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Nematomorpha ist ein Stamm von Tieren, der schlecht untersucht wurde. Trotz ihrer weltweiten Verbreitung wurden detaillierte Lebenszyklen von Nematomorpha nicht vollständig dokumentiert . Parachordoden oder Gordiuswürmer gehören zum Phylum Nematomorpha (Gordiida, Gordioidea)., Erwachsene von Parachordoden (Chordodidae: Parachordodinae), Gordius (Gordiidae) oder die Gattungen der Unterfamilie Chordodinae (Chordodidae), auch allgemein als Haarwürmer bekannt, sind freilebende Süßwasserbewohner, und ihre Larven sind zuerst freilebende und dann infizieren Zwischenwirte. Wenn Zwischenwirte von den Endwirten gefressen werden, entwickeln sich Larven zu Jungtieren und werden erwachsen. Das schwanzende Ende des Männchens ist entweder gegabelt oder hat eine dorsoventrale Rille in Gordiidae und Parachordodinae, aber nicht in Chordodinae., Parachordoden oder Gordiuswürmer haben parasitäre Larvenstadien, und zu den letzten Wirten gehören die Gottesanbeterin und einige fleischfressende oder allesfressende Arten von Orthoptera (Acrididae: Heuschrecken, Gryllidae: Grillen usw.) und Coleoptera (Carabidae: Laufkäfer).

Aufzeichnungen über menschlichen versehentlichen Parasitismus mit Parachordoden, Paragordius oder Gordius sind in der Literatur ungewöhnlich, obwohl viele in verschiedenen Teilen der Welt aus Proben aus Mund, Harnröhre und Anus identifiziert wurden . Sechs menschliche Fälle von Gordius sp. wurden in Japan berichtet ., In diesen Fällen wurden Würmer erbrochen und im Kot und aus dem Anus ausgeschieden. Ein menschlicher Fall eines Gordiuswurms, der im Erbrochenen gefunden wurde, und ein anderer Fall eines Fallschirmwurms, der im Harnsystem gefunden wurde, wurden ebenfalls in Korea berichtet . Darüber hinaus wurden in Japan bisher mindestens 13 Arten von Süßwassernematomorphen registriert . Darüber hinaus wurden kürzlich einige oder neue Aufzeichnungen über Nematomorpha bei Insekten aus den Präfekturen Shiga, Niigata, Nara, Gifu, Kyoto und Fukuoka in Japan berichtet, und molekulare und morphologische Daten wurden verwendet, um die systematische Beziehung von Nematomorpha zu analysieren ., Von der Gattung Parachordodes wurden in Japan 2 Arten berichtet: Parachordodes okadai und P. lestici .

Der vorliegende Bericht befasst sich mit einer im November und Dezember 2009 von Laborinstituten gesammelten Haarwurmart, von der einer von einer 80-jährigen Frau erbrochen und der andere von seiner Mutter aus dem Mund eines 1-jährigen Jungen gesammelt wurde. Die Probanden lebten in Kyoto city, Präfektur Kyoto und Nara city, Nara Prefecture, Japan. Die Frau erbrach sich einen Wurm, nachdem sie mit einer Salzlösung gurgelte, als sie fühlte, dass etwas in ihrem Hals gefangen war, während sie im Bett lag., Der Wurm wurde vor der Untersuchung in 10% Formalin konserviert. Sie hatte Gemüse aus einem privaten Garten geerntet gegessen. Der andere Wurm aus dem Mund eines Jungen wurde von seiner Mutter entfernt. Beide Würmer wurden mit bloßem Auge und mikroskopisch untersucht. Sie hatten die typischen morphologischen Merkmale von nematomorphen Würmern. Die Proben maßen 13 cm und 12,5 cm in der Länge und beide hatten eine einheitliche Breite von etwa 0,1 cm (Abb. 1, ,2).2). Die Körper beider waren schwarzbraun mit einem Halsring (dunkle Pigmentierung), jedoch ohne ventrale Linie oder dorsale Linie in der Nagelhaut im erhaltenen Zustand (Abb. 1, ,2).,2). Der Körper war zylindrisch und hatte entlang seiner gesamten Ausdehnung den gleichen Durchmesser, obwohl er sich etwas nach vorne verengte. Das vordere Ende war mit einer Mundöffnung abgerundet. Das hintere Ende wurde gegabelt. Die Schwanzlappen waren 0,1 mm lang und das Verhältnis der Länge des Lappens zur Breite betrug 0,5. Eine Kloakaöffnung wurde bei 1 männlichen Wurm gefunden (Abb. 1). Das hintere Ende der männlichen Würmer wurde spiralförmig eingeschrieben und in 2 Schwanzlappen furziert, die fast zylindrisch waren, wenn auch etwas konkav auf ihrer medioventralen Oberfläche., Eine postcloakale crescentische Falte (kutikulärer Grat) war nicht vorhanden, was bedeutete, dass diese 2 menschlichen Exemplare nicht zur Gattung Gordius gehörten. Dementsprechend wurde die Morphologie dieser Würmer an Gewebeabschnitten lichtmikroskopisch analysiert (Abb. 3).

