Bioquímica estrutural/mecanismo catalítico enzimático/proteína Integral de membrana

muitas proteínas são livres de se moverem lateralmente no plano da camada intermédia. Um experimento usado para mostrar isso envolveu a fusão de células cultivadas de ratos com células humanas em condições apropriadas para formar uma célula híbrida conhecida como um heterokaryon. As células do rato foram rotuladas com anticorpos específicos da proteína do rato aos quais o corante fluorescente verde fluoresceína tinha sido covalentemente ligado, enquanto as células humanas foram rotuladas com o corante vermelho fluorescente rodamina., Após a fusão celular, as proteínas do rato e do homem, como vistas no microscópio de fluorescência, foram segregadas nas duas metades do heterokaryon. Após 40 minutos a 37oC, no entanto, o rato e a proteína humana tinham-se misturado completamente. A redução da temperatura para menos de 15oC inibiu este processo, indicando que as proteínas são livres de se difundirem lateralmente na membrana e que este movimento é abrandado à medida que a temperatura é baixada., Deve-se notar, no entanto, que algumas proteínas integrais da membrana não são livres de se mover lateralmente na membrana porque interagem com o citoesqueleto dentro da célula.

a distribuição de proteínas nas membranas pode ser revelada por microscopia electrónica utilizando a técnica de fractura por congelação. Nesta técnica, uma amostra de membrana é rapidamente congelada à temperatura de nitrogênio líquido e, em seguida, fracturada por um golpe afiado. O bilayer muitas vezes se divide em monolayers, revelando o interior., A superfície exposta é então revestida com uma película de carbono e sombreada com platina, a fim de que a superfície seja vista no microscópio eletrônico. A superfície fracturada da membrana é revelada como tendo numerosas protuberâncias distribuídas aleatoriamente que correspondem às proteínas integrais da membrana.

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