Structurele Biochemie / Enzymkatalytisch mechanisme/integraal membraaneiwit

veel eiwitten kunnen lateraal bewegen in het vlak van de tweelaag. Één experiment dat wordt gebruikt om dit te tonen impliceerde het fuseren van gekweekte muiscellen met menselijke cellen onder aangewezen voorwaarden om een hybride cel te vormen die als heterokaryon wordt bekend. De muiscellen werden geëtiketteerd met muisproteïne-specifieke antilichamen waaraan de groen-fluorescerende kleurstof fluoresceïne covalent was bevestigd, terwijl de menselijke cellen werden geëtiketteerd met de rood-fluorescerende kleurstof rhodamine., Bij celfusie, werden de muis en de menselijke proteã nen zoals gezien onder de fluorescentiemicroscoop gescheiden op de twee helften van heterokaryon. Na 40 minuten bij 37oC waren de muis en het menselijke eiwit echter volledig vermengd. Het verlagen van de temperatuur tot onder 15oC remde dit proces, erop wijzend dat de proteã nen vrij zijn om zijdelings in het membraan te verspreiden en dat deze beweging wordt vertraagd aangezien de temperatuur wordt verlaagd., Men zou moeten opmerken, hoewel, dat sommige integrale membraanproteã nen niet vrij zijn om zich laterally in het membraan te bewegen omdat zij met cytoskeleton binnen de cel in wisselwerking staan.

de verdeling van eiwitten in membranen kan worden aangetoond door elektronenmicroscopie met behulp van de vriesfractuur-techniek. In deze techniek,wordt een membraanspecimen snel bevroren aan de temperatuur van vloeibare stikstof en dan gebroken door een scherpe slag. De dubbellaag splitst zich vaak in monolagen, waardoor het interieur wordt onthuld., Het blootgestelde oppervlak wordt dan bedekt met een koolstoffilm en in de schaduw gesteld met platina, zodat het oppervlak met de elektronenmicroscoop kan worden bekeken. De gebroken oppervlakte van het membraan wordt geopenbaard om talrijke willekeurig verspreide uitsteeksels te hebben die aan integrale membraanproteã nen overeenstemmen.

Share

Geef een reactie

Het e-mailadres wordt niet gepubliceerd. Vereiste velden zijn gemarkeerd met *