Strukturní biochemie / enzymový katalytický mechanismus / integrální membránový Protein

mnoho proteinů se může pohybovat bočně v rovině dvojvrstvy. Jeden experiment používá k ukazují, jednalo fixační kultivovaných myších buněk lidské buňky za vhodných podmínek tvořit hybridní buňky známé jako heterokaryon. Myší buňky byly označeny myší bílkoviny-specifické protilátky, na které zelený fluoreskující barvivo fluorescein byl kovalentně připojen, zatímco lidské buňky byly označeny červené fluoreskující barvivo rhodamine., Po buněčné fúzi byly myší a lidské proteiny, jak je vidět pod fluorescenčním mikroskopem, segregovány na obou polovinách heterokaryonu. Po 40 minutách při 37oC se však myš a lidský protein zcela prolínaly. Snížení teploty pod 15oC inhibuje tento proces, což znamená, že proteiny jsou volně difundují laterálně v membráně, a že tento pohyb je zpomalen, protože teplota je snížena., Je však třeba poznamenat, že některé integrální membránové proteiny se nemohou pohybovat bočně v membráně, protože interagují s cytoskeletem uvnitř buňky.

distribuce proteinů v membránách může být odhalena elektronovou mikroskopií pomocí techniky zmrazení a zlomeniny. V této technice se membránový vzorek rychle zmrazí na teplotu kapalného dusíku a pak se zlomí ostrým úderem. Dvojvrstvý se často rozděluje na monolayery a odhaluje interiér., Exponovaný povrch je pak potažen filmem uhlíku a zastíněn platinou, aby byl povrch viděn v elektronovém mikroskopu. Frakturovaný povrch membrány je odhalen, že má četné náhodně distribuované výčnělky, které odpovídají integrálním membránovým proteinům.

Share

Napsat komentář

Vaše e-mailová adresa nebude zveřejněna. Vyžadované informace jsou označeny *