Biochimie structurală / mecanism catalitic enzimatic / proteină membrană integrală

multe proteine sunt libere să se miște lateral în planul bistrat. Un experiment folosit pentru a arăta acest lucru a implicat fuziunea celulelor de șoarece cultivate cu celulele umane în condiții adecvate pentru a forma o celulă hibridă cunoscută sub numele de heterokaryon. Celulele de șoarece au fost etichetate cu anticorpi specifici proteinei de șoarece la care fluoresceina colorantului Fluorescent verde a fost atașată covalent, în timp ce celulele umane au fost etichetate cu rhodamina colorantului fluorescent roșu., După fuziunea celulară, șoarecele și proteinele umane, așa cum se văd sub microscopul fluorescent, au fost separate pe cele două jumătăți ale heterokarionului. După 40 de minute la 37oC, totuși, șoarecele și proteina umană s-au amestecat complet. Scăderea temperaturii sub 15oC a inhibat acest proces, indicând faptul că proteinele sunt libere să difuzeze lateral în membrană și că această mișcare este încetinită pe măsură ce temperatura este scăzută., Trebuie remarcat, totuși, că unele proteine membranare integrale nu sunt libere să se miște lateral în membrană, deoarece interacționează cu citoscheletul din interiorul celulei.distribuția proteinelor în membrane poate fi dezvăluită prin microscopie electronică folosind tehnica de fractură prin îngheț. În această tehnică, o probă de membrană este înghețată rapid la temperatura azotului lichid și apoi fracturată printr-o lovitură ascuțită. Bistratul se împarte adesea în monostraturi, dezvăluind interiorul., Suprafața expusă este apoi acoperită cu o peliculă de carbon și umbrită cu platină pentru ca suprafața să fie văzută în microscopul electronic. Suprafața fracturată a membranei este dezvăluită a avea numeroase protuberanțe distribuite aleatoriu care corespund proteinelor membranare integrale.

Share

Lasă un răspuns

Adresa ta de email nu va fi publicată. Câmpurile obligatorii sunt marcate cu *