PMC (Polski)

Nematomorpha to Klad zwierząt, który został słabo zbadany. Pomimo ich ogólnoświatowej dystrybucji, szczegółowe cykle życia Nematomorpha nie zostały w pełni udokumentowane . Parachordodes lub Gordius robaki należą do kladu nematomorpha (Gordiida, Gordioidea)., Dorosłe Parachordody (Chordodidae: Parachordodinae), Gordius (Gordiidae) lub rodzaje z podrodziny Chordodinae (Chordodidae), powszechnie znane jako robaki włosowate, są wolnymi żyjącymi mieszkańcami słodkowodnymi, a ich larwy są najpierw wolnymi żyjącymi, a następnie infekują żywicieli pośrednich. Kiedy żywiciele pośrednimi są zjadani przez żywicieli końcowych, larwy rozwijają się do młodych i dorastają do dorosłych rozmiarów. U Gordiidae i Parachordodinae koniec ogonowy samca jest rozwidlony lub ma rowek grzbietowo-środkowy, ale nie u Chordodinae., Parachordodes lub Gordius robaki mają pasożytnicze stadia larwalne, a gospodarzami końcowymi są modliszki i niektóre mięsożerne lub wszystkożerne gatunki Orthoptera (Acrididae: koniki polne, Gryllidae: świerszcze, itp.) i Coleoptera (Carabidae: chrząszcze naziemne).

zapisy przypadkowego pasożytnictwa człowieka z Parachordodes, Paragordius lub Gordius są rzadkie w literaturze, chociaż wiele z nich zidentyfikowano w różnych częściach świata na podstawie okazów znalezionych z jamy ustnej, cewki moczowej i odbytu . Sześć ludzkich przypadków Gordius Sp. zostały zgłoszone w Japonii ., W tych przypadkach robaki były wymiotowane i wydalane z kałem i z odbytu. W Korei odnotowano również ludzki przypadek robaka Gordius znalezionego w wymiotach i inny przypadek robaka Parachordodes znalezionego w układzie moczowym . Ponadto w Japonii odnotowano co najmniej 13 gatunków słodkowodnych Nematomorpha . Dodatkowo, niektóre lub nowe zapisy Nematomorpha u owadów zostały niedawno zgłoszone z prefektur Shiga, Niigata, Nara, Gifu, Kioto i Fukuoka w Japonii, a dane molekularne i morfologiczne zostały wykorzystane do analizy systematycznego związku Nematomorpha ., Z rodzaju Parachordodes w Japonii opisano 2 gatunki: Parachordodes okadai i P. lestici .

niniejszy raport dotyczy gatunku robaka włosowatego pobranego z instytutów laboratoryjnych w listopadzie i grudniu 2009 r., z których jeden został zwymiotowany od 80-letniej kobiety, a drugi został pobrany z ust 1-letniego chłopca przez jego matkę. Badani mieszkali w mieście Kioto w prefekturze Kioto oraz w mieście Nara w prefekturze Nara w Japonii. Kobieta zwymiotowała robaka po płukaniu gardła roztworem soli fizjologicznej, gdy czuła, że coś zostało złapane w jej gardle, gdy leżała w łóżku., Robak przed badaniem był przechowywany w 10% formalinie. Jadła warzywa zbierane z prywatnego ogrodu. Drugi robak z ust chłopca został usunięty przez matkę. Oba robaki zbadano gołym okiem i mikroskopowo. Miały one typowe cechy morfologiczne robaków nematomorficznych. Osobniki mierzyły 13 cm i 12,5 cm długości, a obie miały jednolitą szerokość około 0,1 cm(figi. 1, ,2).2). Ciała obu były czarno-brązowe z pierścieniem szyi (ciemna pigmentacja), ale bez linii brzusznej ani linii grzbietowej w naskórku w zachowanym stanie (Fig. 1, ,2).,2). Ciało było cylindryczne i miało taką samą średnicę na całej długości, choć nieco zwężało się przednio. Przedni koniec był zaokrąglony z otworem gębowym. Tylny koniec był rozwidlony. Płaty ogonowe miały długość 0,1 mm, a stosunek długości płata do szerokości wynosił 0,5. Otwór kloaki znaleziono u 1 samca robaka (rys. 1). Tylny koniec samca był spiralnie zakończony i podzielony na dwa płaty ogonowe, które były prawie cylindryczne, choć nieco wklęsłe na ich powierzchni przyśrodkowo-brzusznej., Nie stwierdzono postkloakalnego fałdu krezcentowego, co oznaczało, że te 2 ludzkie okazy nie należały do rodzaju Gordius. W związku z tym morfologię tych robaków analizowano w świetle mikroskopowo na odcinkach tkanek (rys. 3).

