende produsent Bill Lawrence spille kjærlighet interesse av Bobby Cobb i serien Cougar Town. Hun dukket opp i flere episoder i sesong. Chalke spilte i ABC-komedie-serien Hvordan å Leve med Foreldrene Dine (For Resten av Livet), som hadde premiere 3. April, 2013, og som ble avbrutt en måned senere. Hun spilte Polly, en enkel og veldig uptight skilt mor som fant seg å flytte tilbake til foreldrene (Elizabeth Perkins og Brad Garrett) på grunn av den økonomiske nedgangen., Også i 2013, spilte hun en fortvilet mor som heter Casey Hekker i Grey ‘ s Anatomy sesong 9. episode «Kan ikke Kjempe Denne Følelsen». Chalke også stemmer Beth på vis Rick og Morty.
28. April 2017 ble det annonsert at en vekkelse av Roseanne var i arbeid, og at de fleste av de opprinnelige skuespillerne og noen av produsentene ville komme tilbake for å gjenopplive serien. På Mai 16, 2017, ble det bekreftet at åtte episoder av showet var greenlit av ABC og ville adgang til mid-season i 2018 med Chalke tilbake, men å spille en annen rolle enn Becky Conner., Etter avbestilling, hun kom senere tilbake for sine spin-serien, Conners.