Ein männlicher Haarwurm von Parachordodes sp. erbrochenes von einer 80-jährigen Frau. Ganzer Körper (A), vorderer Teil (B) und hinterer Teil (C).

DNA (18S rRNA partielle Sequenz) – Analysen wurden durchgeführt, mit der GenBank-Datenbank., Für DNA-Analysen wurde der mit 10% Formalin fixierte Wurm dreimal mit PBS gewaschen, und ein Teil des Wurms wurde mit einem sauberen Deckglas geschnitten und mit Microtube Pestles (Scientific Specialties Inc., Lodi, Kalifornien, USA) zur DNA-Extraktion. Die DNA wurde mittels DNeasy Blut-und Gewebekits (Qiagen GmbH, Hilden, Deutschland) gemäß den Anweisungen des Herstellers extrahiert und gereinigt. Die nukleare 18S ribosomale RNA-Gen (18S rDNA) – Region beider Würmer wurde mit 3F-und 9R-Primern amplifiziert, über die zuvor berichtet wurde ., PCR-Amplifikation erfolgte in einem Volumen von 50 µl mit 1×PCR-Puffer, 2 mM MgCl2, 250 µM von jedem dNTP, 0,5 µM von jedem primer, 1.25 Einheiten von TaKaRa Ex Taq Hot Start Version (TaKaRa Shuzo Co. Ltd., Otsu, Japan), und 3 µl DNA-Probe. PCR-Reaktion wurde unter folgenden Bedingungen durchgeführt: Proben wurden bei 95℃ für 3 min denaturiert; dann wurden sie 35 Zyklen von 94℃ für 30 sec, 55℃ für 30 sec und 72℃ für 1 min unterworfen, mit endgültiger Verlängerung bei 72℃ für 7 min auf einem Thermocycler (GeneAmp PCR System 9700; Applied Biosystems, Foster City, Kalifornien, USA)., Die PCR-Produkte wurden mit einem QIAquick PCR Purification Kit (Qiagen GmbH, Hilden, Deutschland) gereinigt und in beide Richtungen auf einem automatisierten Sequenzer sequenziert (ABI 3130; Applied Biosystems, Foster City, Kalifornien, USA). Sequenz-Chromatogramme von jeder Strang geprüft wurden (Sequencher Version 4.1; Gene Codes Corporation, Ann Arbor, Michigan, USA). Die von beiden Würmern erhaltenen Sequenzen wurden mit den verfügbaren Nukleotidsequenzen anderer Nematomorphe-Spezies unter Verwendung von Clustal X 2.0 (http://www.clustal.org/) mit anfänglichen festen Parameterwerten ausgerichtet., Ein Baum wurde unter Verwendung des Nachbarverbindungsalgorithmus basierend auf evolutionären Entfernungen konstruiert, die mit dem Kimura 2-Parameter-Modell mit 1.000 Bootstrap-Sampling berechnet wurden. Der resultierende Baum wurde mit Njplot Software gezeichnet (http://pbil.univ-lyon.fr/software/njplot.html).

