Biochemia strukturalna/Mechanizm katalityczny enzymu/integralne białko błonowe

wiele białek może swobodnie poruszać się bocznie w płaszczyźnie dwuwarstwy. Jeden eksperyment użyty do pokazania tego polegał na łączeniu hodowanych komórek myszy z ludzkimi komórkami w odpowiednich warunkach, aby utworzyć hybrydową komórkę znaną jako heterokaryon. Komórki myszy oznaczano przeciwciałami specyficznymi dla białka myszy, do których przyczepiono barwnik fluoresceiny z zieloną fluorescencją, podczas gdy ludzkie komórki oznaczano barwnikiem rhodamine z czerwoną fluorescencją., Po fuzji komórek, myszy i ludzkie białka, jak widać pod mikroskopem fluorescencyjnym, były segregowane na dwóch połówkach heterokaryonu. Jednak po 40 minutach w temperaturze 37oC białko myszy i człowieka całkowicie się ze sobą zmieszało. Obniżenie temperatury do poniżej 15oC zahamowało ten proces, co wskazuje, że białka mogą swobodnie dyfundować bocznie w błonie i że ruch ten jest spowolniony w miarę obniżania temperatury., Należy jednak zauważyć, że niektóre integralne białka błonowe nie mogą swobodnie poruszać się bocznie w błonie, ponieważ wchodzą w interakcję z cytoszkieletem wewnątrz komórki.

rozkład białek w błonach można ujawnić za pomocą mikroskopii elektronowej przy użyciu techniki freeze-fracture. W tej technice próbka membrany jest szybko zamrażana do temperatury ciekłego azotu, a następnie łamana przez ostry cios. Dwuwarstwowa często dzieli się na jednowarstwowe, odsłaniając wnętrze., Odsłonięta powierzchnia jest następnie powlekana warstwą węgla i cieniowana platyną w celu oglądania powierzchni w mikroskopie elektronowym. Pęknięta powierzchnia błony wykazuje liczne losowo rozmieszczone wypukłości, które odpowiadają integralnym białkom błonowym.

Share

Dodaj komentarz

Twój adres email nie zostanie opublikowany. Pola, których wypełnienie jest wymagane, są oznaczone symbolem *