Fryzjerstwo Męskie Parachordodes Sp. z o. o. zwymiotował od 80-letniej kobiety. Całe ciało (A), część przednia (B) I część tylna (C).

analizy DNA (Sekwencja częściowa 18s rRNA) przeprowadzono przy użyciu bazy danych GenBank., Do analizy DNA robak zamocowany 10% formaliną był myty 3 razy za pomocą PBS, A część robaka przecięto za pomocą czystej pokrywy szklanej i rozerwano za pomocą pestek mikrotube (Scientific Specialties Inc., Lodi, Kalifornia, USA) do ekstrakcji DNA. DNA zostało ekstrahowane i oczyszczone za pomocą zestawów Dneasy do krwi i tkanek (Qiagen GmbH, Hilden, Niemcy) zgodnie z instrukcjami producenta. Nuklearny region rybosomalnego RNA genu 18S (18S rDNA) obu robaków został amplifikowany przy użyciu wcześniej opisanych primerów 3F i 9R ., Amplifikację PCR przeprowadzono w objętości 50 µl zawierającej 1 × bufor PCR, 2 mM MgCl2, 250 µM każdego dNTP, 0,5 µM każdego podkładu, 1,25 jednostki Takara Ex Taq Hot Start Version (TaKaRa Shuzo Co. Ltd., Otsu, Japonia) oraz 3 µl próbki DNA. Reakcję PCR przeprowadzono w następujących warunkach: próbki denaturowano przy 95℃ przez 3 minuty; następnie poddano je 35 cyklom 94℃ przez 30 sekund, 55℃ przez 30 sekund i 72℃ przez 1 min, z końcowym przedłużeniem przy 72℃ przez 7 min na termocyklerze (System GeneAmp PCR 9700; Applied Biosystems, Foster City, Kalifornia, USA)., Produkty PCR zostały oczyszczone za pomocą zestawu do oczyszczania PCR QIAquick (Qiagen GmbH, Hilden, Niemcy) i były sekwencjonowane w obu kierunkach za pomocą zautomatyzowanego sekwencera (ABI 3130; Applied Biosystems, Foster City, Kalifornia, USA). Sprawdzono chromatogramy sekwencyjne z każdej nici (Sequencher Version 4.1; Gene Codes Corp., Ann Arbor, Michigan, USA). Sekwencje uzyskane z obu robaków zostały wyrównane z dostępnymi sekwencjami nukleotydów innych gatunków nematomorfów przy użyciu Clustal x 2.0 (http://www.clustal.org/) z początkowymi stałymi wartościami parametrów., Drzewo zostało skonstruowane przy użyciu algorytmu łączenia sąsiada opartego na odległościach ewolucyjnych obliczonych przy użyciu modelu 2-parametrowego Kimura z próbkowaniem 1000 bootstrap. Wynikowe drzewo zostało narysowane przy użyciu oprogramowania Njplot (http://pbil.univ-lyon.fr/software/njplot.html).

