Biochimie structurale / mécanisme catalytique enzymatique / protéine membranaire intégrale

de nombreuses protéines sont libres de se déplacer latéralement dans le plan de la bicouche. Une expérience utilisée pour montrer cela impliquait la fusion de cellules de souris cultivées avec des cellules humaines dans des conditions appropriées pour former une cellule hybride connue sous le nom d’hétérokaryon. Les cellules de souris ont été marquées avec des anticorps spécifiques aux protéines de souris auxquels le colorant fluorescent vert fluorescéine avait été fixé de manière covalente, tandis que les cellules humaines ont été marquées avec le colorant fluorescent rouge rhodamine., Lors de la fusion cellulaire, les protéines de la souris et de l’homme observées au microscope à fluorescence ont été séparées sur les deux moitiés de l’hétérokaryon. Après 40 minutes à 37oC, cependant, la protéine de la souris et de l’homme s’étaient complètement mélangées. L’abaissement de la température en dessous de 15oC a inhibé ce processus, indiquant que les protéines sont libres de diffuser latéralement dans la membrane et que ce mouvement est ralenti à mesure que la température est abaissée., Il convient cependant de noter que certaines protéines membranaires intégrales ne sont pas libres de se déplacer latéralement dans la membrane car elles interagissent avec le cytosquelette à l’intérieur de la cellule.

la distribution des protéines dans les membranes peut être révélée par microscopie électronique en utilisant la technique de gel-fracture. Dans cette technique, un échantillon de membrane est rapidement congelé à la température de l’azote liquide, puis fracturé par un coup violent. La bicouche se divise souvent en monocouches, révélant l’intérieur., La surface exposée est ensuite recouverte d’un film de carbone et ombragée avec du platine afin que la surface puisse être vue au microscope électronique. La surface fracturée de la membrane se révèle avoir de nombreuses protubérances distribuées aléatoirement qui correspondent à des protéines membranaires intégrales.

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