Strukturell biokemi / Enzymkatalytisk mekanism / Integralmembranprotein

många proteiner är fria att röra sig i sidled i bilagrets plan. Ett experiment som används för att visa detta involverade fusing odlade musceller med mänskliga celler under lämpliga förhållanden för att bilda en hybridcell som kallas en heterokaryon. Muscellerna märktes med musproteinspecifika antikroppar till vilka det gröna fluorescerande färgämnet fluorescein hade kovalent fästs, medan de mänskliga cellerna märktes med det röda fluorescerande färgämnet rhodamin., Vid cellfusion segregerades mus-och humanproteinerna under fluorescensmikroskopet på de två halvorna av heterokaryon. Efter 40 minuter vid 37oC hade dock mus och humant protein helt blandat sig. Sänka temperaturen till under 15oC hämmade denna process, vilket indikerar att proteinerna är fria att diffundera i sidled i membranet och att denna rörelse saktas när temperaturen sänks., Det bör dock noteras att vissa integrerade membranproteiner inte är fria att röra sig i sidled i membranet eftersom de interagerar med cytoskelettet inuti cellen.

fördelningen av proteiner i membran kan avslöjas genom elektronmikroskopi med hjälp av frysfrakturtekniken. I denna teknik fryses ett membranprov snabbt till temperaturen av flytande kväve och bryts sedan av ett skarpt slag. Bilayern delar ofta i monolayers, vilket avslöjar inredningen., Den exponerade ytan är sedan belagd med en film av kol och skuggad med platina för att ytan ska ses i elektronmikroskopet. Den brutna ytan av membranet avslöjas att ha många slumpmässigt fördelade utskjutningar som motsvarar integrerade membranproteiner.

Share

Lämna ett svar

Din e-postadress kommer inte publiceras. Obligatoriska fält är märkta *