Gewebeabschnitte zeigten, dass die Körperoberfläche mit einer Kutikula von 25-50 µm Dicke bedeckt und mit einem Monoschicht-Hypoderm von 5-10 µm Dicke ohne laterale Schnur ausgekleidet war. Die Muskelschicht war 25-60 µm dick (Abb. 3)., Parenchymatöse Zellen füllten den Pseudocoel nahezu vollständig, und ein ventrales Nervenmark, ein Verdauungstrakt und ein Paar männlicher Geschlechtsorgane wurden im Parenchym identifiziert. Die Dicke der Muskelschicht betrug 30-80 µm und das ventrale Nervenmark 80×50 µm. Die Nagelhaut war etwas rau und hatte kleine Areolen. Nach Entfernung der Muskel – und Hypodermisschichten der 2 Würmer vom Menschen wurde festgestellt, dass die Struktur der Kutikula der der Gattung Parachordodes sp entspricht. enthält 2 Arten von großen und kleinen Areolen morphologisch (Abb. 3, ,4).4)., Die kleinen Areolen mit Granulat haben die gleichen Eigenschaften wie Parachordodes lestici , unterscheiden sich jedoch von den kleinen Areolen von P. okadai, die eine glatte Oberfläche haben. Die großen Areole (Megareole) waren fast rund und die der Schnecke in Fall 1 waren 23,9±2,5 (Mittelwert±2,5) µm in der Länge und 23,5±2,7 µm in der Breite, und die in Fall 2 waren 23,3±1,2 µm in der Länge und 23,1±1,0 µm in der Breite. Die Megarolen sind sehr unterschiedlich in diesen 2 Arten, P. lestici und P. okadai. Sie sind fast rund in P. lestici, aber verlängern sich in P. okadai., Die vorliegenden morphologischen Untersuchungen von menschlichen Fällen zeigen, dass die vorliegenden Würmer die Eigenschaften von P. lestici haben und gerechtfertigt sein könnten, als P. lestici zu bestimmen. Die Areolen (2 Arten von kleinen Areolen und Megarolen) erschienen jedoch auf der Nagelhaut in Abb. 4 waren sehr ähnlich mit denen in Schmidt-Rhaesa et al. . Die morphologischen Eigenschaften und Größen von Megareolen waren auch gleich denen in Schmidt-Rhaesa et al. . Daher können die 2 Würmer in der vorliegenden Studie dieselbe Art sein wie Parachordodes megareolatus, der aus dem menschlichen Harnsystem in Korea stammt .,

Mitglieder der Klasse Gordiacea gehören zu 2 anerkannten Familien, Gordiidae (Gordius) und Chordodidae. Ersteres hat eine glatte Kutikula, aber bei einigen Arten von Gordiidae kommen auch Areolen vor. Die Nagelhaut in der zweiten Gruppe ist rau mit echten Areolen. Diese Unterfamiliengruppen umfassen 18 Gattungen (Chordoden, Paragordius, Parachordoden, Neochordoden, Pseudogordius und andere)., Es gibt auch andere Gattungen mit 2 Arten von Areolen, aber charakteristisch für Parachordoden ist, dass 1 Typ sehr groß ist und eine Pore oben hat, und dieser Typ wird Superareole genannt . Diese Eigenschaften von Megarolen deuten stark darauf hin, dass die vorliegenden Würmer als Parachordodes Camerano, 1897 diagnostiziert werden können . Aus Japan wurden bisher 17 Arten von Nematomorpha (Gordiida) und 4 Arten von Nematomorpha in Korea beschrieben .,

Es wurde eine phylogenetische Beziehung nach dem 18S rRNA-Gen (1,414 bp) durchgeführt und die vorliegenden Würmer wurden als eine Art identifiziert, die genetisch näher an Paragordionus-Arten ist (GenBank Nr. AF421769 und AF421770) und unterschieden sich von Gordius worms (GenBank Nr. AF421766, GAU88337, X87985 und X80233) in einer Baumanalyse (Abb. 5). Die DNA-Sequenzierung des Fallschirmwurms erscheint nicht in der Datenbank, daher sind in Zukunft weitere Informationen zu dieser Art erforderlich.,

Was den Invasionsweg betrifft, so können die vorliegenden menschlichen Fälle versehentlich Insekten wie eine Grille oder einen Käfer verschluckt haben, der ein Zwischenwirt ist. Die vorliegenden Exemplare sind der erste aufgezeichnete Menschenhaarwurm, Parachordodes sp. in Japan.