Chalkes skuespillerkarriere begyndte i en alder af otte, da hun begyndte at optræde i musikteaterproduktioner. Som 12-årig blev hun reporter på det canadiske børnesho.Kid .one. I 1993 tog hun over den rolle, Rebecca Conner-Healy på Roseanne efter Lecy Goranson forlod serien; Chalke en cameo som en anden karakter i Roseanne episode “Halloween: Det Sidste Kapitel” (#178, der oprindeligt blev udsendt 31 oktober, 1995) efter Goranson tilbage. Chalke vendte senere tilbage til rollen som Becky, efter at Goranson rejste for anden gang., Efter Sho .ets afslutning vendte Chalke kort tilbage til Canada, hvor hun medvirkede i CBC-TV-dramaet Nothing Too Good for a co .boy (1998-1999).
i 2001 blev hun rollebesat som Dr. Elliot Reid i NBC-komedieserien Scrubs, og hun ville være rollebesætningsmedlem i alle ni sæsoner, indtil serien sluttede sin løb i 2010. Hun har optrådt i flere spillefilm, herunder Ernest går i skole og kage. Hun optrådte i Channel 101 ‘s The’ bu withith The Lonely Island, en parodi på hitsho .et The O. C., men blev krediteret som “Pamela Fenton”., I 2007 optrådte hun som en støttende karakter i Chaos Theory, der medvirkede med Canadiske Ryan Reynolds. I 2008 blev Chalke talsmand for en linje af kvinders undertøj af Hanes, der omfattede en række reklamer instrueret af hendes Scrubs co-star .ach Braff. I 2008 og 2009 optrådte hun i CBS sitcom Ho.I Met Your Mother som Stella .inman. I begyndelsen af 2011, hun medvirkede i CBS tv-serien Mad Love, en romantisk komedie, der debuterede som en midseason udskiftning og blev aflyst efter kun wasn sæson blev produceret.,
Chalke blev underskrevet af tidligere Scrubs executive producer Bill Lawrence til at spille den kærlighed, interesse for Bobby Cobb i serien ” Cougar Town. Hun optrådte i flere episoder i den tredje sæson. Chalke medvirkede i ABC-komedieserien ho.to Live withith your Parents (resten af dit liv), som havde premiere 3. April 2013, og som blev annulleret en måned senere. Hun spillede Polly, en enkelt og meget uptight fraskilt mor, der fandt sig selv at flytte tilbage med sine forældre (Eli .abeth Perkins og Brad Garrett) på grund af den økonomiske afmatning., Også i 2013 spillede hun en hektisk mor ved navn Casey Hedges i Grey ‘ s Anatomy sæson 9 episode “Can’ t Fight This Feeling”. Chalke stemmer også Beth på Sho .et Rick og Morty.den 28. April 2017 blev det annonceret, at en genoplivning af Roseanne var i værkerne, og at de fleste af de originale rollebesætninger og nogle af producenterne ville vende tilbage til genoplivningsserien. På Maj 16, 2017, blev det bekræftet, at otte episoder af showet var grønt lys af ABC og aircondition midt i sæsonen i 2018 med Chalke at vende tilbage, men spille en anden rolle end Becky Conner., Efter annulleringen, hun vendte senere tilbage til sin spinoff-serie, Conners.