Szerkezeti Biokémia / enzim katalitikus mechanizmus / szerves membránfehérje

sok fehérje szabadon mozoghat oldalirányban a kétrétegű síkjában. Az egyik kísérlet azt mutatta, hogy a tenyésztett egérsejteket megfelelő körülmények között emberi sejtekkel egyesítik, hogy heterokaryonként ismert hibrid sejtet képezzenek. Az egérsejteket egérfehérje-specifikus antitestekkel jelölték meg, amelyekhez a fluoreszcein zöld fluoreszcens festék kovalensen kapcsolódott, míg az emberi sejteket vörös fluoreszkáló festékkel, rodaminnal címkézték., A sejtfúzió során a fluoreszcens mikroszkóp alatt látható egeret és emberi fehérjéket a heterokarion két felén elkülönítették. A 37oc-os 40 perc után azonban az egér és az emberi fehérje teljesen összekeveredett. A hőmérséklet 15oc alá csökkentése gátolta ezt a folyamatot, jelezve, hogy a fehérjék szabadon diffundálhatnak oldalirányban a membránban, és hogy ez a mozgás lelassul, amikor a hőmérséklet csökken., Meg kell azonban jegyezni, hogy egyes szerves membránfehérjék nem szabadon mozoghatnak oldalirányban a membránban, mert kölcsönhatásba lépnek a sejt belsejében lévő citoszkeletonnal.

a fehérjék membránokban való eloszlását elektronmikroszkóppal lehet kimutatni a fagyasztási törés technikájával. Ebben a technikában a membránmintát gyorsan fagyasztják a folyékony nitrogén hőmérsékletére, majd éles ütéssel törik meg. A kétrétegű gyakran monolayerekre oszlik, feltárva a belső teret., A kitett felületet ezután bevonjuk egy szénréteggel, majd platinával árnyékoljuk, hogy a felület az elektronmikroszkópban megtekinthető legyen. Kiderült, hogy a membrán törött felülete számos véletlenszerűen elosztott kiemelkedéssel rendelkezik, amelyek megfelelnek az integrált membránfehérjéknek.

Share

Vélemény, hozzászólás?

Az email címet nem tesszük közzé. A kötelező mezőket * karakterrel jelöltük