powierzchnia ciała pokryta była skórką o grubości 25-50 µm i pokryta jednowarstwową hipodermą o grubości 5-10 µm bez sznura bocznego. Warstwa muskularna miała grubość 25-60 µm (rys. 3)., Komórki miąższowe wypełniły pseudokoel do bliskiej pojemności, a w miąższu zidentyfikowano rdzeń nerwowy, przewód pokarmowy i parę męskich narządów płciowych. Grubość warstwy mięśniowej wynosiła 30-80 µm, a brzuszny przewód nerwowy 80×50 µm. Powierzchnia naskórka była nieco szorstka i miała niewielkie areole. Po usunięciu mięśni i podskórnej warstwy 2 robaków z ludzi, struktura naskórka okazała się być równa strukturze rodzaju Parachordodes sp. zawierający morfologicznie 2 rodzaje areoli dużych i małych (Fig. 3, ,4).4)., Małe areole z granulkami mają te same cechy co Parachordodes lestici, ale różnią się od małych areoli P. okadai , które mają gładką powierzchnię. Duże areole (megareole) były prawie okrągłe, a te robaka w przypadku 1 miały 23,9±2,5 (Średnia±SD) µm długości i 23,5±2,7 µm szerokości, a te w przypadku 2 miały 23,3±1,2 µm długości i 23,1±1,0 µm szerokości. Megareole są bardzo różne w tych 2 gatunkach, P. lestici i P. okadai. Są prawie okrągłe u P. lestici, ale wydłużone u p. okadai., Obecne badania morfologiczne ludzkich przypadków ujawniają, że obecne robaki mają cechy P. lestici i mogą być uzasadnione do określenia jako P. lestici. Jednak areole (2 rodzaje małych rozmiarów-areole i megareole) pojawiły się na naskórku na Rys. 4 były bardzo podobne do tych w Schmidt – Rhaesa et al. . Cechy morfologiczne i rozmiary megareoli były również równe tym u Schmidta – Rhaesa et al. . W związku z tym 2 robaki w niniejszym badaniu mogą być tym samym gatunkiem, co Parachordodes megareolatus, który został pozyskany z ludzkiego układu moczowego w Korei .,

Członkowie klasy Gordiacea należą do 2 uznanych rodzin, Gordiidae (Gordius) i Chordodidae. Ten pierwszy ma gładki naskórek, ale u niektórych gatunków Gordiidae występują również areole. Naskórek w drugiej grupie jest szorstki z prawdziwymi areolami. Podrodzina obejmuje 18 rodzajów (Chordodes, Paragordius, Parachordodes, Neochordodes, Pseudogordius i inne)., Istnieją również inne rodzaje z 2 rodzajami areoli, ale charakterystyczne dla Parachordodes jest to, że 1 Rodzaj jest bardzo duży i ma pory na wierzchu, a rodzaj ten nazywa się superareole . Te cechy megareoles silnie sugerują, że obecne robaki można zdiagnozować jako Parachordodes Camerano, 1897 . Z Japonii opisano dotychczas 17 gatunków Nematomorpha (Gordiida), a 4 gatunki Nematomorpha odnotowano także w Korei .,

przeprowadzono pokrewieństwo filogenetyczne według genu 18s rRNA (1414 bp), a obecne robaki zidentyfikowano jako gatunek genetycznie bliższy gatunkowi Paragordionus (GenBank no. AF421769 i AF421770) i były różne od Gordius worms (GenBank no. AF421766, GAU88337, X87985 i X80233) w analizie drzewa (rys. 5). Sekwencjonowanie DNA robaka Parachordodes nie pojawia się w bazie danych, więc więcej informacji na temat tego gatunku jest wymagane w przyszłości.,

jeśli chodzi o drogę inwazji, obecne przypadki człowieka mogły przypadkowo połknąć owady, takie jak świerszcz lub chrząszcz, który jest żywicielem pośrednim. Obecne okazy to pierwszy odnotowany ludzki robak włosowy, Parachordodes sp. w Japonii.